抗生素類藥物的分析

1、.第十一章.第一節(jié)第一節(jié) 概述概述抗生素的定義抗生素的定義 抗生素是細(xì)菌、放線菌和真抗生素是細(xì)菌、放線菌和真菌等微生物的代謝產(chǎn)物，對各種菌等微生物的代謝產(chǎn)物，對各種病原微生物有強大的抑制或殺滅病原微生物有強大的抑制或殺滅作用。作用。.一一 抗生素藥物的特點抗生素藥物的特點生物發(fā)酵，生物發(fā)酵， 化學(xué)純化，精化學(xué)純化，精致，化學(xué)修飾等過程，最致，化學(xué)修飾等過程，最后制成制劑，結(jié)構(gòu)，組成后制成制劑，結(jié)構(gòu)，組成更復(fù)雜。更復(fù)雜。. 化學(xué)純度低，有三多：同化學(xué)純度低，有三多：同系物多，異構(gòu)體多，降解物多。系物多，異構(gòu)體多，降解物多。發(fā)酵過程不易控制。生產(chǎn)工藝發(fā)酵過程不易控制。生產(chǎn)工藝復(fù)雜易受污染。分子結(jié)構(gòu)

2、大多復(fù)雜易受污染。分子結(jié)構(gòu)大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用?；钚援a(chǎn)物效或增加毒副作用?；钚援a(chǎn)物易發(fā)生變異。易發(fā)生變異。. 發(fā)酵液中雜質(zhì)發(fā)酵液中雜質(zhì) 無機鹽、脂無機鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì)物、色素、熱原、毒性物質(zhì) 檢查檢查 增加異常毒性、細(xì)菌內(nèi)增加異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌 .二二 質(zhì)量分析的測定方法質(zhì)量分析的測定方法（一）生物學(xué)方法（一）生物學(xué)方法1 1 測定抗生素抑菌或殺菌的能力測定抗生素抑菌或殺菌的能力優(yōu)點優(yōu)點1 1、與臨床效果一致、與臨床效果一致2

3、2、靈敏度高、靈敏度高3 3、干擾物質(zhì)少、干擾物質(zhì)少缺點缺點1 1、操作繁瑣、操作繁瑣2 2、培養(yǎng)時間長、培養(yǎng)時間長2 2、測定誤差大、測定誤差大.2 2化學(xué)及物理化學(xué)方法化學(xué)及物理化學(xué)方法以理化方法測定主藥含量以理化方法測定主藥含量優(yōu)點優(yōu)點 1. 1. 準(zhǔn)確度高準(zhǔn)確度高2. 2. 簡單、快速簡單、快速1. 1. 不一定代表生物效價不一定代表生物效價缺點缺點2. 2. 易受雜質(zhì)干擾易受雜質(zhì)干擾.三三 分類分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）：（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）： 內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、 四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、 氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類 林可

4、霉素類、其他抗生素類林可霉素類、其他抗生素類.NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）第二節(jié)第二節(jié) 內(nèi)酰胺類抗生素內(nèi)酰胺類抗生素 青霉素類青霉素類.頭孢菌素類頭孢菌素類7654321NONHSCH2R1COOH母核（7-氨基頭孢菌烷酸）RCO.CONSOHNCOOHCH3CH3CH2青霉素（青霉素（青霉素G G、芐青霉素）、芐青霉素）.NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH2氨芐西林氨芐西林（氨芐青霉素）（氨芐青霉素）.阿莫西林阿莫西林（羥氨芐青霉素）（羥氨芐青霉素）NH2CONSOHNCOOHCH3CH3HOCH2.C2H5 2NCH2CH2OOCNS

5、OHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素.頭孢氨芐NONHSCH3COOHOCNH2CH2.頭孢拉定CH2NH2CONONHSCH3COOH.頭孢羥氨芐NONHSCH3COOHOCNH2CH2HO.頭孢噻吩鈉SCH2CONONHSCH2OCOCH3COONa.NSOHNCOOKCH3CH3OCCH2一一 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）羧基（一）羧基 酸性酸性NaNa與堿金屬與堿金屬(Na(Na+ +、K K+ +) )成鹽易溶于水成鹽易溶于水 .與有機堿與有機堿( (普魯卡因普魯卡因) )成鹽難溶于水成鹽難溶于水 普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素C2H52NCH2CH2O

6、OCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2.NSO1234567（二）手性（二）手性C C 旋光性旋光性87654321NOS(5%(5%頭孢唑啉鈉溶液頭孢唑啉鈉溶液 18182424) )20D 青霉素類青霉素類 C C3 3 C C5 5 C C6 6頭孢菌素類頭孢菌素類 C C6 6 C C7 7 . （三）共軛體系（三）共軛體系 UVUV青霉素類母核無明顯青霉素類母核無明顯UVUV，多數(shù)有苯環(huán)，多數(shù)有苯環(huán)取代基取代基頭孢菌素類頭孢菌素類 母核有共軛體系母核有共軛體系 NSONOS .青霉素鈉青霉素鈉UV7-20.（四）（四）內(nèi)酰胺內(nèi)酰胺環(huán)環(huán) 干燥純凈時干燥純凈時 - - 穩(wěn)定穩(wěn)

7、定水溶液：水溶液： 不穩(wěn)定不穩(wěn)定 不穩(wěn)定不穩(wěn)定性因素性因素四元環(huán)張力大四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解酰胺鍵易水解.（某些金屬離子）（某些金屬離子）（溫度）（溫度）失失效效降降解解青青霉霉素素類類酸酸、堿堿、青青霉霉素素酶酶某些氧化劑某些氧化劑.例例青霉素的降解反應(yīng)青霉素的降解反應(yīng)青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻青霉噻唑?；u唑?；u胺酸胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2.失失效效降降解解頭頭孢孢菌菌素素類類酸酸、堿堿、胺胺類類內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺酶酶 .二二 鑒別鑒別.（一）呈色反應(yīng)（一）呈色反應(yīng)1.

