蜜蜂用抗菌藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)指導(dǎo)原則

1、蜜蜂用抗菌藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)指導(dǎo)原則一、概述（一）定義與目的蜜蜂用抗菌藥物是指用于治療由細(xì)菌或真菌引起蜜蜂疾病的專(zhuān)用藥物。 蜜蜂 用抗菌藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)是評(píng)價(jià)蜜蜂用抗菌藥物的劑量確定試驗(yàn)， 也稱(chēng)U期臨床 試驗(yàn)，目的是了解不同劑量的受試藥物對(duì)蜂群疾病的抗菌效果， 確定受試藥物的 治療作用及劑量。（二）適用范圍本指導(dǎo)原則適用于申報(bào)治療蜜蜂細(xì)菌或真菌疾病的所有抗菌藥物， 包括我國(guó) 未批準(zhǔn)在蜜蜂用的抗菌藥物及各種制劑， 均應(yīng)進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)。 按每種適應(yīng)癥 進(jìn)行試驗(yàn)，一般采用人工誘發(fā)感染（接種） ，條件不具備時(shí)也可選擇自然感染病 例。二、試驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）試驗(yàn)蜂群1. 蜂種：應(yīng)與藥物申報(bào)應(yīng)用的蜂種相一致。2

2、. 來(lái)源：應(yīng)為來(lái)源清楚、飼養(yǎng)規(guī)范的蜂群。3. 群勢(shì)要求：各蜂群的群勢(shì)應(yīng)基本一致， 平均為 6足框以上。在試驗(yàn)前定群， 分別記錄卵、幼蟲(chóng)、蜂蓋子、成年蜂的數(shù)量。4. 試驗(yàn)組蜂群數(shù) ：每個(gè)試驗(yàn)組蜂群數(shù)不低于（含） 5 群。每個(gè)適應(yīng)癥的蜂群 數(shù)不得低于 30 群。5. 自然感染病例的選擇 ：選用的自然感染病例應(yīng)癥狀明顯、典型，并從病例 中分離出致病菌。6. 受試蜂群的人工誘發(fā)感染 ：接種蟲(chóng)齡應(yīng)與疾病發(fā)生的蟲(chóng)齡相適應(yīng)，幼蟲(chóng)病 一般在幼蟲(chóng) 2 日齡時(shí)接種， 成年蜂在幼蜂剛出房時(shí)接種。 誘發(fā)蜂群發(fā)生疾病的典 型癥狀，并能從具典型癥狀的病蟲(chóng)中分離出所接種的病原菌。 試驗(yàn)用菌必須是新 鮮、并與野生菌株致病力、

3、 毒力相當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)物 （實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期人工培養(yǎng)的菌株要定時(shí)回接恢復(fù)致病力與毒力）蜂群疾病的誘發(fā)： 將病原菌混入飼料中通過(guò)飼喂的方式誘發(fā)疾病的發(fā)生。 蜂 群疾病誘發(fā)成功后記錄病情指數(shù)（幼蟲(chóng)病害）或發(fā)病率（成年蜂病害） 。7. 病例淘汰 ：試驗(yàn)期間，試驗(yàn)蜂群若發(fā)生嚴(yán)重的盜蜂、逃群、分蜂，以及其 他蜜蜂疾病發(fā)生、敵害襲擾等，導(dǎo)致無(wú)法評(píng)價(jià)藥效，應(yīng)予以淘汰。（二）試驗(yàn)藥物1. 受試藥物及來(lái)源 ：受試藥物應(yīng)與擬上市的制劑完全一致、同一劑型，有完 整的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)， 有合乎規(guī)定格式的說(shuō)明書(shū)。 受試藥物應(yīng)來(lái)源于同一批號(hào)， 由 申報(bào)單位自行研制并在 GMP 驗(yàn)收合格的車(chē)間生產(chǎn)的樣品，并提供農(nóng)業(yè)部認(rèn)可的 檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的

4、產(chǎn)品檢驗(yàn)合格報(bào)告。2. 對(duì)照藥物及來(lái)源 ：對(duì)照藥物應(yīng)當(dāng)是已經(jīng)在我國(guó)批準(zhǔn)上市，與受試藥物屬于 同一類(lèi)的藥物，適應(yīng)癥相同、劑型相同、給藥方式相同。來(lái)源可以從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)或 者由申報(bào)單位提供，并提供由農(nóng)業(yè)部認(rèn)可的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的產(chǎn)品檢驗(yàn)合格報(bào)告。（三）給藥方案按照試驗(yàn)方案進(jìn)行給藥， 包括給藥的時(shí)間、 給藥的劑量、 多次給藥的給藥間 隔時(shí)間、總給藥次數(shù)。對(duì)照藥物應(yīng)嚴(yán)格按照批準(zhǔn)的說(shuō)明書(shū)給藥。1. 配制含藥物糖漿給藥法 ：用飽和糖漿配制含藥糖漿，在傍晚蜜蜂均回巢時(shí) 飼喂，含藥糖漿的飼喂量以蜂群在 2 日內(nèi)食盡為宜。2. 配制含藥花粉給藥法：先用少量稀糖漿（糖：水二1:2）將花粉粒濕潤(rùn)12 小時(shí)，然后將藥物均勻地

