當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)高尿酸血癥腎損害的保護(hù)作用研究

1、當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)高尿酸血癥腎損害的保護(hù)作用研究                          作者：李亞芹 ，劉文敏，馬煥云 【摘要】   目的觀察當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)高尿酸血癥大鼠腎損害的影響。方法將50只大鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、模型組、 治療 低、中、高3個(gè)劑量組。模型組給予大量高尿酸飲食，造成腎損害模型，對(duì)照組給予普通飲食，治療組給予高尿酸飲食

2、的同時(shí)給予當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高3個(gè)治療劑量；14 d后分別測(cè)定各組大鼠腎組織所分泌的一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（NOS）活性，同時(shí)測(cè)定腎組織SOD和MDA含量、治療組與模型組比較，觀察各項(xiàng)指標(biāo)有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果與對(duì)照組相比，高尿酸血癥組大鼠腎組織細(xì)胞產(chǎn)生的NO含量和NOS、SOD均減少，MDA升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療組與模型組相比較，給予當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療后血清尿酸(UA)水平降低，同時(shí)腎組織含量升高，MDA降低，其中中劑量組與模型組相比有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），低劑量和高劑量組與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)高尿酸血癥造成的腎損害有保護(hù)作

3、用。 【關(guān)鍵詞】   當(dāng)歸補(bǔ)血湯； 高尿酸血癥； 腎功能損害Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of Dangguibuxuetang on the kidney function of  hyperuricemic.MethodsFifty rats were divided into model group,control group and treated group(low，middle，hige dose). The model group was given large dose of hyperuricem

4、ic food to lead to the kidney harm, the control group was given normal food, treated group  was given hyperuricemic food and Dangguibuxuetang (low，middle，hige dose). Fourteen days  later ,both NO，NOS and SOD，MDA in kidney tiusse were dertermined,at the same time, the uric level  in se

5、rum  was dertermined and statistics.Results(1): Model group compared with control group,the levels of NO，NOS and SOD were lower than those in control group(P<0.05),the level of MDA was higher than control group. (2): Treated group compared with model group,the levels of NO，NOS and SOD in kid

6、ney tiusse were increased,  MDA and UA were decreased,but only the data in middle dose group had statistics value(P<0.05).ConclusionDangguibuxuetang can increase the kidney function of  hyperuricemic by decrease the serum uric acid.Key words： Dangguibuxuetang;  Hyperuricemic; 

7、 Kidney function harm    隨著我國(guó)居民飲食結(jié)構(gòu)中動(dòng)物蛋白攝入比例的增加,高尿酸血癥的人群也在日益增多。臨床上我們經(jīng)常發(fā)現(xiàn)高尿酸血癥多伴隨腎臟病、高血壓病和心血管疾病出現(xiàn)。近期的臨床及實(shí)驗(yàn)研究表明,尿酸對(duì)心、腎有著直接的致病作用1。據(jù)報(bào)道，對(duì)6403例患者的觀察發(fā)現(xiàn),血尿酸是腎功能異常的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,且其風(fēng)險(xiǎn)甚至高于尿蛋白量。    當(dāng)歸補(bǔ)血湯緣于金代李杲的內(nèi)外傷辨惑論?景傷胃氣論，全方由黃芪和當(dāng)歸按51組成，是 中國(guó) 傳統(tǒng)的補(bǔ)氣養(yǎng)血的代表方劑，主治勞倦內(nèi)傷，氣弱血虛，陽(yáng)浮外越。在臨床上用于勞累性心絞痛和心肌梗塞

8、后正虛邪戀，氣血雙虧，心失所養(yǎng)等癥2。該方應(yīng)用廣泛，但關(guān)于它對(duì)尿酸水平影響的研究很少。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給予高尿酸血癥大鼠當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療，一方面觀察其對(duì)尿酸水平的影響，另一方面觀察其對(duì)高尿酸性腎損害的影響。 1  材料 1.1  動(dòng)物 Wistar 大鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量（250±10）g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。合格證編號(hào)805108。1.2  藥品腺嘌呤（Adenine），批號(hào)H65821，購(gòu)自南京建成生物制品有限公司；乙胺丁醇片（Ethambuto）,批號(hào)T08B524，購(gòu)自杭州民生藥業(yè)集團(tuán)有限公司；當(dāng)歸補(bǔ)血湯，當(dāng)歸黃芪為51，由河北省保定古