8、1. 羥肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng) -內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類NaOHNaOH HClNOHH內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類呈色呈色羥肟酸衍生物羥肟酸衍生物FeFe3+3+/3/3H H+ +.NSONSCOHNHOHH2NOH HClNSCHNHOFe3+3OH+Fe3+/3 （紅、棕、褐）（紅、棕、褐）.NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH22.2.類似肽鍵的反應(yīng)類似肽鍵的反應(yīng) 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng) -氨基氨基藍(lán)藍(lán)紫紫色色氨氨基基茚茚三三酮酮 .-氨基、伯胺氨基、伯胺某些羥基胺類某些羥基胺類酮式酮式烯醇式烯醇式茚三酮茚三酮茚三酮茚三酮縮合縮合藍(lán)紫色藍(lán)紫色+H2OCNCH2RC OH2RCHH2NCOOH2O

9、HCCOCOCOHNH2CCOCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO. CONH紫紫內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類堿堿性性酒酒石石酸酸銅銅 （開環(huán)分解）（開環(huán)分解）雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng) -內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類.2OHCONH2CuCOHNCCH3COONaCH3SNHNCH3CH3COONaCSNOHOHOOCH2NH2CH2HH藍(lán)紫色藍(lán)紫色.3 3其他顯色反應(yīng)其他顯色反應(yīng) 與變色酸與變色酸- -硫酸反應(yīng)硫酸反應(yīng)青霉素青霉素 阿莫西林阿莫西林 氨芐西林氨芐西林活潑活潑“-CH2-”HCHOCHSOH ”羰羰基基側(cè)側(cè)鏈鏈含含“（分解）（分解）變色酸變色酸顯色顯色.NH2CONSOHNCOOH

10、CH3CH3HOCH2 變變色色酸酸阿阿莫莫西西林林HCHOSOH150（縮合）（縮合）色色褐褐.SO3HSO3HHOHOSO3HSO3HHOHOOHOHHO3SHO3SCHHCHO （縮合）（縮合）.與重氮苯磺酸反應(yīng)與重氮苯磺酸反應(yīng) 頭孢哌酮頭孢哌酮橙橙黃黃色色重重氮氮苯苯磺磺酸酸 OHHC（偶合）（偶合）酚羥基酚羥基.SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNNCH3NClNNaO3S OH（偶合）（偶合）.NNNNCH3SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNaO3S.與與H2SO4 - HNO3反應(yīng)反應(yīng)亮亮黃黃紅紅棕棕黃黃色色頭頭孢

11、孢噻噻肟肟鈉鈉頭頭孢孢噻噻吩吩鈉鈉頭頭孢孢氨氨芐芐 HNOSOH頭孢菌素類頭孢菌素類.（二）（二） K+、Na+反應(yīng)反應(yīng) 焰色焰色鮮黃色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅醋酸氧鈾鋅黃黃 Na+ 焰色焰色紫色紫色 + 0.1%四苯硼鈉四苯硼鈉 + Ac白白 K+.與銅鹽反應(yīng)與銅鹽反應(yīng) CuSOHAc頭頭孢孢氨氨芐芐橄欖綠色橄欖綠色NaOH專屬反應(yīng)專屬反應(yīng).沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)1. 1. 遇酸遇酸白白青青霉霉素素青青霉霉素素鈉鈉青青霉霉素素鉀鉀 H.有機胺鹽反應(yīng)有機胺鹽反應(yīng)（1 1）重氮化）重氮化 - - 偶合反應(yīng)偶合反應(yīng) 青青霉霉素素普普魯魯卡卡因因普普魯魯卡卡因因青青霉霉素素 H重氮化重氮化- -偶合反應(yīng)偶合

12、反應(yīng)紅紅 芳伯氨基芳伯氨基.C2H5 2NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCH+C2H52CH2NH2H2NCOOCH2CH2N普魯卡因普魯卡因普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素.NCH2CH2OOC2C2H5N+Cl-N2C2H5COOCH2CH2NNH2HClNaNO2 .（2 2）與三硝基苯酚反應(yīng)）與三硝基苯酚反應(yīng) 三三硝硝基基苯苯酚酚二二芐芐基基乙乙二二胺胺芐芐星星青青霉霉素素NaOH二芐基乙二胺二芐基乙二胺.三硝基苯酚三硝基苯酚H2OHOH-HCONSOHNCOOHCH3CH3CH2CH2NCH2CH2NHCH2OHNO2O2NNO2CH2NCH2CH2NHCH2.光譜法

13、光譜法（三）（三）1、 IR法法.阿莫西林的紅外光譜圖阿莫西林的紅外光譜圖.117401815 cmVOC116901710 cmVOC- -內(nèi)酰胺環(huán)內(nèi)酰胺環(huán)酰胺酰胺青霉素青霉素.2、 UV法法 樣品、分解產(chǎn)物樣品、分解產(chǎn)物A,Emin,max,%1cm1 光譜圖光譜圖nm339HA 苯苯唑唑青青霉霉烯烯酸酸苯苯唑唑青青霉霉素素Cu2+頭孢氨芐頭孢氨芐 max = 262nmmax = 262nm青霉素青霉素V鈉鈉 A280nm/A264nm . 取本品，加醋酸取本品，加醋酸- -醋酸鈉緩沖醋酸鈉緩沖溶液溶液pH3.8pH3.8，制成，制成50ug/ml50ug/ml的溶液，的溶液，取取10m

14、l10ml，水浴加熱，以未加熱的共，水浴加熱，以未加熱的共試品為空白。測定，吸收度試品為空白。測定，吸收度0.60.6。.NOCONHCH3NOSCH3CH3COONaNOCHCH3OCOCNHNCHHCCH3CH3SHCHCOOHCu2+pH3.8.氯唑青霉素氯唑青霉素 341 0.682雙氯青霉素雙氯青霉素 342 0.653苯唑青霉素苯唑青霉素 339 1.328max %1cm1E(nm) ml/g50 .（四）色譜法（四）色譜法 對照品對照法對照品對照法1、 TLC法法和和斑斑點點顏顏色色比比較較供供試試品品對對照照品品相相同同條條件件fR2、 HPLC法法Rt比比較較供供試試品品對

15、對照照品品相相同同條條件件.特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)的檢查（一）（一） 聚合物聚合物 中國藥典規(guī)定，頭包曲松，中國藥典規(guī)定，頭包曲松，哌酮，噻肟需檢查聚合物。用哌酮，噻肟需檢查聚合物。用HPLCHPLC，以他啶為例。，以他啶為例。. 對照溶液的制備對照溶液的制備 取對照取對照品適量，精密稱定，加水制成品適量，精密稱定，加水制成100ug/ml100ug/ml溶液，搖勻。溶液，搖勻。. 測定法測定法 取對照品適量，取對照品適量，精密稱定，加水制成，精密稱定，加水制成，20ug/ml20ug/ml進(jìn)樣。含聚合物不得超過頭孢進(jìn)樣。含聚合物不得超過頭孢他定的他定的0.3%0.3%。. （二）有關(guān)物質(zhì)和異

