增殖細胞核抗原在胃腸道平滑肌腫瘤中表達的臨床意義

1、    增殖細胞核抗原在胃腸道平滑肌腫瘤中 表達的臨床意義        目的探討增殖細胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)表達與胃腸道平滑肌腫瘤(gastrointestinal smooth muscle tumor,GISMT)的關(guān)系。方法采用免疫組化S-P法檢測86例GISMT中PCNA的表達情況。結(jié)果PCNA表達按正常胃腸道平滑肌組織、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、級的順序依次明顯遞增(P0.01)。同時，PC

2、NA的表達與腫瘤的性質(zhì)、大小、中心有無壞死亦有明顯關(guān)系(P0.01)。PCNA低表達組的5年生存率明顯高于高表達組(P0.05)。結(jié)論PCNA是反映GISMT生物學(xué)特性的良好標志物，可作為判斷GISMT性質(zhì)、惡性程度、轉(zhuǎn)移及預(yù)后的客觀指標。關(guān)鍵詞 胃腸腫瘤 平滑肌瘤 平滑肌肉瘤 增殖細胞核抗原 Expression and significance of PCNA in gastrointestinal smooth muscle tumors Wang Qiang,Sun Wei,Zhao Yi,et al. Department of Surgery,The Second Affiliat

3、ed Hospital of China Medical University, Shenyang 110003.Objective In order to determine the relationship between proliferative cell nuclear antigen (PCNA) expression and prognosis of gastrointestinal smooth muscle tumors(GISMT). Methods We studied 86 cases of GISMT by the immunohistochemical staini

4、ng S-P method for PCNA.Results The expression of PCNA increased significantly according to the following order:normal smooth muscle tissues of the gastrointestinal tract,leiomyomas, grade-leiomyosarcomas,grade-leiomyosarcomas,grade- leiomyosarcomas(P0.01);Meantime,the expression of PCNA was associat

5、ed with the tumors with or without contiguous organ invasion or distant metastasis,the size of tumors,the tumors with or without central necrosis(P0.01).The five-year survival rate was significant higher in patients with low-expression of PCNA than those with high-expression of PCNA(P0.05).Conclusio

6、nPCNA is the valuable indicator of biological characteristics of GISMT,and can be used as an objective parameter in distingushing malignants from benigns,judging the malignant degree and predicting the prognosis of the patients with GISMT.Key wordsGastrointestinal neoplasmsLeiomyoma Leiomyosarcoma P

7、roliferating cell nuclear antigen我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測胃腸道平滑肌腫瘤(gastrointestinal smooth muscle tumors，GISMT)中增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表達情況，旨在探討其臨床病理及預(yù)后價值。臨床資料1.一般資料：從中國醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院19771996年4月間手術(shù)切除的GISMT臨床病理標本中選擇診斷明確、資料完整的病例86例。 其中男49例、女37例。年齡177歲,平均48.6歲。腫瘤位于食管11例、胃30例、小腸27例、結(jié)直腸18例。

8、2.診斷標準：以核分裂數(shù)1個/10個高倍視野為惡性標準，區(qū)分平滑肌瘤 (LM)、平滑肌肉瘤 (LS)。LS組織學(xué)分級參考Patrick等1的標準。其中LM25例;LS級(LS-)26例、級(LS-)20例、級(LS-)15例。按蔡建輝等2的方法進行大體病理分組，其中惡性生長方式組40例、良性生長方式組46例。按腫瘤直徑大小分組，其中0.35.9 cm 組38例、610 cm組25例、10 cm組23例。腫瘤中心有壞死組41例、無壞死組45例。另取8例正常胃腸道平滑肌組織(NSMT)作為對照。3.免疫組化染色:采用免疫組織化學(xué)S-P法?？筆CNA單克隆抗體PC10,生物素標記二抗(北京中山生物技

9、術(shù)有限公司提供),S-P試劑盒(ZYMED公司生產(chǎn))。所有標本均經(jīng)10福爾馬林溶液固定,石蠟包埋,制成4 m厚切片。以PBS置換第一抗體作陰性對照，用已知陽性切片作陽性對照。4.結(jié)果判斷：以細胞核呈棕紅色或細胞核、細胞漿同時呈棕紅色為陽性，單純細胞漿著色而細胞核無著色、或細胞核、細胞漿均無著色為陰性。 選擇PCNA標記良好的區(qū)域在400倍顯微鏡下任選5個高倍視野，計數(shù)1 000個細胞。PCNA標記值(PCNA-LI)陽性細胞數(shù)/1 000×100。5.統(tǒng)計學(xué)處理：采用t或t'、2檢驗。患者生存率分析采用Kaplan-Meire壽命表法及Long-rank檢驗。結(jié)果一、PCNA