9、城醫(yī)藥公司生產(chǎn)。試劑盒均購(gòu)自南京建成生物制品有限公司。1.3 儀器雙功能水浴恒溫振蕩器，型號(hào)SHA?BA，金壇市杰瑞爾電器有限公司產(chǎn)品；漩渦混勻器，型號(hào)IKA?MSZ，IKA  Works  Guangzhou產(chǎn)品；低速臺(tái)式離心機(jī)，型號(hào)TDL?5?A，上海安亭 科學(xué) 儀器廠產(chǎn)品；501?A型超級(jí)恒溫器，上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司產(chǎn)品；Stat?Fax?2100酶標(biāo)儀，Awareness  technologying產(chǎn)品；高速冷凍離心機(jī)，型號(hào)GL?16G?并潁?上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品。 2 方法 2.1  動(dòng)物模型的制備高尿酸血癥動(dòng)物模型的建立采用腺嘌呤+乙胺

10、丁醇法， 腺嘌呤200 mg/（kg?d）+乙胺丁醇250 mg/（kg?d），溶于2 ml生理鹽水中，灌胃1次/d，共14 d，此種方法制造的模型尿酸水平穩(wěn)定升高，乙胺丁醇的應(yīng)用增加了尿酸在體內(nèi)的蓄積3。2.2  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成5組，即對(duì)照組、模型組，治療低、中、高3個(gè)劑量組。各組動(dòng)物均為雌雄各半，治療組給予除高尿酸飲食外，同時(shí)以當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高3個(gè)劑量分別按3.0，6.0，12 g/（kg?d）給予大鼠灌胃，1次/d，14 d后處死大鼠，腹主動(dòng)脈取血，高速離心后取血清進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)留取腎組織進(jìn)行生化指標(biāo)的檢測(cè)。2.3  檢測(cè)指標(biāo)及方法分別檢測(cè)對(duì)

11、照組、模型組與治療組中血清尿酸水平，觀察造模是否成功，同時(shí)觀察當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)尿酸的影響。檢測(cè)腎組織中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛(MDA)的水平，觀察組織抗氧化情況及損傷的程度；同時(shí)檢測(cè)腎組織中一氧化氮合酶（NOS）的活性，各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定均采用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒均購(gòu)自南京建成生物制品有限公司，具體操作步驟見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。2.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以±s表示，采用F檢驗(yàn)，q檢驗(yàn)，t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05。 3  結(jié)果 3.1  對(duì)血清尿酸水平的影響見(jiàn)表1。表1  對(duì)照組、模型組與治療組血清尿酸水平的比較(略)3.2  對(duì)腎組織中S

12、OD、MDA水平的影響見(jiàn)表2。表2  治療組與對(duì)照組腎組織中SOD、MDA水平的變化(略)3.3  對(duì)腎組織中NO及NOS水平的影響見(jiàn)表3。表3  各組腎組織中NO及NOS變化(略)    表3結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，模型組腎組織中NO、NOS降低，數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異（P0.05）。經(jīng)當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療后，各組腎組織中NO、NOS、均較模型組升高，說(shuō)明當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)腎組織有保護(hù)作用，其中中劑量組數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異（P0.05）。 4  討論     本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，對(duì)于尿酸增高

13、造成的腎損害，給予當(dāng)歸補(bǔ)血湯 治療 后，腎臟的抗脂質(zhì)過(guò)氧化的能力增強(qiáng)，體現(xiàn)在與模型組相比，經(jīng)當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療后，腎組織中SOD活力升高，而代表組織損害的MDA卻降低，當(dāng)歸補(bǔ)血湯高、中、低3種治療劑量均有效，但其中中劑量治療組與模型組相比數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同樣，給予當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療后腎臟產(chǎn)生的NO、TNOS與模型組相比均有升高，其統(tǒng)計(jì)學(xué)意義同其產(chǎn)生的SOD和MDA。說(shuō)明給予高尿酸血癥腎損害的大鼠中等劑量的當(dāng)歸補(bǔ)血湯后腎功能可以得到明顯改善。    高尿酸造成的腎損害是指由短時(shí)間內(nèi)大量尿酸結(jié)晶堆積于腎臟集合管、腎盂和輸尿管所致。由于尿液中尿酸濃度驟然增高形成過(guò)飽和狀態(tài),顯