16、構(gòu)體（二）有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體（P273P273） 頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查（反相頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查（反相TLCTLC法）頭孢氨芐以青霉素鉀為原料，法）頭孢氨芐以青霉素鉀為原料，經(jīng)氧化、擴環(huán)、裂解得經(jīng)氧化、擴環(huán)、裂解得7-7-氨基去乙酰氧氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（基頭孢烷酸（7-ADCA7-ADCA），再與側(cè)鏈），再與側(cè)鏈a-a-苯苯甘氨酸縮合而成。這兩種原料有可能成甘氨酸縮合而成。這兩種原料有可能成為主要雜質(zhì)。用茚三酮顯色，為主要雜質(zhì)。用茚三酮顯色， a-a-苯甘苯甘氨酸和氨酸和7-ADCA7-ADCA斑點顯橙黃色。斑點顯橙黃色。. （三）雜質(zhì)吸收度的檢查（三）雜質(zhì)吸收度的檢查 青霉素鈉（鉀

17、）：青霉素鈉（鉀）：取本品，加水，取本品，加水，1.80mg/ml1.80mg/ml。280nm280nm不得大于不得大于0.100.10，264nm264nm應(yīng)為應(yīng)為0.80-0.80-0.880.88。264nm264nm的吸收值用來控制青的吸收值用來控制青霉素鈉（鉀）的含量。霉素鈉（鉀）的含量。280nm280nm的吸的吸收用來控制雜質(zhì)。收用來控制雜質(zhì)。.四、 含量測定含量測定碘量法碘量法（一）（一）-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類ChPChP利用其分子本身不消耗碘，而降利用其分子本身不消耗碘，而降解產(chǎn)物消耗碘，用剩余碘量法測解產(chǎn)物消耗碘，用剩余碘量法測定，以標(biāo)準(zhǔn)對比法計算。定，以標(biāo)準(zhǔn)對比法計算。.

18、IINaOH頭頭孢孢菌菌素素族族青青霉霉素素族族（水解）（水解） H水解產(chǎn)物水解產(chǎn)物 OSNaNaIOSNaI定量過量定量過量剩余剩余.反應(yīng)分兩步進(jìn)行：反應(yīng)分兩步進(jìn)行：1. 1. 水解反應(yīng)水解反應(yīng) ( (按化學(xué)計算量進(jìn)行按化學(xué)計算量進(jìn)行) )2. 2. 氧化氧化- -還原反應(yīng)還原反應(yīng) ( (無固定的量關(guān)無固定的量關(guān)系，受溫度、系，受溫度、PHPH值和時間等因素影值和時間等因素影響，應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)條件并采用標(biāo)響，應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)條件并采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定準(zhǔn)品平行對照測定) ).NSCH3CH3COOHOHNRCORCOHHNCOONaCH3CH3SNCOONaI24+ 5H2O+ 2HClNaO

19、HCCH3CH3SO3HCHNH2COOHCHNHCORCOOH2+2NaCl+8HI第一步第一步第二步第二步.例例注射用普魯卡因青霉素注射用普魯卡因青霉素 含量測定含量測定 取裝量差異項（藥典附錄取裝量差異項（藥典附錄P7P7）下的內(nèi)容物，精密稱取約下的內(nèi)容物，精密稱取約0.12g0.12g，置置100ml100ml量瓶中，加水使溶解并稀量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取釋至刻度，搖勻，精密量取5ml5ml，置碘瓶中，加置碘瓶中，加1mol/L1mol/L氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液1ml1ml放置放置2020分鐘，分鐘，. 再加再加1mol/L1mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液1ml1m

20、l與醋與醋酸酸- -醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml(pH4.5)5ml，精密，精密加入碘滴定液加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml(0.01mol/L)15ml，密，密塞，搖勻，在塞，搖勻，在20202525暗處放置暗處放置2020分分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L0.01mol/L）滴定，）滴定，.至近終點時加淀粉指示液，繼續(xù)滴至近終點時加淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強力振搖，至藍(lán)色消失；另精定并強力振搖，至藍(lán)色消失；另精密量取供試品溶液密量取供試品溶液5ml5ml，置碘瓶中，置碘瓶中，加醋酸，加醋酸- -醋酸鈉緩沖液（醋酸鈉緩沖液（pH4.

21、5pH4.5）5ml5ml，精密加入碘滴定液（，精密加入碘滴定液（0.01mol/L0.01mol/L）15ml15ml，密塞，搖勻，密塞，搖勻，.在暗處放置在暗處放置2020分鐘，用硫代硫酸分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（鈉滴定液（0.01mol/L0.01mol/L）滴定，）滴定，作為空白。同時用青霉素鈉對照作為空白。同時用青霉素鈉對照品同法測定作對照，算出供試品品同法測定作對照，算出供試品的含量。的含量。.V V樣空樣空V V樣樣對照液對照液+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴+ +堿堿+ +酸酸+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴 V V對空對空V V對對供試液供試液+

22、+緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴+ +堿堿+ +酸酸+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴. 空白試驗空白試驗A A、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾B B、消除樣品中其他消耗碘的雜、消除樣品中其他消耗碘的雜 質(zhì)的干擾質(zhì)的干擾C C、消除碘揮發(fā)造成的誤差、消除碘揮發(fā)造成的誤差 以未經(jīng)水解的樣品作空白測定以未經(jīng)水解的樣品作空白測定.空白空白樣品樣品I2Na2S2O3I-I2. 采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定A A、可消除溫度、可消除溫度、pHpH、操作、環(huán)、操作、環(huán) 境等條件的影響境等條件的影響B(tài) B、使本法測定結(jié)果與微生物檢定、使本法測定結(jié)果與

23、微生物檢定 法一致法一致.堿堿 I I2 2 IO IO3 3- - + I + I- -酸酸普魯卡因與碘在酸性條件普魯卡因與碘在酸性條件下會產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀下會產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀（2 2）溫度）溫度 24242626溫度溫度38 38 未水解的供試品亦消耗碘未水解的供試品亦消耗碘.（3 3）水解時間）水解時間以水解以水解2020分鐘后的耗碘量最大分鐘后的耗碘量最大（4 4）反應(yīng)時間）反應(yīng)時間反應(yīng)反應(yīng)2020分鐘后，耗碘量隨時間分鐘后，耗碘量隨時間的的變化較小，可減小含量測定的變化較小，可減小含量測定的誤誤差。差。.（1 1）靈敏度高）靈敏度高樣品樣品 : : 碘碘 = 1 : 8= 1 : 8（2 2