10、表達與GISMT臨床病理特征的關(guān)系PCNA-LI小于均數(shù)14.98為低表達，PCNA-LI大于等于均數(shù)14.98為高表達。本組8例NSMT及25例LM，均為PCNA低表達；LS-與LS-46例,21例(46)為高表達；LS-15例(100）均為高表達。各組資料間差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。從NSMT、LM到LS-、級,其PCNA-LI依次明顯遞增，各組間比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。此外，良惡性腫瘤的不同生長方式、腫瘤中心有無壞死,其PCNA-LI差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。見附表。二、PCNA表達與GISMT病人預(yù)后的關(guān)系本組86例GISMT中，除3例因其它原因

11、死亡外，其余83例，隨訪時間12個月20年,平均58個月。PCNA低表達組5年累積生存率為89.85，而PCNA高表達組5年累積生存率為41.44，兩組生存率差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。討論PCNA是36 KD的核蛋白,是DNA多聚酶的一種輔助蛋白。PCNA在G0期細胞中含量很附表臨床病理特征例數(shù)PCNA-LIP值分類分級NSMT8LM25LS-26LS-20LS-15生長方式良性469.2±4.6 惡性40直徑(cm) 38610251023壞死無45有41     少，G1晚期開始增加，S期達到高峰，G2期和M期開始下降,是評價細胞

12、增殖狀態(tài)的重要指標。在多種腫瘤的研究中，人們發(fā)現(xiàn)PCNA表達與腫瘤的生物學(xué)特性、預(yù)后有良好的相關(guān)性。PCNA在GISMT中的研究較少。本研究結(jié)果表明：在NSMT及LM中無1例為PCNA高表達,低度惡性LS(LS-與LS-)46例中21例為高表達，高度惡性LS(LS-)15例均為高表達,反之GISMT一旦出現(xiàn)PCNA高表達說明腫瘤惡性度高，而且PCNA表達可能和LM向LS的轉(zhuǎn)化密切相關(guān)。在NSMT、LM和LS之間,PCNA-LI存在顯著性差異,與文獻報道一致3，說明PCNA能區(qū)分GISMT的良惡性。LS-、之間,PCNA-LI同樣存在顯著差異,與國外研究結(jié)果相似3，4,說明PCNA可用來反映LS

13、的惡性程度，在LS的分級上有一定參考價值。我們研究發(fā)現(xiàn)，當腫瘤浸潤周圍臟器或有腹腔種植及遠處轉(zhuǎn)移、腫瘤體積較大、或腫瘤中心有壞死時，PCNA-LI均有明顯增高，進一步說明PCNA對于判斷 GISMT的性質(zhì)、惡性程度、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有重要意義。本組隨訪資料表明,GISMT病人術(shù)后長期生存率與原發(fā)灶中PCNA的表達水平呈負相關(guān)，PCNA低表達組的5年生存率較高，與Yu等5的研究結(jié)果一致。Sbaschnig等6則發(fā)現(xiàn):PCNA表達在單因素分析中與預(yù)后有關(guān)，在多因素分析中與預(yù)后無關(guān)。說明PCNA表達尚不能作為判斷GISMT預(yù)后的獨立指標，可結(jié)合其它臨床資料作為估計預(yù)后的參考。因其技術(shù)要求不高、成本較低

14、，且結(jié)果客觀、準確、重復(fù)性好,在判斷GISMT的性質(zhì)、惡性程度缺乏形態(tài)學(xué)指標的情況下，值得推薦。 參考文獻1Patrick CM, James PN, Walter L, et al.Gastrointestinal sarcomas: analysis of prognostic factors.Ann Surg,1987，206:706.2蔡建輝,蔣貽康,張玉印,等. 胃腸道平滑肌腫瘤DNA含量與臨床病理的關(guān)系.中華病理學(xué)雜志,1995,24:378.3Oyama T,Watanabe H,Iwafuchi M, et al. Diagnostic value of proliferati

15、ng cell nuclear antigen for myogenic tumors of the stomach. Gastroenterol Jpn,1993,28:193.4Vrettou E,Karkavelas G,Christoforidou B, et al.Immunohistochemical phenotyping and PCNA detection in gastrointestinal stromal tumors. Anticancer Research, 1995, 15:943.5Yu CCW, Fletcher CD, Newman PL, et al. A comparison of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunostaining,nucleolar organizer region (AgNOR) staining, and histological grading in gastrointestinal stromal tumours.J Pathol,1992,166:147.6Sbaschnig RJ,Cunningham RE,Sobin LH,