14、微鏡下可見(jiàn),管腔內(nèi)尿酸結(jié)晶沉積,形成晶體或呈雪泥樣沉積物，可阻塞腎小管,導(dǎo)致近端腎小管擴(kuò)張,但腎小球結(jié)構(gòu)是正常的，這些沉積物可導(dǎo)致梗阻及急性腎衰竭4。長(zhǎng)期但不嚴(yán)重的高尿酸血癥患者易出現(xiàn)腎臟的小管間質(zhì)的慢性病變，其嚴(yán)重程度與血尿酸升高的持續(xù)時(shí)間和幅度有關(guān)。慢性高尿酸血癥可導(dǎo)致腎臟纖維形成，腎小球硬化，動(dòng)脈硬化及動(dòng)脈壁增厚5。    當(dāng)歸補(bǔ)血湯組方簡(jiǎn)單，黃芪當(dāng)歸可靈活配伍，達(dá)到益氣補(bǔ)血活血的目的，療效確切。臨床上關(guān)于當(dāng)歸補(bǔ)血湯的研究很多，雷燕等6，7研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯具有增加缺血心肌微血管密度和促進(jìn)血管生成因子表達(dá)的作用，使血管密度增加，可能與其活血作用有關(guān)，同時(shí)有

15、促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用，其機(jī)制尚不明確。黃水清等8的研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯具有較好地降低總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的作用，而且還可以通過(guò)調(diào)整血脂使家兔動(dòng)脈粥樣硬化的脂質(zhì)斑塊面積縮小，故有抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。動(dòng)脈粥樣硬化和高脂飼料喂養(yǎng)的動(dòng)物血中超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化物酶的活性降低，而相應(yīng)的過(guò)氧化脂質(zhì)丙二醛（MDA）卻升高9，給予當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療后，血清中MDA明顯降低，而SOD活力有明顯的提高，SOD的提高對(duì)過(guò)氧化脂質(zhì)MDA的清除有較大的作用，故SOD的升高和MDA的降低是當(dāng)歸補(bǔ)血湯的抗動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制之一。    本實(shí)驗(yàn)研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯可以通過(guò)

16、降低尿酸水平而達(dá)到改善血管腎功能的作用。其機(jī)制可能與下列方面有關(guān)：尿酸可以阻滯細(xì)胞外過(guò)氧化氫對(duì)SOD的降解，SOD是維護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞 和血管功能的關(guān)鍵酶，可以催化過(guò)氧化氫和超氧陽(yáng)離子反應(yīng)，從而阻止NO的滅活，維護(hù)NO的濃度和維護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的功能。所以尿酸增高可以導(dǎo)致血清中SOD降低10，而降低了尿酸水平就可以改善腎血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，這些作用可能與其益氣活血作用有關(guān)。當(dāng)歸補(bǔ)血湯降低尿酸及改善腎血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用療效肯定，其機(jī)理復(fù)雜，有待進(jìn)一步探討。    當(dāng)歸補(bǔ)血湯組方簡(jiǎn)單，黃芪、當(dāng)歸可靈活配伍，達(dá)到益氣補(bǔ)血活血的目的，療效確切。本研究提示，當(dāng)歸補(bǔ)血湯可以從多個(gè)環(huán)節(jié)改

17、善高尿酸血癥對(duì)腎組織的損害作用，延緩腎纖維化的進(jìn)展，但其機(jī)制尚不完全明確，有待進(jìn)一步研究。 【 參考 文獻(xiàn) 】   1Johson RI, Kang DH, FEig D, et al. Is there a pathogenetic role for uric acid in hypertension and cardiovascular and renal disease?J. Hypertension ,2003, 41:1183.2張瑩雯，謝 丹.當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)糖尿病大鼠腎組織的保護(hù)作用J.中成藥，2005，1 （27）：75.3譚寧.高尿酸血癥動(dòng)物模型的研究進(jìn)展J.醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2003，16（8）：896.4陳香美，吳 鏑.尿酸性腎病J.中華內(nèi)科雜志，2005，44（3）:231.5GhEI M, M inailescu M, Levinson D. advances. Curr Rheumatol Re. 2002， 4 :270.6雷燕，王培利，林 燕.當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌梗死衰老大鼠缺血心肌的促血管生成作用J. 中國(guó) 中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2005，11（12）：123.7雷燕，高清.當(dāng)歸補(bǔ)血湯促血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用的研究J.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，23（10）：753.8黃水清，