24、）反應(yīng)條件、實驗操作要求高）反應(yīng)條件、實驗操作要求高V V對對、V V對空對空V V樣樣、V V樣空樣空1 1份含量份含量4I4I2 28I8I- -加試劑次序、反應(yīng)時間、滴定速度相同加試劑次序、反應(yīng)時間、滴定速度相同.%WWVVVV對對照照品品）（）（含含量量樣樣對對對對對對空空樣樣樣樣空空 5.5.計算計算 原料原料.降解產(chǎn)物或雜質(zhì)可消耗碘而影響降解產(chǎn)物或雜質(zhì)可消耗碘而影響測定，因此用未經(jīng)水解的樣品做測定，因此用未經(jīng)水解的樣品做空白。碘量法是青霉素族的經(jīng)典空白。碘量法是青霉素族的經(jīng)典的測定方法。的測定方法。. 1.1. 原理原理SHROH 青青霉霉素素族族（水解）（水解）HgRS ）（Ch

25、P ChP 青霉素族青霉素族 Hg .pH（二）電位配位滴定法（汞量法）（二）電位配位滴定法（汞量法）.2.2.方法方法 總總樣樣VNOHgHNONaOH 醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液pH4.6滴定滴定水解水解 降降空空醋醋酸酸鹽鹽緩緩沖沖液液VNOHg pH4.6滴定滴定樣樣品品 以未經(jīng)水解的樣品作空白測定以未經(jīng)水解的樣品作空白測定.例例 苯唑西林鈉苯唑西林鈉 含量測定含量測定 取本品約取本品約50mg50mg，精密，精密稱定，加水稱定，加水5ml5ml溶解后，加溶解后，加1mol/L1mol/L氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液5ml5ml，搖勻，放置，搖勻，放置1515分鐘，加分鐘，加1mol/L1m

26、ol/L硝酸溶液硝酸溶液5ml5ml，醋，醋酸鹽緩沖液酸鹽緩沖液(pH4.6)20ml(pH4.6)20ml及水及水20ml20ml，搖勻，搖勻，.照電位滴定法照電位滴定法( (附錄附錄 A), A),用鉑電極為指示電極，汞用鉑電極為指示電極，汞- -硫酸亞硫酸亞汞電極為參比電極，在汞電極為參比電極，在35354040，用硝酸汞滴定液，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)(0.02mol/L)緩緩慢滴定，慢滴定，.（控制滴定過程約為（控制滴定過程約為1515分鐘），分鐘），不計第一個等當(dāng)點，計算第二個不計第一個等當(dāng)點，計算第二個等當(dāng)點時消耗滴定液的量。每等當(dāng)點時消耗滴定液的量。每1ml1ml硝

27、酸汞滴定液硝酸汞滴定液(0.02mol/L)(0.02mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于8.029mg8.029mg的總苯唑西林的總苯唑西林( (按按C C1919H H1919N N3 3O O5 5S S計算計算) )。.另取本品約另取本品約0.5g0.5g，精密稱定，加，精密稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，立振搖使完全溶解，在室溫下，立即用硝酸汞滴定液即用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)(0.02mol/L)滴定，終點判斷方法同上。滴定，終點判斷方法同上。.每每1ml1ml硝酸汞滴定液（硝酸汞滴定液（0.02mol/L0.02mol

28、/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于8.029mg8.029mg的的降解物（按降解物（按C C1919H H1919N N3 3O O5 5S S計算）。計算）?？偙竭蛭髁值陌俜趾颗c降解總苯唑西林的百分含量與降解物的百分含量之差值即為苯唑物的百分含量之差值即為苯唑西林的含量。西林的含量。.3 3、討論、討論（1 1）水解必須完全）水解必須完全（2 2）空白試驗）空白試驗 消除已降解產(chǎn)消除已降解產(chǎn)物干擾物干擾（4 4）優(yōu)點）優(yōu)點 不需標(biāo)準(zhǔn)品不需標(biāo)準(zhǔn)品（2 2）反應(yīng)摩爾比）反應(yīng)摩爾比 1 : 11 : 1.%WFTV%WFTV% 空空空空樣樣樣樣含含量量%FTWVWV% ）（含含量量空空空空樣樣樣樣4 4、計算

29、、計算.（1 1）原理）原理青青霉霉烯烯酸酸硫硫醇醇汞汞鹽鹽青青霉霉素素族族 HgCl（咪唑）（咪唑）nmmax ChP ChP 青霉素族青霉素族（三）（三）可見可見- -紫外分光光度法紫外分光光度法1 1、硫醇汞鹽法、硫醇汞鹽法.HgClCH3CH3COONaSNHCONCH2NHCOCH3NSOHNCOONaCH3CH3OCCH2NHCOCH3 HgCl咪唑咪唑nmmax .（2 2）方法）方法對照品法對照品法%WWAA%對對照照品品樣樣標(biāo)標(biāo)標(biāo)標(biāo)樣樣 計算計算標(biāo)標(biāo)樣樣咪咪唑唑硼硼酸酸緩緩沖沖液液標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液供供試試液液AAHgCl 2pH 9pH 9.例例 氨芐西林鈉氨芐西林鈉 含量測定含

30、量測定( (參考教材參考教材277)277) 取本品約取本品約60mg 60mg 置置100ml100ml量瓶中，量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取量取5ml5ml，置另一，置另一100ml100ml量瓶中，加水量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，再精密量取稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5ml5ml，置置25ml25ml量瓶中，加硼酸緩沖液量瓶中，加硼酸緩沖液2.5ml2.5ml與與醋酐的乙腈溶液（醋酐的乙腈溶液（150150）0.25ml0.25ml，放，放置置5min5min后，加咪唑溶液至刻度，搖勻，后，加咪唑溶液至刻度，搖勻，置置6060水浴水浴.中，

31、加熱中，加熱30min30min，取出冷卻，照分，取出冷卻，照分光光度法（附錄光光度法（附錄 A A ），在），在325nm325nm的波長處測定吸收度；另取的波長處測定吸收度；另取氨芐西林三水合物標(biāo)準(zhǔn)品，按同氨芐西林三水合物標(biāo)準(zhǔn)品，按同法測定，計算，即得。法測定，計算，即得。 .（3 3）討論）討論 咪唑催化的水解產(chǎn)率高，咪唑催化的水解產(chǎn)率高， 硫醇汞鹽穩(wěn)定（硫醇汞鹽穩(wěn)定（3h3h）b. b. 側(cè)鏈有側(cè)鏈有-NH-NH2 2時，需加醋酐先時，需加醋酐先 將其乙?；蟛拍馨l(fā)生上述反應(yīng)將其乙酰化后才能發(fā)生上述反應(yīng).NSOHNCOOCH3CH3OCCH2NH2NaNSOHNCOONaCH3CH3O

