實(shí)驗(yàn)二十、植株生長(zhǎng)量的測(cè)定

1、實(shí)驗(yàn)二十、植株生長(zhǎng)量的測(cè)定 指示植物在藥劑處理過(guò)的土壤中或混藥的水溶液中培養(yǎng)一定時(shí)間后，測(cè)定植株的生長(zhǎng)量，如禾本科植物可測(cè)量葉子長(zhǎng)度，闊葉植物可測(cè)量葉面積；或?qū)⒌厣喜糠智邢路Q其鮮重。抑制光合作用的除草劑常用這類方法。1、去胚乳小麥幼苗法去胚乳小麥幼苗法也是上海植物生理研究所1964年建立的生測(cè)方法。這是一個(gè)測(cè)定抑制光合作用除草劑的專一方法，與測(cè)定這類除草劑的其它生測(cè)方法（如番茄法、燕麥法）相比，它具有操作簡(jiǎn)便、測(cè)定周期短等優(yōu)點(diǎn)。 選擇飽滿度一致的小麥，浸種2h后，排列在鋪有濕濾紙或紗布的搪瓷盤內(nèi)，在20左右進(jìn)行發(fā)芽。培養(yǎng)3-4天后苗高2-3cm，精選高度一致的幼苗，輕輕取出以免損傷根部，然后摘

2、除胚乳，在水中漂洗后作為指示生物。 以直徑，高的小玻璃杯作為測(cè)定容器，每杯放入不同濃度的藥液3ml和稀釋10倍的培養(yǎng)液6ml，每杯插入上述去胚乳小麥幼苗10株。在溫度2126左右，光照下培養(yǎng)67天，測(cè)定小麥苗的株高，以株高抑制率來(lái)表示除草劑活性。培養(yǎng)液配方如下： 硫酸銨 磷酸二氫銨 硫酸鈣 氯化鉀 硫酸鎂 微量元素 其中微量元素組成為： 硫酸亞鐵 10g、 硫酸銅3g、 硫酸錳9g、 硼酸7g 硫酸鋅3g 將上述配方加入 1L水中，使用時(shí)再稀釋10倍。2、番茄法取20×120mm的試管，編號(hào)。將供試藥劑用培養(yǎng)液稀釋成一系列梯度濃度溶液，每只試管加入10mm。嚴(yán)格挑選生長(zhǎng)健壯，大小高度

3、一致的具 2片真葉的番茄幼苗，將主根及子葉剪掉，稱鮮重后插入試管，每管24株，在漫射光照射下，25左右培養(yǎng)2周，然后再取出稱重。培養(yǎng)期間應(yīng)每天補(bǔ)加蒸發(fā)的水分。以生長(zhǎng)抑制率來(lái)評(píng)價(jià)活性，求出EC50，比較活性。 生長(zhǎng)抑制率（）=番茄法適合于脲類及均三氮苯類光合作用抑制劑的生物測(cè)定，方法靈敏，但培養(yǎng)周期較長(zhǎng)，其間要每天補(bǔ)足水分，比較麻煩。3、燕麥法 將土樣烘干。過(guò)lmm篩后。加入除草劑，使土壤水分達(dá)到最大田間持水量的60。取200g土裝人底部帶孔的玻璃皿中，播種已催芽露白的燕麥種子1012粒，出苗后，定8株苗，每天從底部灌水，保持原來(lái)的重量，于光照下培育14d后，測(cè)定植株地上部鮮重與干重，或幼齡葉片

4、數(shù)及第2、3葉片的重量，計(jì)算IC50。 本法適于測(cè)定均三氮苯類除草劑如阿特拉津、西瑪津以及取代脲類除草劑的活性，淋溶及持效期等。前者靈敏度，后者為。 此外，也可測(cè)定幼苗的含水量、水提取物的導(dǎo)電性及中性水溶性物質(zhì)重量及其占干重的百分?jǐn)?shù)。 由于抑制光合作用除草劑引起植物蒸騰作用下降（氣孔關(guān)閉引起的），而根系吸水不受影響，因此，在鮮重與干重明顯下降之前，植物體內(nèi)含水量反倒明顯增加。因此，可用幼苗含水量作為生測(cè)指標(biāo)一 此類除草劑也使植株體內(nèi)中性水溶性物質(zhì)（碳水化合物）的含量在干鮮重下降前明顯下降，因而可以測(cè)定中性水溶性物質(zhì)（糖）的含量為生測(cè)指標(biāo)，比測(cè)定干鮮重更為靈敏。 4、葉鞘滴注法Tarlor和Lo

5、ader（1984）為了篩選有效的防治野燕麥的除草劑混劑，設(shè)計(jì)了一種快速，簡(jiǎn)便的除草劑生測(cè)方法葉鞘滴注法。當(dāng)正常生長(zhǎng)的燕麥長(zhǎng)至1葉1心時(shí)，在第一葉張開(kāi)的葉鞘里滴加10ul供試的一定濃度的除草劑。24-48h后，切下2長(zhǎng)的一段，插入清水洋菜培養(yǎng)基。再經(jīng)24h（此時(shí)對(duì)照葉片伸長(zhǎng)約1113）取出測(cè)量每一劑量處理的葉片延伸長(zhǎng)度，并評(píng)判除草劑活性。5、 蘿卜子葉法 將蘿卜籽插入整濾紙的培養(yǎng)血中，加適量水，加蓋后在27培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)30h，從幼苗上切下子葉備用。在盛有用磷酸鹽緩沖液配制的不同濃度的除草劑（510 ml）溶液中放入10片大小均勻的子葉，加蓋后在2527溫室或生長(zhǎng)箱中。光照強(qiáng)度為2 0003