5、拌入花粉中，再用濃糖漿（糖：水二 1:1）將含藥花粉 拌成花粉團(tuán)。 拌入糖漿量以花粉團(tuán)用手稍捏緊指間無(wú)糖漿流出， 松手花粉團(tuán)不松 散為宜。將含藥花粉團(tuán)壓成餅狀置于蜂箱內(nèi)上框梁上供蜜蜂自行取食， 飼喂量以 蜂群在 2 日內(nèi)食盡為宜。（四）試驗(yàn)周期試驗(yàn)周期為整個(gè)給藥療程（治療期）加上停止給藥后的 21 天時(shí)間。（五）試驗(yàn)分組1. 選用人工誘發(fā)感染，單方制劑試驗(yàn)要求分成以下六組：（ 1 ）空白對(duì)照（不感染不給藥）組；（2）感染不給藥組（陰性對(duì)照組）；（3）受試藥物推薦劑量加倍組；（4）受試藥物推薦劑量組；（5）受試藥物推薦劑量減半組；（6）藥物對(duì)照組（陽(yáng)性對(duì)照組）。2. 選用自然感染病例，單方制劑試

6、驗(yàn)要求分成以下五組：（1）空白對(duì)照（不感染不給藥）組（2）受試藥物推薦劑量加倍組；（3）受試藥物推薦劑量組；（4）受試藥物推薦劑量減半組；（5）藥物對(duì)照組（陽(yáng)性對(duì)照組）。3. 如為復(fù)方制劑還應(yīng)增設(shè)單個(gè)藥物的推薦劑量組。（六）觀察指標(biāo)詳細(xì)觀察記錄試驗(yàn)開(kāi)始后、給藥前、給藥后和停藥后各處理組蜂群的群勢(shì)變 化情況、病情指數(shù)或發(fā)病率的變化情況，計(jì)算防治效果。1. 蜜蜂幼蟲(chóng)病情指數(shù)和藥物防治效果的計(jì)算蜜蜂幼蟲(chóng)病檢查子脾時(shí)，按發(fā)病輕重程度分級(jí)。0級(jí)：子脾上未發(fā)現(xiàn)病蟲(chóng)；1級(jí)：病害蟲(chóng)數(shù)占總幼蟲(chóng)數(shù)，V 5%;2級(jí)：病害蟲(chóng)數(shù)占總幼蟲(chóng)數(shù)，5%30%；3級(jí)：病害蟲(chóng)數(shù)占總幼蟲(chóng)數(shù)，30%。宀厲“”各級(jí)病情指數(shù)各級(jí)病脾數(shù)病情

7、指數(shù)最高病情指數(shù)檢查總脾數(shù)其中病情指數(shù)越大，說(shuō)明病害越嚴(yán)重對(duì)于人工誘發(fā)感染病例：防治效果（%）感染不給藥組（陰性對(duì)照組）病情指數(shù) 受試藥物組病情指數(shù)感染不給藥組（陰性對(duì)照組）病情指數(shù)對(duì)與自然感染病例:防治效果（%）空白對(duì)照（不感染不給 藥）組病情指數(shù) 受試藥物組病情指數(shù) 空白對(duì)照（不感染不給 藥）組病情指數(shù)2. 成年蜜蜂藥物防治效果的計(jì)算對(duì)于人工誘發(fā)感染病例：防治效果（%）100%100%感染不給藥組（陰性對(duì)照組）病情指數(shù) 受試藥物組病情指數(shù) 感染不給藥組（陰性對(duì)照組）病情指數(shù)對(duì)與自然感染病例:防治效果（%）空白對(duì)照（不感染不給 藥）組病情指數(shù) 受試藥物組病情指數(shù) 空白對(duì)照（不感染不給 藥）組

8、病情指數(shù)（七）統(tǒng)計(jì)分析選擇合適的統(tǒng)計(jì)分析程序，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。將受試藥物組與對(duì)照組（包括 空白對(duì)照組、藥物對(duì)照組或感染不給藥組）的防治效果進(jìn)行 X2檢驗(yàn)，確定受試 藥物的治療效果及其劑量。（八）結(jié)果評(píng)價(jià)臨床藥效試驗(yàn)結(jié)果按下列標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)：1高效：疾病完全被控制，子脾上無(wú)病蟲(chóng)，防治效果 R0%。2中效：病情明顯好轉(zhuǎn)，子脾上病蟲(chóng)數(shù)極少，防治效果 紋5%。3. 有效：病情有所好轉(zhuǎn)，防治效果為0%。4. 無(wú)效：用藥后病情無(wú)明顯好轉(zhuǎn)，防治效果60%。三、試驗(yàn)報(bào)告為公正、科學(xué)地評(píng)價(jià)藥物療效，對(duì)試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容做如下要求：1. 試驗(yàn)?zāi)康摹?. 試驗(yàn)蜂群應(yīng)注明品種。3受試藥物需注明蜂藥名稱(chēng)、生產(chǎn)廠家、規(guī)格、生產(chǎn)批號(hào)及用法與用量。4