32、CCH2NHCOCH3 OCHCH pH9.（4 4）特點）特點A A、簡便快速、簡便快速B B、用標(biāo)準(zhǔn)品對照，重現(xiàn)性良、用標(biāo)準(zhǔn)品對照，重現(xiàn)性良 好，好，RSD1%RSD1%.nmCupHA 青青霉霉烯烯酸酸青青霉霉素素族族（水解）（水解）穩(wěn)定劑穩(wěn)定劑青霉素族青霉素族2 2、酸水解法（銅鹽法、酸水解法（銅鹽法）（1 1）原理）原理.CH2COCONHHCCH3CH3CCOOHCCNHSHCONSOHNCOOHCH3CH3CH2 pHACu .（2 2）方法）方法標(biāo)標(biāo)樣樣枸枸櫞櫞酸酸硫硫酸酸銅銅標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液供供試試液液AAnmA 320（3 3）特點）特點實驗條件隨各藥物穩(wěn)定性不同而定實驗條件隨

33、各藥物穩(wěn)定性不同而定標(biāo)準(zhǔn)品對照法標(biāo)準(zhǔn)品對照法.%WWAA標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品品含含量量樣樣標(biāo)標(biāo)標(biāo)標(biāo)樣樣 （4 4）計算）計算.Fe3+/3H+紅色紅色-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類NaOH HClNOHH內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類羥羥肟肟酸酸衍衍生生物物3 3、羥肟酸比色法、羥肟酸比色法. HPLCHPLC法法 頭孢菌素類頭孢菌素類內(nèi)標(biāo)法校正因子內(nèi)標(biāo)法校正因子 外標(biāo)法外標(biāo)法特點特點 快速、高效、靈敏快速、高效、靈敏 專屬性強、重現(xiàn)性好專屬性強、重現(xiàn)性好一法多用（鑒別、檢查、含測）一法多用（鑒別、檢查、含測）.五、生物樣品中五、生物樣品中B-B-內(nèi)酰胺類抗生素分析內(nèi)酰胺類抗生素分析人血漿中阿莫西林濃度測定人血漿中阿莫西林濃度測

34、定C18C18，.第三節(jié)第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素氨基糖苷類抗生素苷苷苷苷元元糖糖縮縮合合 氨基糖苷氨基糖苷苷元苷元氨基糖氨基糖縮合縮合 鏈霉素鏈霉素 雙氫鏈霉素雙氫鏈霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡那霉素慶大霉素慶大霉素 巴龍霉素巴龍霉素.鏈霉胍 + 鏈霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元苷元糖糖鏈霉雙糖胺鏈霉雙糖胺鏈霉素鏈霉素.NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉胍鏈霉胍鏈霉糖鏈霉糖N-N-甲基甲基-L-L-葡萄糖胺葡萄糖胺.NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉胍

35、鏈霉胍鏈霉糖鏈霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺. 糖糖 苷元苷元絳紅糖胺絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 慶大霉素慶大霉素.ROC R1R2HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3絳紅糖胺絳紅糖胺紫素胺紫素胺2-2-脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-N-甲基甲基-3-3-去氧去氧-4-4-甲甲基戊糖胺基戊糖胺.慶大霉素慶大霉素C C復(fù)合物復(fù)合物 慶大霉素慶大霉素C C1 1 R=H RR=H R1 1、R R2 2=CH=CH3 3 慶大霉素慶大霉素C C2 2 R=RR=R2 2=H =H R R1 1=CH=CH3 3 慶大霉素慶大

36、霉素C C1a 1a R R、R R1 1、R R2 2=H=H 慶大霉素慶大霉素C C2a 2a R=CHR=CH3 3 R R1 1= R= R2 2=H =H 慶大霉素慶大霉素C C2b 2b R=RR=R1 1=H R=H R2 2=CH=CH3 3.一、 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)鏈霉素鏈霉素 3 3個個慶大霉素慶大霉素 5 5個個堿性中心堿性中心（一）堿性與溶解性（一）堿性與溶解性多與硫酸成鹽多與硫酸成鹽溶解性：水溶性溶解性：水溶性.慶大霉素慶大霉素 pH2pH212 12 穩(wěn)定穩(wěn)定UV（四）（四）（三）穩(wěn)定性與鏈霉素水解產(chǎn)物反應(yīng)（三）穩(wěn)定性與鏈霉素水解產(chǎn)物反應(yīng)旋光性旋光性（二）（二）.

37、NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3坂口反應(yīng)坂口反應(yīng)N-N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反應(yīng)糖胺反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)麥芽酚反應(yīng).藍(lán)藍(lán)紫紫色色慶慶大大霉霉素素鏈鏈霉霉素素茚茚三三酮酮二、鑒別二、鑒別（一）茚三酮反應(yīng)（一）茚三酮反應(yīng) 羥基胺結(jié)構(gòu)羥基胺結(jié)構(gòu)取慶大霉素取慶大霉素5mg5mg水水1ml1ml，0.1%0.1%茚三酮的水茚三酮的水飽和正丁醇溶液飽和正丁醇溶液1ml,1ml,吡啶吡啶0.5ml,0.5ml,水浴加水浴加熱熱5min,5min,顯紫色。顯紫色。.（二）（二）MolischMolisch試驗試驗具有五碳糖或六碳糖結(jié)構(gòu)的氨具有五碳糖或

38、六碳糖結(jié)構(gòu)的氨基糖苷類抗生素經(jīng)酸水解后，基糖苷類抗生素經(jīng)酸水解后，在鹽酸或硫酸作用下脫水，成在鹽酸或硫酸作用下脫水，成糠醛（五碳）或羥甲基糠醛（糠醛（五碳）或羥甲基糠醛（六碳糖）。這些產(chǎn)物遇六碳糖）。這些產(chǎn)物遇a-a-萘酚萘酚或蒽酮成色?；蜉焱缮?甲甲基基葡葡萄萄糖糖胺胺慶慶大大霉霉素素鏈鏈霉霉素素水水解解 N乙酰丙酮乙酰丙酮OHOH- -吡咯衍生物吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛對二甲氨基苯甲醛H H+ +紅色紅色（Elson-MorganElson-Morgan反應(yīng)）反應(yīng)）（三）（三） N-N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)甲基葡萄糖胺反應(yīng).NHCH3NHNHNH C NH2HOOHOHNHCH2NOOC