6、000LX的光照下連續(xù)培養(yǎng) 3d后。稱鮮重并測(cè)定葉綠素含量，計(jì)算IC50。 本法適于測(cè)定觸殺性及影響氮代謝的除草劑。6、再生苗側(cè)重法。 將生長(zhǎng)均勻一致的10株香附子塊莖移植到盆缽中。二周后生長(zhǎng)正常時(shí)，分別用不同濃度的草甘磷處理香附子葉，一周后剪除香附子莖葉（距上表1cm），再過(guò)一個(gè)月左右測(cè)定再生苗的鮮重，這樣可反映傳導(dǎo)性除草劑對(duì)地下部分再生能力的抑制程度。也可用玉米做試材，將玉米將播種在統(tǒng)一型號(hào)盆缽中，當(dāng)幼苗3葉期時(shí)噴施草甘磷，24小時(shí)后剪去葉片，一周后測(cè)定再生苗的鮮重，比較不同處理間的再生力。7、莖葉浸漬法： 該法適用于莖葉處理劑的篩選和測(cè)定。 方法是取一個(gè)底部帶孔的啤酒杯，裝滿潮濕細(xì)土（肥

7、沃土壤較好）后壓實(shí)，再用塑料薄膜包住整個(gè)杯上并用橡皮筋扎緊，以防止倒置浸藥時(shí)杯中土壤散落。其后在薄膜上沿杯邊緣戳若干孔穴。每穴播入2-3粒供試植物種子并用土覆蓋好，然后從底部滲入水保持土壤濕潤(rùn)。供試植物長(zhǎng)至2-3葉期時(shí)進(jìn)行間苗，每穴保苗1株苗。待植物長(zhǎng)至需要大小時(shí)，進(jìn)行浸藥處理。浸藥時(shí)間各處理之間力求一致。藥劑處理數(shù)天后可揭去薄膜。實(shí)驗(yàn)二十二 殺菌劑保護(hù)作用和治療作用的測(cè)定本試驗(yàn)法是屬于第二大類的試驗(yàn)方法，是用病菌寄主植物的葉片或果實(shí)來(lái)測(cè)定，比孢子萌發(fā)試驗(yàn)法、抑制菌圈法、生長(zhǎng)速率法等更接近田間實(shí)際情況。保護(hù)作用的測(cè)定原理是先在供試葉片或果實(shí)上噴供試藥液，自然干燥后，在葉片或果實(shí)上接供試菌保濕培

8、養(yǎng)一定時(shí)間檢查結(jié)果。治療作用的測(cè)定原理是先在供試葉片或果實(shí)上接供試菌保濕培養(yǎng)24小時(shí)讓病菌侵入進(jìn)去但還沒(méi)有表現(xiàn)出癥狀。然后噴灑供試藥液，藥液干燥后保濕培養(yǎng)一定時(shí)間檢查結(jié)果。供試菌種：香蕉炭疽病菌（純培養(yǎng)7天）供試藥劑：75%百菌清WP：1000；100ppm 50%多菌靈WP：1000；100ppm實(shí)驗(yàn)材料：束針 鑷子 三角板 燒懷 量筒 移液管 蠟筆 棉花 保濕箱 吸耳球 小玻管5mm。供試作物：香蕉果實(shí)（成熟度適中）操作方法： l、香蕉的準(zhǔn)備：從田間采摘大小老嫩一致的香蕉果實(shí)，用清水洗凈涼干備用，可以使用乙烯利催熟。 2、供試菌餅的制備：用5mm的滅菌小玻管打菌餅，菌餅要完整無(wú)缺且不拖尾巴

9、。 3、藥液的配制： 4、保護(hù)作用的測(cè)定：每支香蕉刺分上中下3個(gè)點(diǎn)（深淺一致，等距離），用束針刺傷香蕉的表皮，然后用鑷子夾棉花球沾取不同濃度藥液均勻涂抹在香蕉上，對(duì)照涂清水，自然涼干后，在刺傷部位接菌餅，（菌絲一面朝下，棉花保濕），每處理接種3條香蕉，處理好后的香蕉四周放濕棉花條，再放入保濕箱中保濕培養(yǎng)3-7天檢查結(jié)果。 5、治療作用的測(cè)定：每支香蕉分上中下3個(gè)點(diǎn)（深淺一致，等距離），用束針刺傷香蕉的表皮，然后在刺傷部位接供試菌餅（菌絲一面朝下），四周放濕棉花條并放入保濕箱中保濕培養(yǎng)24小時(shí)后，取出涼干，用鑷子夾棉花球沾取不同濃度藥液均勻地涂在香蕉上，對(duì)照涂清水，待藥液干后，再放在保濕箱中保濕培養(yǎng)3-7天，待對(duì)照全部發(fā)病即可檢查結(jié)果。結(jié)果檢查： l、視察各種點(diǎn)發(fā)病情況，求發(fā)病率或量病斑直徑大?。ㄊ纸徊媪?jī)H平均值）再按分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算發(fā)病嚴(yán)重度，根據(jù)發(fā)病率或病情指數(shù)求防治效果。 發(fā)病率（%）= 病情指數(shù)= 防治效果（%）= 病斑分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)：病斑直徑為01級(jí)：病斑直徑在