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1、資料常用pH緩沖溶液的配制和pH值 · 常用pH緩沖溶液的配制和pH值常用pH緩沖溶液的配制和pH值序號(hào) 溶液名稱 配制方法 pH值1 氯化鉀-鹽酸 13.0 ml 0.2 mol/L HCl 與25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均勻后,加水稀釋至100 ml 1.72 氨基乙酸-鹽酸 在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml濃鹽酸,再加水稀釋至1L 2.3 3 一氯乙酸-氫氧化鈉 在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后,加40 g NaOH,溶解完全后再加水稀釋至1 L 2.8 4 鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸 把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二
2、甲酸氫鉀溶液與6.0 ml 0.1 mol/L HCl混合均勻,加水稀釋至100 ml 3.6 5 鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與17.5 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml 4.8 6 六亞甲基四胺-鹽酸 在200 ml水中溶解六亞甲基四胺40 g,加濃HCl 10 ml,再加水稀釋至1 L 5.4 7 磷酸二氫鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氫鉀與23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml 6.8 8 硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0
3、.2 mol/L的硼酸-氯化鉀與4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻,加水稀釋至100 ml 8.0 9 氯化銨-氨水 把0.1 mol/L 氯化銨與0.1 mol/L 氨水以2:1比例混合均勻 9.1 10 硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉 把25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化鉀與43.9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml 10.0 11 氨基乙酸-氯化鈉-氫氧化鈉 把 49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化鈉與51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻 11.6 12 磷酸氫二鈉-氫氧化鈉 把 50.0 ml 0.
4、05 mol/L Na2HPO4與26.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻,加水稀釋至100 ml 12.0 13 氯化鉀-氫氧化鈉 把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl與66.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml 13.0一、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事項(xiàng)1藥品要有較好的質(zhì)量 試劑分為優(yōu)級(jí)純(保證試劑,Guaranteed reagent,GR)、分析試劑(Antalytical reagent,AR)化學(xué)純(Chemical pure,CP)和實(shí)驗(yàn)試劑(Laboratory reagent,LR)等等。工業(yè)用的化學(xué)試劑,雜質(zhì)較
5、多,只在個(gè)別情況下應(yīng)用,如配洗液用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2藥品稱量要精確。3配制試劑用水應(yīng)用新鮮的去離子水或雙蒸餾水,比電阻值在50萬歐姆以上,pH在5.57.0之間才可應(yīng)用,在組織培養(yǎng)等特殊用途時(shí)應(yīng)注意此項(xiàng)要求,配制一般化驗(yàn)用溶液只要求用雙蒸餾水或去離子水。配好后的溶液,應(yīng)立即除菌處理(如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì)),以防雜菌生長(zhǎng)。(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸緩沖液11/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液的配制:稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4,AR)9.08g,用蒸餾水溶解后,傾入1 000ml容量瓶?jī)?nèi),再稀釋至刻度(1 000ml)。21/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液的配制:稱
6、取無水磷酸氫二鈉(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O 11.87g)用蒸餾水溶解后,放入1 000ml容量瓶?jī)?nèi),再加蒸餾水稀釋至刻度(1 000ml)。3按附表的比例,配制成不同pH值的緩沖溶液。附表1 磷酸鹽緩沖液配制法(單位:毫升)pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO4pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218
7、.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0UID18 帖子722 精華16 積分8 閱讀權(quán)限10 來自宜昌 在線時(shí)間49 小時(shí) 注冊(cè)時(shí)間2006-3-2 最后登錄2010-9-11
8、0;查看個(gè)人網(wǎng)站查看詳細(xì)資料· (三)0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na2HPO4(ml)0.15Mol/L NaH2PO4(ml)6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。NaH2PO4·H2O分子量=138.00
9、 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。(四)0.2Mol/L PB緩沖液附表3 0.2mol/L PB緩沖液配制法pH0.2 Mol/L Na2HPO4(ml)0.2Mol/L NaH2PO4(ml)5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na2HPO4·
10、;2 H2O溶液35.61g/LNa2HPO4·12 H2O溶液含71.64g/L0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/LNaH2PO4·2 H2O溶液含31.21g/L欲配0.1Mol/L PB緩沖液則在0.2Mol/L PB緩沖液的基礎(chǔ)上加H2O稀釋1倍即可。欲配制PBS液時(shí),則在溶液中加0.85的NaCl溶液即可。(五)無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水(PBS)(0.15Mol/L PH 7.2)NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g(如為Na2HPO4·12H2O,則為2.89g)KH2PO4 0.2g將上述試劑依
11、次溶于1 000ml去離子水中,完全溶解后,115高壓滅菌10min15min,存在4冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細(xì)胞分散劑以及洗滌細(xì)胞培養(yǎng)物。UID18 帖子722 精華16 積分8 閱讀權(quán)限10 來自宜昌 在線時(shí)間49 小時(shí) 注冊(cè)時(shí)間2006-3-2 最后登錄2010-9-11 查看個(gè)人網(wǎng)站查看詳細(xì)資料(六)硼酸鹽緩沖液(Borate saline buffer)1硼酸(3BO3)0.2Mol/L硼酸:硼酸12.37g加水至1 000ml。2硼砂(Na2B4O7)0.05Mol/L硼砂:硼砂19.
