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文檔簡介
1、生姜提取物的抗氧化作用 生姜(Zingiber officinale Roscoe)是姜科姜屬的多年生草本植物,是世界上重要的調(diào)味品之一,亞洲、非洲、拉丁美洲等地均有種植。1.材料1.1 試驗材料生姜、大豆卵磷脂、組氨酸、硫代巴比妥酸、三氯乙酸.1.2 試驗儀器 JD500-2型電子天平 沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司
2、 202型電熱恒溫干燥箱 天津市泰斯特儀器有限公司 電熱手提式壓力蒸汽滅菌器 &
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7、公司 C-15A微電腦電磁爐 廣州愛世達電子電器有限公司 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀
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9、0冷藏柜 常熟常明電器有限公司 SHB-3循環(huán)水多用真空泵 鄭州杜甫儀器廠
10、160; TU-1800紫外可見光分光光度計 北京普希通用儀器有限公司 高速冷凍離心機 德國Backman公司 2.試驗步驟2.1 生姜提取
11、物的制備鮮姜清洗去皮,用榨汁機打碎,粒度在2mm3以下,分別以2倍的水和60%乙醇作為提取劑進行提取。提取條件按照提取溫度,提取液pH值,提取時間進行優(yōu)化。提取液取出后3500r/min離心30min,取上層清液真空抽濾兩次,收集濾液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將所收集的濾液濃縮制得生姜提取物,備用。2.2 生姜提取物溶液的配制:采用無菌蒸餾水配制成不同濃度的生姜提取液。以上所有操作均在無菌條件下進行,所用設(shè)備、工具經(jīng)75%的酒精棉球擦拭并紫外照射15min。2.3 生姜提取條件的試驗設(shè)計本試驗選取提取時間(A)、浸提液pH值(B)、提取溫度(C)作三因素三水平正交試驗。因素(見表2-1)。 表2-1 因素
12、水平表 因素水平 A 提取時間(min) B 浸提液pH值 C
13、; 提取溫度() 1 30 4.0 30
14、60; 2 50 6.0 40 &
15、#160; 3 70 8.0 50 2.4 生姜提取物的抗氧化試驗取1g大豆卵磷脂溶于氯化鉀-組氨酸緩沖體系(pH6.8)中,均質(zhì),并用超聲波在4下超聲處理45min。取5mL的脂質(zhì)體,加入1mL生姜提取物。向二者的混合物中加入0.1mL 50 mM FeCl
16、3和0.1mL 10mM 抗壞血酸鈉引發(fā)脂質(zhì)氧化,然后把樣品放在37°C 水浴中保溫1h,隨后測TBARS。3.結(jié)果與分析3.1 生姜提取液的比較研究由圖3-1可以看出,水和60%乙醇的生姜提取液均具有較強的抗氧化能力,其中60% 乙醇的生姜提取物抗氧化效果更好,這可能是由于生姜中的抗氧化物質(zhì)在水中的溶解性較差。本實驗選取水和60%乙醇作為生姜的提取液,在同等條件下進行比較研究,得出一種提取效果最好的提取液為60%乙醇。3.2 60%乙醇對生姜浸提條件的優(yōu)化A,B,C 三個因素中R值的大小,可以看出A>C>B,A因素,即提取時間為最重要因素,其次為C因素,即提取溫度,最后
17、為B因素,即提取液pH值。3個因素的主次關(guān)系是:由主到次為ACB。方差分析結(jié)果顯示,F(xiàn)C=46.500>F0.05(2,2)=19.00,F(xiàn)A=23.000>F0.052,2)=19.00說明C因素和A因素差異顯著。對于B因素,F(xiàn)0.05(2,2)=19.00>FB=2.50,說明B因素差異不顯著。60%乙醇提取生姜的最佳工藝條件為A1B3C2,即提取時間為30min、提取液pH為8.0、提取溫度40。以最佳組合參數(shù)為標準,即提取時間為30min、提取液pH為8.0、提取溫度40,進行三次驗證實驗,得到OD值的平均值為0.054。3.3 生姜提取物的抗氧化試驗各處理組在儲存期間TBARS值均有不同幅度的增加,但在第0d各處理組的TBARS值均顯著低于兩個對照組(p<0.05),說明各濃度的生姜提取物具有很好的抗氧化效果。儲存至第7、14、21d時,濃度為24%、32%處理組的TBARS值顯著低于蒸
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