39、H3OHCHOOOCH2OHOHOHNCH3COCH3HHOCH2CHOH3(縮合縮合)323COCHCOCHCH OH.HHH3CH3CCHNNCOCH3CH3COCH3CH3N紅色紅色對二甲氨基苯甲醛對二甲氨基苯甲醛H+NCH3COCH3HHOCH2CHOH3. 鏈霉糖特有反應(yīng)鏈霉糖特有反應(yīng)鏈鏈霉霉糖糖鏈鏈霉霉素素 OH麥麥芽芽酚酚紫紫紅紅色色 3FeH+分子重排分子重排（四）麥芽酚（四）麥芽酚（MaltolMaltol）反應(yīng)）反應(yīng).NH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHNHNHCH3H2O NaOHOOOHCH3OOCH3Fe3+H+OFe

40、33+/紫紅紫紅麥芽酚麥芽酚.鏈霉胍特有反應(yīng)鏈霉胍特有反應(yīng)橙橙紅紅羥羥基基喹喹啉啉鏈鏈霉霉胍胍鏈鏈霉霉素素次次溴溴酸酸鈉鈉 8OH（或或-萘酚萘酚）NOH8-8-羥基喹啉羥基喹啉坂口反應(yīng)坂口反應(yīng)（五）（五） - -萘酚萘酚OH.ONBrRNHCO NH.（六）（六） 24SO反應(yīng)反應(yīng)白白 BaSOSOBaH+（八）光譜法（八）光譜法 IRIR法法慶大霉素?zé)o慶大霉素?zé)oUVUV吸收吸收nmmax 鏈鏈霉霉素素（七）（七） TLCTLC法法UVUV法法. 方法方法 TLCTLC中的對照品法中的對照品法 （BPBP）1. 1. 來源來源 反應(yīng)中間體反應(yīng)中間體三、特殊雜質(zhì)檢查及組分分析特殊雜質(zhì)檢查及組分

41、分析（一）鏈霉素中（一）鏈霉素中鏈霉素鏈霉素B B（甘露（甘露糖鏈霉素）糖鏈霉素）雜質(zhì)雜質(zhì).（二）硫酸奈替米星中有關(guān)物（二）硫酸奈替米星中有關(guān)物質(zhì)的檢查（略）質(zhì)的檢查（略）.對微生物的活性無明顯差異對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同發(fā)酵菌種不同工藝差別工藝差別C C組分比例組分比例不一致不一致規(guī)定控制各組分的相對百分含量規(guī)定控制各組分的相對百分含量ChPUSPBPJP（三）慶大霉素（三）慶大霉素C C組分的測定組分的測定. .pH吲吲哚哚衍衍生生物物巰巰基基醋醋酸酸鄰鄰苯苯二二醛醛氨氨基基max max = 330nm= 330nm衍生化原理衍生化原理

42、 1.1.1-1-烷基硫代烷基硫代-2-2-烷基烷基異吲哚衍生物異吲哚衍生物RNH2+HSCH2COOHOH-CHOCHONRSCH2COOH. 規(guī)定規(guī)定 C1 2550% C1a 1540% C2a +C2 2050%AAAAA%ACCCCiiaa 3. 3. 計算計算 峰面積歸一化法峰面積歸一化法2.2.方法方法 RPRPHPLCHPLC.（四）硫酸鹽測定（四）硫酸鹽測定 EDTAEDTA絡(luò)合滴定法絡(luò)合滴定法.四、含量測定含量測定鏈霉素、慶大霉素鏈霉素、慶大霉素微生物檢定法微生物檢定法本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴散作用量反應(yīng)平行線原理的設(shè)的擴散作用量反應(yīng)

43、平行線原理的設(shè)計，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對接計，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對接種的試驗菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以種的試驗菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測定供試品效價的一種方法。測定供試品效價的一種方法。.血清中慶大霉素的血清中慶大霉素的HPLCHPLC法法 血漿樣品的預(yù)處理血漿樣品的預(yù)處理 離子對色譜法的目的：離子對色譜法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干擾除去氨基酸、肽、胺的干擾 選用選用OPAOPA為熒光衍生化試劑為熒光衍生化試劑 采用柱后衍生化法采用柱后衍生化法 .2CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R1第四節(jié)第四節(jié) 四環(huán)素類抗生素四環(huán)素類抗生素ABCD.2CH3NRR3HOHCONH2O

44、OHOHOOHR2R1123456789101112.2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HO四環(huán)素四環(huán)素（TCTC）tetracyclinetetracycline.2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOCl金霉素金霉素 (CTC)(CTC) chlortetracyclinechlortetracycline氯四環(huán)素氯四環(huán)素.2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOOH土霉素土霉素 (OTC) oxytetracycline氧四環(huán)素氧四環(huán)素.2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3OH多西環(huán)素多西環(huán)素 (DOTC) doxycycline(DO

45、TC) doxycycline脫氧土霉素脫氧土霉素.美他環(huán)素美他環(huán)素（METCMETC） metacyclinemetacyclineHOHCONH2OOHOHOOHN CH3 2OHCH2.2CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R1.一、 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.1.與酸、堿均能成鹽與酸、堿均能成鹽2.2. 強酸或強堿中溶解度強酸或強堿中溶解度 酚羥基、烯醇型羥基酚羥基、烯醇型羥基 弱酸性弱酸性二甲胺基二甲胺基 弱堿性弱堿性（一）酸堿性與溶解度（一）酸堿性與溶解度 兩性兩性.具有吸濕性，多含結(jié)晶水具有吸濕性，多含結(jié)晶水與金屬離子生成有色配位化合物與金屬離子生成有色配位化合物Ca

46、Ca2+2+ Mg Mg2+2+ Fe Fe3+3+ Al Al3+ 3+ UVUV（三）（三）pH3 7.5 pH3 7.5 熒光熒光 （二）旋光性（二）旋光性（四）與金屬離子絡(luò)合（四）與金屬離子絡(luò)合.HOHOCaOOOOHOHOO.差差向向金金霉霉素素差差向向四四環(huán)環(huán)素素金金霉霉素素四四環(huán)環(huán)素素 pH淡黃淡黃黑黑藍(lán)色熒光藍(lán)色熒光（五）不穩(wěn)定性（五）不穩(wěn)定性.OHCONH2OOHOHOOHCH3HCH3 2NHO差向四環(huán)素差向四環(huán)素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HO.2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHR2R1HO（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)化）（土霉素、多西環(huán)素不