12、07g加水至1 000ml。附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸緩沖液配制法pH0.05Mol/L硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml)pH0.05Mol/L硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0(七)巴比妥緩沖液1pH8.2離子強(qiáng)度0.05Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥鈉 47.6g蒸餾水 3 000ml1.17N HCl 55.0ml(1.17 N HCl=193ml濃HCl加1 807ml蒸餾水) 將4.76g巴比妥鈉溶于3 000ml蒸餾水
13、。 加1.17 N HCl 55ml。 用HCl調(diào)節(jié)pH到8.2,并加蒸餾水至4 265ml。2pH8.4 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥 1.84g巴比妥鈉 10.30g加蒸餾水至 1 000.00ml3pH8.6 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥 1.66g巴比妥鈉 12.76g加蒸餾水 1 000.00ml(八)0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液 見表附表5附表5 0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1Mol/LHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1Mol/LHCl(ml)233723379.108.952558.067.902
14、527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5(九)三羥甲基甲烷鹽酸緩沖液(TrisHCl緩沖液)不同pH,0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羥甲基氨基甲烷加ml0.1NHCl,加水稀釋至100ml(見下表)附表6 TrisHCl緩沖液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl
15、(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)233723379.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羥甲基氨基甲烷(Tris)分子量=121.1
16、40.2Mol/L三羥甲基氨基甲烷:Tris24.23g,加水至1 000ml。0.1NHCl:取HCl8.6ml,加水至1 000ml。UID18 帖子722 精華16 積分8 閱讀權(quán)限10 來自宜昌 在線時(shí)間49 小時(shí) 注冊(cè)時(shí)間2006-3-2 最后登錄2010-9-11 查看個(gè)人網(wǎng)站查看詳細(xì)資料· (十)0.5Mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液NaHCO3 3.70gNa2CO3 0.60g溶于600.00ml蒸餾水中即得。不用時(shí)塞緊瓶塞,以免吸收空氣中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。(
17、十一)甘油磷酸緩沖液1配制pH8.0磷酸緩沖液0.1Mol/L Na2HPO4 94.50ml0.1N NaH2PO4 5.50ml混合即可29份甘油與1份pH8.0磷酸緩沖液混合,即為甘油磷酸緩沖液。用途:用于免疫熒光試驗(yàn)。(十二)Hanks液1貯存液NaCl 80.00gKCl 4.00gNa2HPO4·12 H2O 1.52gKH2PO4 0.60g葡萄糖 4.00g0.4酚紅液 50.00ml雙餾水加至 100.00ml115高壓滅菌15min,冰凍保存。2工作液貯存液 1份雙餾水 9份115高壓滅菌15min。臨用時(shí)用滅菌的5.6NaHCO3液調(diào)pH值至7.2左右(溶液呈橙
18、紅色)。(十三)萘(鈉)氏試劑(Nesslers reagent)配方1:氯化汞 6.0g碘化鉀 12.4g20NaOH 30ml加蒸餾水至 100ml配方2:碘化汞 11.5g碘化鉀 8g蒸餾水 50ml(完全溶解后)過濾,加20NaOH 50ml。用途:檢測(cè)溶液中氨離子。(十四)阿氏(Alsevers)液葡萄糖 2.05g檸檬酸鈉 0.80g氯化鈉 0.42g蒸餾水 100ml溶解后,以10%檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6.1,過濾,分裝,10磅10min滅菌,4保存。(十五)青、鏈霉素混合液(簡(jiǎn)稱SP液或雙抗液)青霉素(40萬U) 5支鏈霉素(200萬g) 1支分別溶于100ml滅菌無離子水中或共同溶于200ml滅菌無離子水中,混合后分裝小瓶,置-10-20冰箱保存?zhèn)溆茫?萬單位g/ml)。臨用時(shí),按1%的量加入營(yíng)養(yǎng)液或其他溶液中,最后濃度是青霉素100U/ml,鏈霉素100ug/ml。(十六)洗液(清潔液)配方1:重鉻酸鉀 150g蒸餾水 300ml濃硫酸 3 000ml將重鉻酸鉀加入蒸餾水中,使之自然溶解或水浴溶解,亦可在
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