運脾復(fù)方對幼齡厭食大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)和腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元自發(fā)放電的

1、    運脾復(fù)方對幼齡厭食大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)和腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元自發(fā)放電的影響          摘要：目的：觀察運脾復(fù)方對幼齡厭食大鼠攝食中樞和飽中樞神經(jīng)元自發(fā)放電的影響，探討運脾復(fù)方治療小兒厭食癥的作用機制。方法：在成功建立幼齡厭食大鼠模型的基礎(chǔ)上,用細胞外記錄方法,記錄實驗動物下丘腦外側(cè)區(qū)和腹內(nèi)側(cè)區(qū)的神經(jīng)元單位放電頻率，在對照組、模型組和用藥組之間進行對比。結(jié)果：模型動物下丘腦外側(cè)區(qū)神經(jīng)元放電頻率降低,運脾復(fù)方能刺激下丘腦外側(cè)區(qū)神經(jīng)元放電，同時抑制下丘腦腹內(nèi)側(cè)區(qū)放電

2、。結(jié)論：運脾復(fù)方能調(diào)節(jié)攝食中樞和飽中樞神經(jīng)元的自發(fā)放電，促進動物攝食。關(guān)鍵詞：厭食；運脾復(fù)方；動物模型；攝食中樞；飽中樞；下丘腦中分類號：R272.6；R725.7文獻標(biāo)識碼：A文章編號：1004-0668(2000)02-0038-02Effects of YunPi Fufang on the Spontaneous Dischargesof neurons in LH and VMH of Juvenile Rat with Anorexia ZHANG Yueping, DU Yongping, HU Sanjue, et alDeptartment of TCM, Xijing Ho

3、spital of the Fourth Military Medical University, Xi'an(710032)ABSTRACT:On the basement of making the juvenile rat model with anorexia, using the extracellular recording method, we recorded the frequencies of spontaneous discharge of neurons in LH and VMH of the model and studied the effects of

4、YunPi Fufang on the discharges. Experimental results indicated that the discharges of neurons were suppressed in LH of model, and Yunpi Fufang could enhance the discharges in LH, while inhibit the discharges in VMH. These findings suggest that Yunpi Fufang could modulate the relation between LH and

5、VMH of the model which increased the feeding of model.KEY WORDS:Children anorexia; animal model; LH VMH Discharges 基金項目：國家自然科學(xué)基金資助課題（批準(zhǔn)號：39670896）作者簡介：張月萍，女，1965年出生；醫(yī)學(xué)博士，主治醫(yī)師；中醫(yī)兒科專業(yè)；研究方向：小兒脾胃病。作者單位：張月萍(第四軍醫(yī)大學(xué) 西京醫(yī)院，陜西 西安710032)杜永平(第四軍醫(yī)大學(xué) 西京醫(yī)院，陜西 西安710032)胡三覺(第四軍醫(yī)大學(xué)神經(jīng)生物研究所)汪受傳(南京中醫(yī)藥大學(xué))下丘腦外側(cè)區(qū)（Lateral H

6、ypothalamus, LH）和下丘腦腹內(nèi)側(cè)區(qū)（Vetromedial Hypothalamus ,VMH）在綜合各種信息影響動物攝食行為方面有重要的整合作用，被稱為攝食中樞和飽中樞1。本研究在運脾復(fù)方兒寶顆粒治療小兒厭食癥取得可靠療效并成功建立了厭食動物模型的基礎(chǔ)上2,3，用細胞外記錄法，記錄大鼠LH和VMH的神經(jīng)元單位放電，試分析運脾復(fù)方對幼齡厭食大鼠攝食中樞和飽中樞神經(jīng)元自發(fā)放電的影響。1材料和方法1.1造模與灌胃摸擬小兒厭食癥的主要病因，采用特制飼料喂養(yǎng)法造模3，以造模動物攝食量下降40%60%為模成標(biāo)志。造模同時開始灌胃。實驗用剛斷奶的雄性SD大鼠45只，體重80 g±1

7、0 g（第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供），隨機分為對照組、模型組和治療組，每組15只。對照組喂常規(guī)鼠飼料，用等容積自來水灌胃；模型組喂自制的特制飼料，用等容積自來水灌胃；治療組喂特制飼料，用運脾復(fù)方兒寶顆粒(3.76 g/100 g，為2倍臨床等效量。由南京中醫(yī)藥大學(xué)植物藥深加工中心提供，主要成分為蒼術(shù)、陳皮、茯苓、炙雞內(nèi)金等)浸膏灌胃。所有動物分籠飼養(yǎng)，自由進食水。1.2記錄神經(jīng)元放電實驗第22天引導(dǎo)神經(jīng)元放電，手術(shù)時動物體重130160 g。于21：000：00時引導(dǎo)神經(jīng)元放電。實驗動物術(shù)前禁食8 h，在10%氨基甲酸乙酯和1%氯醛糖混合液（10 mL/kg,ip）麻醉下作氣管插管，俯臥位固

