[工作總結(jié)]2005年北京地區(qū)神經(jīng)內(nèi)科學(xué)術(shù)年會論文匯編

1、.2005年北京地區(qū)神經(jīng)內(nèi)科學(xué)術(shù)年會論文匯編、72小時睡眠剝奪小鼠海馬組織的氛化應(yīng)激反應(yīng)北京 友 誼 醫(yī) 院 神 經(jīng) 內(nèi)科瞿蕾王得新背景 和 目的研究 表 明 睡眠剝奪是疾病發(fā)生的危險(xiǎn)因素之一，但其致病的生理生化機(jī)制目前仍不清楚。有一種理論說在正常的睡眠過程中可以清除清醒時產(chǎn)生的氧自由基，也就是說睡眠剝奪可以祠腸弓腦的抗氧化能力。大量文獻(xiàn)已經(jīng)證實(shí)了睡眠剝奪導(dǎo)致氧化應(yīng)激的觀點(diǎn)，而且發(fā)現(xiàn)睡眠剝奪對腦組織不同部位的影響并4陶一的，其中海馬、下丘腦、腦干等部位是比較容易招受氧化應(yīng)激影響的部位。另外，很多研究均表明多種能引起氧化應(yīng)激的因素如缺氧、氧自由基、血紅素、重金屬離子、內(nèi)毒素和炎癥因子均可使血紅素

2、氧合酶HO-1表達(dá)卜調(diào)，其廣泛存在于各種細(xì)胞的微粒體內(nèi)，具有細(xì)胞保護(hù)作用，在機(jī)體抗氧化過程中發(fā)揮著重要的作用，故HO-1又稱為應(yīng)激蛋白。HO-1分子量32KD,熱休克可使其表達(dá)增加，屬熱休克蛋白家族，又稱HS?-32。有研究表明睡眠剝奪可以使同屬于熱休克蛋白家族的HSP60表達(dá)水平上調(diào)，但有關(guān)睡眠剝奪與HO-1之間的相關(guān)性未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研 究 的 目的是:(1)通過檢測海馬部位丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)兩個指標(biāo)，證實(shí)氧化應(yīng)激的存在: (2)通過半定量PCR的方法了解睡眠剝奪72小時后血紅素氧合酶HO-1的表達(dá)。材 料 和 方 法選用 雄 性 ICR小鼠，體重35g士，隨機(jī)分為

3、3組，:小平臺睡眠剝奪組;大平臺對照組;籠養(yǎng)對照組。采用多平臺水環(huán)境法(flower pot)制作小鼠的睡眠剝奪動物模型，大平臺組作為應(yīng)激對照組，經(jīng)過72小時睡眠剝奪后快速斷頭取腦，分離出海馬，其中每組8只制成10%的海馬組織勻漿，-30保存待測。然后按丙二醛、超氧化物歧化酶、組織蛋白定量試劑盒的說明書進(jìn)行檢鍘，檢測結(jié)果經(jīng)計(jì)算得出SOD的活性值以及MDA的含量。另外取睡眠剝奪組與籠養(yǎng)組各5只小鼠采用TR工zol試劑盒提取海馬組織中的總RNA,選用p-action作為內(nèi)參照，采用一步法RT-PCR試劑盒進(jìn)行HO-1mRNA的半定量PCR檢測，HO-1mRNA表達(dá)以HO-1的相對表達(dá)量即HO-1/

4、 D - action計(jì)算。實(shí)驗(yàn) 結(jié) 果單純 睡 眠 剝奪組與籠養(yǎng)對照組及大平臺應(yīng)激對照組相比SOD的活性均顯著下降，單純剝奪組與其它兩組相比MDA含量均無顯著性差異。HO-IudNA在籠養(yǎng)組低水平表達(dá)，72小時睡眠剝奪后表達(dá)量顯著增高。討 論本研 究 發(fā) 現(xiàn)72小時睡眠剝奪后小鼠海馬部位SOD的活性降低，HO-1表達(dá)水平顯著增高。SOD活性的降低與Ramanathan-I報(bào)道大鼠睡眠剝奪后在海馬和腦干內(nèi)Cu/Zn-SOD的活性顯著下降結(jié)果一致，其原因可能是睡眠剝奪后活性氧簇水平的增高所致。MDA含量在睡眠剝奪前后無顯著性改變可能與睡眠剝奪的時間短有關(guān)。本研究結(jié)果證實(shí)了72小時睡眠剝奪后海馬部位氧化應(yīng)激的存在。據(jù)筆 者 所 知，本研究是第一次討論研究睡眠剝奪后HO-1的表達(dá)。HO-1是機(jī)體降解血紅素產(chǎn)生內(nèi)源性一氧化碳(CO)及膽色素的一種限速酶。有研究表明，HO-1/CO在中樞神經(jīng)系統(tǒng)起著重要的生理和病理作用，如:參與突觸可塑性(長時程增強(qiáng)，突觸傳遞)、運(yùn)動通路的調(diào)節(jié)、以及大腦血流的局部調(diào)節(jié)、神經(jīng)內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)、學(xué)習(xí)和記憶等過程的調(diào)節(jié)。另有研究表明，HO-1參與神經(jīng)系統(tǒng)的多種疾病如老年性癡呆、帕金森綜合征以及癲痛的發(fā)生。根據(jù)報(bào)道，無論是失眠還是認(rèn)知損害在老年人中的發(fā)生率均