47、易差向異構(gòu)化）.（1 1）酸性下降解）酸性下降解脫水金霉素脫水金霉素脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素金霉素金霉素四環(huán)素四環(huán)素 pHmax = 445nmmax = 435nm橙黃色橙黃色2. 2. 降解反應(yīng)降解反應(yīng).2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HON CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OH脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素.2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOpH26pH26TCOHCONH2OOHOHOOHCH3HCH3 2NHOETCN CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OHATCN2CH3OHCONH2OOHOHOHOCH3HEATCpH2pH2.（2 2）

48、堿性下降解）堿性下降解異異四四環(huán)環(huán)素素四四環(huán)環(huán)素素 OH（熒光）（熒光）HOHCONH2OOHOHOOHCH3ON CH3 2.二、 鑒別試驗鑒別試驗H H2 2SOSO4 4反應(yīng)反應(yīng)（一）（一）黃色黃色朱紅色朱紅色綠綠藍(lán)藍(lán)深紫色深紫色鹽酸多西環(huán)素鹽酸多西環(huán)素鹽酸土霉素鹽酸土霉素鹽酸金霉素鹽酸金霉素鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素 SOH.FeClFeCl3 3反應(yīng)反應(yīng)（二）（二）褐色褐色橙褐色橙褐色深褐色深褐色紅棕色紅棕色鹽酸多西環(huán)素鹽酸多西環(huán)素鹽酸土霉素鹽酸土霉素鹽酸金霉素鹽酸金霉素鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素 FeCl.EDTA EDTA 克服痕量金屬造成的克服痕量金屬造成的 拖尾現(xiàn)象拖尾現(xiàn)象（三）（三）

49、TLC法法正相分配薄層正相分配薄層 色譜色譜（四）HPLC. 4- 4-差向四環(huán)素（差向四環(huán)素（ETCETC） 脫水四環(huán)素（脫水四環(huán)素（ATCATC） 差向脫水四環(huán)素（差向脫水四環(huán)素（EATCEATC） 鹽酸金霉素（鹽酸金霉素（CTCCTC） 有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)（一）（一）HPLCHPLC法（法（20002000版）版）標(biāo)準(zhǔn)品對照法標(biāo)準(zhǔn)品對照法三、特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)的檢查 鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素.吸收度吸收度（二）（二）nmmax 、鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素.CTC).(Anm 控控制制雜質(zhì)吸收度雜質(zhì)吸收度EATCATC.Anm、控制控制 異異四四環(huán)環(huán)素素控控制制 .Anm 注注射射用用.四、 含

50、量測定含量測定 ChP、USPHPLCHPLC法（外標(biāo)法）法（外標(biāo)法）系統(tǒng)適用性試驗系統(tǒng)適用性試驗 1. 1. 防護(hù)柱防護(hù)柱2. 2. 預(yù)試溶液預(yù)試溶液4-4-差向脫水四環(huán)素差向脫水四環(huán)素四環(huán)素四環(huán)素3. RSD2.0%3. RSD2.0%90.tR 01.tR .R.JP JP 比色法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）比色法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）標(biāo)標(biāo)nmHCl.dHCl.dA 標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液標(biāo)標(biāo)調(diào)調(diào)零零標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液空空樣樣nmHCl.dHCl.dA 供供試試液液樣樣調(diào)調(diào)零零供供試試液液空空原理原理脫脫水水四四環(huán)環(huán)素素四四環(huán)環(huán)素素 pH.1. 1. 熟悉抗生素類藥物分析的特點及其熟悉抗生素類藥物分析的特點及其常規(guī)檢驗項目。

51、了解抗生素類藥物的分常規(guī)檢驗項目。了解抗生素類藥物的分析現(xiàn)狀，熟悉生物學(xué)法與物理化學(xué)法測析現(xiàn)狀，熟悉生物學(xué)法與物理化學(xué)法測定效價的原理及優(yōu)缺點。定效價的原理及優(yōu)缺點。2. 2. 掌握掌握內(nèi)酰胺類抗生素的結(jié)構(gòu)、內(nèi)酰胺類抗生素的結(jié)構(gòu)、 性質(zhì)、鑒別及含量測定。性質(zhì)、鑒別及含量測定。第十一章第十一章 復(fù)習(xí)內(nèi)容復(fù)習(xí)內(nèi)容.3. 3. 掌握氨基糖苷類抗生素的結(jié)構(gòu)、掌握氨基糖苷類抗生素的結(jié)構(gòu)、性性 質(zhì)及鑒別，了解其檢查及含量質(zhì)及鑒別，了解其檢查及含量測定測定4. 4. 掌握四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)及掌握四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)，了解其鑒別、檢查及含量性質(zhì)，了解其鑒別、檢查及含量測定測定5. 5. 了解抗生素類藥

52、物的質(zhì)量考察了解抗生素類藥物的質(zhì)量考察方法方法.下列哪個藥物會發(fā)生羥肟酸下列哪個藥物會發(fā)生羥肟酸 鐵反應(yīng)鐵反應(yīng) A. A. 青霉素青霉素 B. B. 慶大霉素慶大霉素 C. C. 紅霉素紅霉素 D. D. 鏈霉素鏈霉素 E. E. 維生素維生素C C .中國藥典中國藥典(1995(1995年版年版) )測定頭測定頭 孢菌素類藥物的含量時，多數(shù)采用的孢菌素類藥物的含量時，多數(shù)采用的方法是方法是 A. A. 微生物法微生物法 B. B. 碘量法碘量法 C. C. 汞量法汞量法 D. D. 正相高效液相色譜法正相高效液相色譜法 E. E. 反相高效液相色譜法反相高效液相色譜法.屬于屬于 - -內(nèi)酰胺

53、類的抗生素藥物有內(nèi)酰胺類的抗生素藥物有 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 紅霉素紅霉素 C. C. 頭孢菌素頭孢菌素D. D. 慶大霉素慶大霉素 E. E. 四環(huán)素四環(huán)素.能和茚三酮發(fā)生呈色反應(yīng)的物質(zhì)有能和茚三酮發(fā)生呈色反應(yīng)的物質(zhì)有 A A鏈霉素鏈霉素 B B慶大霉素慶大霉素 C C土霉素土霉素 D D氨基酸氨基酸 E E苯巴比妥苯巴比妥.青霉素類藥物可用下面哪些方法測定青霉素類藥物可用下面哪些方法測定 A. A. 三氯化鐵比色法三氯化鐵比色法 B. B. 汞量法汞量法 C. C. 碘量法碘量法 D. D. 硫醇汞鹽法硫醇汞鹽法 E. E. 酸性染料比色法酸性染料比色法.能發(fā)生重氮化一偶合

