十大功勞對小鼠血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的影響

1、十大功勞對小鼠血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的影響 作者：余慶皋，嚴丹華，劉捷頻，熊志青【摘要】 目的研究中藥十大功勞在小鼠體內的抗氧化作用。方法用不同濃度十大功勞水煎液喂養(yǎng)小鼠4周，眼眶取血，用超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒和丙二醛（MDA）試劑盒測定小鼠血清SOD活性和MDA含量。結果與對照組比較，喂藥組小鼠血清SOD活性升高，MDA含量降低。結論十大功勞在小鼠體內具有抗氧化作用，能升高血清SOD的活性，降低血清過氧化脂質產(chǎn)物MDA的含量。 【關鍵詞】 十大功勞 小鼠 超氧化物歧化酶 丙二醛Abstract：Objective：To study the antioxidative ef

2、fect of mahonia.Methods： The mice were fed with Mahonia water decoction in different concentrations for four weeks,the blood samples from the orbit were collected and the SOD(Superoxide Dismatase) activity and MDA(Malondialdehyde) content serum of mice were measured by using SOD kit MDA kit. Results

3、：Compared with the control group,the SOD activity in serum in the experiment groups was inereased,the MDA content was decreased.Conclusion：Mahonia has antioxidative effect by inereasing the SOD activity of serum and lowering the content of serum lipid peroxidation product MDA.Key words：Mahonia； Mice

4、； Superoxide Dismatase； Malondialdehyde 眾多的研究資料表明，炎癥、衰老、腫瘤及呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等多種系統(tǒng)疾病的發(fā)生及病理改變都與體內自由基產(chǎn)生過多或清除自由基能力下降有關13，因此臨床上將自由基清除劑用于這些疾病的并取得一定療效46，自由基清除劑的尋找及合成也成為當前醫(yī)藥研究的主要方向之一，而中藥的天然、豐富及低毒更受人們的青睞。國外學者研究發(fā)現(xiàn)十大功勞的莖皮萃取物和生物堿具有清除自由基、抑制脂氧化酶及抗脂質過氧化的功能7，8，國內研究人員從闊葉十大功勞中提取出抗氧化物質總黃酮9，但國內尚未發(fā)現(xiàn)十大功勞抗氧化作用的研究報道。筆者最近進行了十

5、大功勞體外清除氧自由基的實驗，結果表明十大功勞具有清除超氧陰離子自由基（O-2）及羥自由基（OH）的作用10。本實驗則通過測定小鼠血清SOD活性及MDA含量來反映十大功勞在生物體內的抗氧化作用。1 器材與方法1.1 藥品及試劑十大功勞（購于湖南省湘潭市福壽堂大藥房），SOD試劑盒、MDA試劑盒（南京建成生物工程研究所生產(chǎn)），冰乙酸（廣東省汕頭市西隴化工廠生產(chǎn)），無水乙醇（安徽安特生物化學有限公司生產(chǎn)）。1.2 動物采用湘潭職業(yè)技術學院動物飼養(yǎng)場喂養(yǎng)的4周齡健康昆明系小鼠60只，雌雄不限，體重為（20.02.0）g。1.3 儀器752N紫外可見分光光度計（上海精密儀器有限公司生產(chǎn)），DK-600

6、S三用恒溫水浴箱（上海精密實驗設備有限公司生產(chǎn)）。1.4方法1.4.1 制備十大功勞濃縮液先用蒸餾水將中藥十大功勞浸泡120 min，然后煎煮兩次，第1次煎煮120 min，第2次煎煮90 min，合并煎液過濾、濃縮，配制成低、中、高3種濃度的十大功勞水煎液。1.4.2 不同濃度十大功勞水煎液喂養(yǎng)小鼠 將60只小鼠隨機分成4組：喂藥1組、喂藥2組、喂藥3組及對照組，喂藥1，2，3組分別喂低、中、高濃度的水煎液0.3 ml，對照組則喂蒸餾水0.3 ml，均用小鼠灌胃器灌入，1次/d，喂養(yǎng)時間4周。喂養(yǎng)期間，各組小鼠均自由進食及進水。1.4.3 測小鼠血清SOD活性及MDA含量 十大功勞喂養(yǎng)小鼠4

