蟲草多糖對小鼠皮膚光老化的保護作用

1、蟲草多糖對小鼠皮膚光老化的保護作用 09-09-03 14:54:00 編輯：studa20 作者：李華 葉杰 李伯勤 應(yīng)馨萍【摘要】 目的探討冬蟲夏草多糖對小鼠皮膚光老化的保護作用。方法用8-甲氧補骨脂素（8-MOP）聯(lián)合UVA制備小鼠皮膚光老化模型，在造模前給皮膚涂抹蟲草多糖溶液，造模后24 h內(nèi)取皮膚組織，進行HE染色和電鏡觀察并檢測組織羥脯氨酸含量。結(jié)果光老化組皮膚真皮層明顯增厚，炎細胞浸潤，皮脂腺不規(guī)則增生，纖維組織疏松紊亂，常見斷裂，成纖維細胞形態(tài)不規(guī)則，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)少，蟲草多糖保護組明顯改善，羥脯氨酸含量較光老化組明顯增加。結(jié)論 蟲草多糖對皮膚光老化具有保護作用。 【關(guān)鍵詞】 蟲草多糖

2、 皮膚 光老化蟲草多糖（CP）是蟲草的主要活性成分之一，具有抗肝纖維化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降血糖等藥理作用1。近年研究發(fā)現(xiàn)蟲草多糖對急慢性腎衰有改善作用2，3，抗衰老方面的研究相對較少，李連德等4采用從蟲草深層發(fā)酵產(chǎn)物中提取的多糖進行果蠅抗衰老實驗，結(jié)果表明，不同來源的蟲草多糖對果蠅壽命均有不同程度的延長作用，從而證明蟲草多糖有延緩衰老的作用；并且延壽的效果隨純度的增大而提高。皮膚是機體最大的器官，皮膚老化是機體衰老的重要組成部分，與許多皮膚病如脂溢性角化、日光性角化、基底細胞癌、鱗狀細胞癌等的發(fā)生也有著病因?qū)W的關(guān)系，而且有損于美容，因此預防和延緩皮膚衰老已成為生命科學研究的熱點之一。皮膚老化

3、包括兩個過程，內(nèi)在老化(intrinsic或chrondogic aging)和光老化(actinic aging或Photoaging)5。前者主要受遺傳和代謝等因素的影響，可通過改善全身營養(yǎng)代謝平衡等措施加以防護；后者則主要由長期紫外線照射所致，只能通過避免陽光照射和使用防曬藥物來預防，而在實際生活中后者是很難避免的。有人用冬蟲夏草來抗皮膚衰老，但其是否有效及其作用機制還未見報道。本課題就蟲草多糖對皮膚光老化的保護作用進行了實驗研究。 1 材料 1.1 藥物和制劑蟲草多糖由中草藥冬蟲夏草提取，純度大于95，由上海中醫(yī)藥大學肝病所提供。組織羥脯氨酸試劑盒,購自南京建成生物工程研究所。 1.2

4、 動物昆明種小鼠，雌鼠，體重2025 g，78周齡，由上海中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供。 2 方法 2.1 動物分組及模型制備用電動理發(fā)器將小鼠背部皮膚剃凈，約2 cm2 cm，裸露皮膚，隨機分3組。第1組為正常對照組，皮膚每天涂抹一次雙蒸水，無其他任何處理；第2組為光老化模型組，皮膚每天涂抹1% 8-甲氧補骨脂素（8-MOP）1次，1.52 h后，給予190 w的UVA照射，累積照射138 h（累積強度95 J/cm2），照射結(jié)束后24 h內(nèi)取皮膚；第3組為藥物保護組，皮膚每天涂抹濃度為20 mg/ml的蟲草多糖溶液，稍干后再涂抹18MOP，1.52 h后，給予190 w的UVA照射，累積照射

5、138 h（累積強度95 J/cm2），照射結(jié)束后24 h內(nèi)取皮膚；3組同時取皮膚組織，固定、HE染色和電鏡，并取組織同時進行羥脯氨酸含量測定。 2.2 標本制備 3 結(jié)果 3.1 肉眼觀察正常對照組，皮膚色澤紅潤有彈性，光老化組皮膚顏色灰暗，彈性差，局部變硬，毛發(fā)脫落，蟲草多糖保護組，肉眼看與正常對照無差異。 3.2 HE染色結(jié)果光老化組較正常對照組相比，出現(xiàn)典型的光老化病理變化：表皮厚度不均一，常有脫落，真皮層變厚明顯，炎性細胞浸潤多見，微血管擴展，毛囊減少，皮脂腺不規(guī)則增生。蟲草多糖保護組較光老化組，病理變化有明顯改善，真皮層較光老化組薄，炎性細胞浸潤較少。見圖1。 3.3 電鏡結(jié)果電鏡

6、下觀察真皮層的纖維分布和成纖維細胞的形態(tài)，結(jié)果顯示，正常對照組，纖維分布整齊，規(guī)則、緊密，無斷裂現(xiàn)象，成纖維細胞外形清晰，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴展明顯，說明成纖維細胞的蛋白質(zhì)合成功能旺盛；光老化組，纖維分布疏松，局部出現(xiàn)不規(guī)則分布，有斷裂現(xiàn)象，成纖維細胞形態(tài)變形，外形不規(guī)則，細胞質(zhì)較少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少，并且有變異的細胞器，說明細胞的蛋白質(zhì)合成不活躍；蟲草多糖保護組，明顯改善，纖維排列和成纖維細胞形態(tài)及細胞器更接近于對照組。見圖2。 a對照組 b光老化組 c蟲草多糖保護組 圖1 實驗皮膚HE染色光鏡觀察圖（100） a對照組 b光老化組 c蟲草多糖保護組 圖2 電鏡下觀察各組小鼠皮膚結(jié)果（6000） 3.4 羥脯氨酸含量的測定取各組皮膚組織測定組織羥脯氨酸含量，計算平均值，并做各組間的t檢驗分析。光老化組的羥脯氨酸含量（羥脯氨酸/總蛋白）