54、反應(yīng)的抗生素能發(fā)生重氮化一偶合反應(yīng)的抗生素類藥物是類藥物是 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 慶大霉素慶大霉素 芐星青霉素芐星青霉素 鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素C.C.E. E. 普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素.以下反應(yīng)可適用的藥物以下反應(yīng)可適用的藥物 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 鏈霉素鏈霉素 C. C. 兩者均能兩者均能 D. D. 兩者均不能兩者均不能KoberKober反應(yīng)反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng)坂口反應(yīng)坂口反應(yīng)NN甲基葡萄糖胺反應(yīng)甲基葡萄糖胺反應(yīng)在酸性溶液中水解在酸性溶液中水解D DA AB BB BC C.可以鑒別的藥物是可以鑒別的藥物是 A. A. 鏈霉素鏈霉素 B. B

55、. 慶大霉素慶大霉素 C. C. 兩者均可兩者均可 D. D. 兩者均不可兩者均不可用用KoberKober反應(yīng)反應(yīng)用坂口反應(yīng)用坂口反應(yīng) 用麥芽酚反應(yīng)用麥芽酚反應(yīng)用三氯化鐵反應(yīng)用三氯化鐵反應(yīng)用茚三酮反應(yīng)用茚三酮反應(yīng)DAADC.問題問題 A. A. 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng) B. B. 麥芽酚反應(yīng)麥芽酚反應(yīng) C. C. 坂口反應(yīng)坂口反應(yīng) D. FeC1D. FeC13 3反應(yīng)反應(yīng) E. E. 羥肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng)頭孢唑林鈉頭孢唑林鈉金霉素金霉素 鏈霉素鏈霉素慶大霉素慶大霉素 青霉素青霉素EDEAABC.四環(huán)素在酸性條件下的降解產(chǎn)物四環(huán)素在酸性條件下的降解產(chǎn)物是是 A. A. 差向四環(huán)素差向四環(huán)素

56、 B. B. 脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素 C. C. 異四環(huán)素異四環(huán)素 D. D. 去甲四環(huán)素去甲四環(huán)素 E. E. 去甲氧四環(huán)素去甲氧四環(huán)素.課 件 素 材.NSOHNCOOKCH3CH3OCCH2酸性酸性結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、NaNa與堿金屬與堿金屬(Na(Na+ +、K K+ +) )成鹽成鹽 （一）羧基（一）羧基 易溶于水易溶于水 .與有機堿與有機堿(普魯卡因普魯卡因)成鹽成鹽 難溶于水難溶于水普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素C2H52NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2.NSO1234567（二）手性C 87654321NOS(5%頭孢唑啉鈉溶液頭孢唑啉鈉溶液

57、1824)20D 頭孢菌素類頭孢菌素類 C6 C7青霉素類青霉素類 C3 C5 C6 旋光性旋光性. （三）共軛體系 NSO頭孢菌素類頭孢菌素類 母核有共軛體系母核有共軛體系 青霉素類青霉素類 母核無明顯母核無明顯UV 多數(shù)有苯環(huán)取代基多數(shù)有苯環(huán)取代基 NOS UV.青霉素鈉青霉素鈉UV7-20.（四）內(nèi)酰胺環(huán) 水溶液水溶液 不穩(wěn)定不穩(wěn)定 干燥純凈干燥純凈 穩(wěn)定穩(wěn)定 不穩(wěn)定不穩(wěn)定性因素性因素四元環(huán)張力大四元環(huán)張力大 酰胺鍵易水解酰胺鍵易水解 .（某些金屬離子）（某些金屬離子）（溫度）（溫度）失失效效降降解解青青霉霉素素類類酸酸、堿堿、青青霉霉素素酶酶某些氧化劑某些氧化劑.例例青霉素的降解反應(yīng)青

58、霉素的降解反應(yīng)青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻唑青霉噻唑?；u胺酸酰基羥胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2.失效失效降解降解頭孢菌素類頭孢菌素類酸、堿、胺類酸、堿、胺類內(nèi)酰胺酶內(nèi)酰胺酶 (頭孢噻吩鈉水溶液頭孢噻吩鈉水溶液2524h失活失活8%).二、二、K+、Na+反應(yīng)反應(yīng)（一）（一）鑒別鑒別 焰色焰色鮮黃色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅醋酸氧鈾鋅黃黃 Na+ 焰色焰色紫色紫色 + 0.1%四苯硼鈉四苯硼鈉 + Ac白白 K+.（二）呈色反應(yīng)（二）呈色反應(yīng)1. 羥肟酸鐵反應(yīng)羥肟酸鐵反應(yīng) -內(nèi)酰胺類

59、內(nèi)酰胺類NaOH HClNOHH內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類呈色呈色羥肟酸衍生物羥肟酸衍生物Fe3+/3H+.NSONSCOHNHOHH2NOH HClNSCHNHOFe3+3OH+Fe3+/3 （紅、棕、褐）（紅、棕、褐）.例：ChP(2000)頭孢哌酮鑒別 取本品10mg，加水2ml與鹽酸羥胺溶液取34.8%鹽酸羥胺溶液1份，醋酸鈉-氫氧化鈉溶液1份，乙醇4份3ml，振搖溶解后，放置5min，加酸性硫酸鐵銨試液1ml，搖勻，顯紅棕色。.2、 與與H2SO4 - HNO3反應(yīng)反應(yīng)藍(lán)綠色藍(lán)綠色紅棕紅棕黃色黃色頭孢噻啶頭孢噻啶頭孢噻吩鈉頭孢噻吩鈉頭孢氨芐頭孢氨芐 HNOSOH頭孢菌素類頭孢菌素類.NH2CO

60、NSOHNCOOHCH3CH3CH23. 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng)藍(lán)藍(lán)紫紫色色氨氨基基茚茚三三酮酮 .-氨基、伯胺氨基、伯胺某些羥基胺類某些羥基胺類酮式酮式烯醇式烯醇式茚三酮茚三酮茚三酮茚三酮縮合縮合藍(lán)紫色藍(lán)紫色+H2OCNCH2RC OH2RCHH2NCOOH2OHCCOCOCOHNH2CCOCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO.4. 雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類 CONH紫紫內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類堿性酒石酸銅堿性酒石酸銅 （開環(huán)分解）（開環(huán)分解）.2OHCONH2CuCOHNCCH3COONaCH3SNHNCH3CH3COONaCSNOHOHOOCH2NH2CH2H