7、周后，眼眶取血，4冰箱過夜，3 000 r/min離心10 min得血清。按SOD試劑盒及MDA試劑盒說明操作，測定小鼠血清SOD活性及MDA含量。1.5 統(tǒng)計學處理組間采用t檢驗，數(shù)據(jù)以s表示。1 2結果 如表1所示，喂藥各組小鼠血清SOD活性明顯高于對照組，有高度顯著性差異；并且1組2組小鼠血清SOD活性又高于3組。喂藥各組小鼠血清MDA含量明顯低于對照組，有高度顯著性差異；1組又明顯低于2組和3組。表1 各組小鼠血清SOD活性及MDA含量的比較（略）3 討論 十大功勞有清熱燥濕，瀉火解毒的功能，用于濕熱瀉痢、黃疸、目赤腫痛、胃火牙痛、瘡癤、癰腫、痢疾等11。人們對其化學成分的研究發(fā)現(xiàn)，十

8、大功勞含有生物堿、揮發(fā)油、總黃酮等多種有效成分9，12，13，具有抗菌、抗病毒、抑制角質細胞增生、抗突變、抗氧化等功能7，8，1417，我們此前的研究也證實了它在體外清除氧自由基的作用10。本次研究顯示了十大功勞在生物體內的抗氧化作用，與對照組比較，十大功勞能使喂藥組小鼠血清SOD活性升高，MDA含量降低。但實驗中并沒有表現(xiàn)出明顯的量-效關系，可能與起始劑量過高有關。另外，結果顯示藥物劑量太高反而使它的這種作用降低，如喂藥3組小鼠血清SOD活性低于喂藥1組和2組，喂藥2組和3組血清MDA含量則高于喂藥1組，其原因有待于進一步研究，但這種結果可為臨床用藥提供。生物體內產(chǎn)生的自由基主要是O-2，O

9、-2還可進一步衍生為OH 和H2O2。它們化學性質活潑，可作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子，造成細胞結構和功能受損，加速組織的衰老過程，并可導致體內代謝紊亂而引起疾病。機體對O-2的清除主要靠SOD，SOD可催化2分子O-2生成H2O2和O2，H2O2又在過氧化氫酶的催化下還原為H2O：2O-2 +2H+H2O2+O2，2H2O22H2O+O2。MDA是體內脂質過氧化的產(chǎn)物，當體內自由基增多時，MDA含量則升高。本實驗結果表明，十大功勞可使小鼠體內SOD活性升高，而使MDA含量降低，顯示了十大功勞在生物體內的抗氧自由基作用。十大功勞在我國資源豐富，臨床上應用廣泛，它的抗氧化功能研究，可為

10、該藥的臨床應用機制提供新的理論依據(jù)，并有望在臨床及衛(wèi)生保健方面開辟新的應用領域?！緟⒖肌?1Valko M, Izakovic M, Mazur M,et al. Role of oxygen radicals in DNA damage and cancer incidenceJ. Mol Cell Biochem，2004,266(1-2):37.2Limoli CL,Kaplan MI,Giedzinski E,et al.Attenuation of radiation-induced genomic instability by free radical scavengers and

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14、):695.11國家藥典委員會.中國藥典，部S.北京:化學出版社，2005:58.12呂光華,王立為,陳建民,等.高效液相色譜法測定十大功勞屬植物中的7種生物堿成分J.藥物分析雜志,1999,19(4):271.13董 雷,楊曉虹,王 勇,等.闊葉十大功勞莖中揮發(fā)油成分GC/MS分析J.長春中醫(yī)藥大學學報，2006,22(3):43.14Cernakova M, Kostalova D.Antimicrobial activity of berberinea constituent of Mahonia aquifoliumJ. Folia Microbiol (Praha). 2002,47(4):375.15曾祥英,勞邦盛,董熙昌,等.闊葉十大功勞根中生物堿組分體外抗流感病毒試驗研究J.中藥材,2003,26(1):29.16Muller K, Ziereis K, Gawlik I.The antipsoriatic Mahonia aquifolium and its active constituents; II. Antiproliferative activity against cell