8、定在腦立體定位儀上（日本成茂產(chǎn)品），根據(jù)Paxinos和Watson大鼠腦譜定位坐標(biāo)，在顱骨表面鉆孔，并除去硬去硬腦膜。VMH定位坐標(biāo)為Bregma-2.56mm，中線旁開0.5mm，深8mm；LH為Bregma-2.56mm，中線旁開2mm，深7mm（腦表面下）。用微電極操縱器將玻璃微電極插入LH和VMH引導(dǎo)神經(jīng)元放電。電極尖端直徑為1.01.5m，用含2%滂胺天藍的0.5mol/L醋酸鈉溶液充灌，電極電阻為1030 m。微電極引導(dǎo)的信號經(jīng)放大器（日本光電產(chǎn)品）放大后顯示于VC-10（日本光電產(chǎn)品）示波器上，并輸入計算機自動繪制成頻率直方。實驗結(jié)束后電泳滂胺天藍標(biāo)定，經(jīng)心臟灌流后做腦組織切片

9、，檢查微電極尖端位置，定位不準(zhǔn)確的結(jié)果舍去。實驗結(jié)果以<"xx1 (49 bytes)" src="/med/cano/201003/20100324183704987" 8 9>±s表示。2結(jié)果2.1運脾復(fù)方對幼齡大鼠攝食量的影響實驗1周時，模型組攝食量顯著低于正常組，用藥組攝食量明顯高于模型組，表明造模成功，運脾復(fù)方治療有效。見表1。2.2運脾復(fù)方對幼齡大鼠LH和VMH神經(jīng)元自發(fā)放電（單位：Hz）的影響在13只正常大鼠的LH內(nèi)記錄了35個神經(jīng)元自發(fā)放電(n=35)，平均放電頻率為5.4±1.9；在15只正常大鼠的VMH

10、內(nèi)共記錄了35個神經(jīng)元的自發(fā)放電(n=35)，平均放電頻率為3.2±1.1；在11只模型組大鼠的LH和VMH內(nèi)分別記錄了37個(n=37)和32個(n=32)神經(jīng)元自發(fā)放電，平均放電頻率為1.3±0.5和2.5±0.8；在10只用藥組大鼠的LH和VMH內(nèi)分別記錄了36個(n=36)和38(n=38)個神經(jīng)元自發(fā)放電，平均放電頻率為3.8±1.2和1.5±0.4。其中模型組LH的放電頻率明顯低于正常組(P0.05)；用藥組LH的放電頻率明顯高于模型組(P0.05)，用藥組VMH的放電頻率明顯低于正常組(P0.05)。見1 。  

11、;  1三組大鼠LH、VMH放電頻率比較表1三組大鼠攝食量變化（<"xx1 (49 bytes)" src="/med/cano/201003/20100324183704987" 8 9>±s）組別例數(shù)第1日第7日第14日第21日對照組159.3±2.514.3±2.618.9±3.420.6±3.2模型組158.7±2.78.9±1.89.3±1.911.5±2.5治療組159.1±3.011.5±2.913.

12、7±2.815.8±2.7     模型組與正常組比，P0.05； 治療組與模型組比，P0.05。 3討論研究結(jié)果顯示模型組VMH神經(jīng)元自發(fā)放電無顯著變化，LH神經(jīng)元放電頻率顯著減少，提示LH電活動抑制是大鼠攝食量顯著下降的重要原因。用藥組LH神經(jīng)元放電頻率較模型組明顯增多，同時VMH神經(jīng)元放電頻率明顯降低，提示運脾復(fù)方不僅興奮了攝食中樞電活動，同時也抑制了飽中樞的電活動，通過調(diào)節(jié)LH和VMH神經(jīng)元之間的相互作用使動物攝食量增加。我們認為這一效應(yīng)與某些腦腸肽的分泌狀態(tài)有關(guān)4，目前已得到部分證實5。本研究初步表明飲食結(jié)構(gòu)不合理可能抑制動物的攝食中樞，使動物缺乏饑餓感而引起厭食；運脾復(fù)方治療小兒厭食癥的機理，除了以往研究顯示的促消化吸收功能外2，對中樞神經(jīng)元放電的調(diào)節(jié)也是一個重要的作用環(huán)節(jié)。參考文獻1鄧孔昭食欲中樞與攝食的中樞調(diào)控M見：周呂主編.胃腸生理學(xué)北京：科學(xué)出版社，1991，1742汪受傳，尤汝娣，郁曉維，等運脾方藥治療小兒厭食癥的臨床及實驗研究J