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文檔簡介

1、冷凍切片技術實驗及冷凍切片機的基本操作實驗目的1 掌握冷凍切片的方法2 掌握冷凍切片的用途實驗原理冷凍切片是借助低溫使組織凍結達到一定的硬度并通過冰起支撐作用來進行切片的一種方法。速凍 可減小冰晶直徑，避免組織細胞損傷。制冷 壓縮機佛里昂制冷、半導體溫差電制冷實驗材料新鮮動物肝臟實驗方法1準備 將儀器打開，樣品臺溫度調至 -40 。2取材 組織必須新鮮，盡可能不經水洗。取材時應避免組織擠壓，防止人為假象。樣品大小 5X5X3mm。3速凍 將樣品放在樣品臺上，樣品四周加水加固，冷凍5 10min.4切片 升高溫度至 -15（視樣品而定），約5min 后開始切片，厚度 6-15um 。5制片 將切

2、片直接放在載波片上或先放在盛水（固定液）的培養(yǎng)皿中再轉移到載波片上。6染色觀察 吸干水，加一滴蘇木精，加蓋玻片，用顯微鏡觀察。7記錄 將觀察的結果繪于實驗報告上，整理自己用過的物品。附：切片溫度的設定腦 -12肝臟 -14腎臟 -16肌肉 -20皮膚 -25多脂肪組織 -30經過固定的組織 -5 -10附：快速永久制片1 固定 70乙醇 5 10min ；2 水洗 2min ；3 蘇木精染色5 10min ；4 脫色0.1%HCl 至變紅；5 藍化 0.1NaOH 變藍；6 水洗5 10s ；7 脫水 70% 2min ；8 伊紅染色510min ；9 脫水 100%乙醇 2minX2；10 透明 二甲苯 3min；11 封片中性樹膠封片。冷凍切片機的基本操作：1.在使用前 2 小時開啟電源，并將溫度設定在-25 ;2.將適當大小和厚度的標本放在蘑菇狀杯上，加上冷凍蠟，夾在切片機的固定槽內;3.準備好玻片，選擇切片厚度，搖動手柄，即可做成切片;4.將做成的切片小心的吸附在玻璃片上;5.使用結束后關閉電源,清潔腔體和擦干水氣, 做好使用記錄。6.為讓水蒸氣

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