血管內(nèi)皮生長因子在子宮腺肌癥的表達

1、血管內(nèi)皮生長因子在子宮腺肌癥的表達【關(guān)鍵詞】 血管內(nèi)皮生長因子；子宮腺肌癥；免疫組化【摘要】 目的 探討血管內(nèi)皮生長因子（vegf）在子宮腺肌癥發(fā)病機制中的作用。方法 采用免疫組化sp法檢測30例子宮腺肌癥患者異位和在位內(nèi)膜及26例正常子宮內(nèi)膜中vegf的表達。結(jié)果 vegf在子宮腺肌癥患者異位和在位內(nèi)膜中的陽性表達均顯著高于正常內(nèi)膜；vegf在在位內(nèi)膜中的陽性表達顯著高于同組的異位內(nèi)膜表達；vegf在在位內(nèi)膜分泌期的陽性表達顯著高于增殖期。結(jié)論 血管內(nèi)皮生長因子在子宮腺肌癥患者中的異常表達對子宮腺肌癥的發(fā)生發(fā)展起著重要作用。3 討論子宮腺肌癥發(fā)病率高，發(fā)病年齡年輕化，其臨床癥狀及并發(fā)癥對女性

2、健康和生育有重大影響，確診依靠子宮切除術(shù)后的病理檢查，因此臨床診斷困難，常被忽略。目前其病因及發(fā)病機制尚不明確，guidi2用免疫組化染色發(fā)現(xiàn)子宮肌腺癥的子宮內(nèi)膜和肌層的血管生成活性顯著升高。hirotaka3通過宮腔鏡檢查發(fā)現(xiàn)近50%的子宮肌腺癥內(nèi)膜有異常血管形成。以上研究說明血管生成因素在子宮肌腺癥的發(fā)病中起了重要的作用。在眾多的血管生長因子中，vegf是最有力的血管生長因子，它通過和血管內(nèi)皮細胞的特異性受體結(jié)合，具有強大的促內(nèi)皮增殖、促血管生長作用，它的生物學(xué)功能主要有：通過活化磷脂酶c和刺激第二信使的形成直接促進血管內(nèi)皮c的有絲分裂，在核酸和蛋白水平誘導(dǎo)纖溶酶原的降解，參與細胞外蛋白水

3、解和基膜的降解，有利于血管內(nèi)皮細胞的遷移和增生4；增加血管通透性，促進包括纖維蛋白原在內(nèi)的血漿蛋白的滲出，形成纖維素網(wǎng)格，為血管芽延伸生長提供良好基質(zhì)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在子宮肌腺癥異位內(nèi)膜及在位內(nèi)膜組織中vegf的陽性表達均明顯高于正常內(nèi)膜組，并且在位內(nèi)膜的vegf表達也顯著高于異位內(nèi)膜。提示在子宮腺肌癥患者內(nèi)膜中血管生成活躍，有利于其在宮腔外種植，vegf含量增高促內(nèi)膜血管生成增多可能是異位內(nèi)膜成功種植與生長的重要因素，也由此可見vegf在子宮腺肌癥的發(fā)病機制中起著重要作用。有關(guān)的研究證明子宮內(nèi)膜血管生成始于增殖期，增殖期和分泌早期內(nèi)膜的螺旋動脈呈持續(xù)且緩慢的增殖，在分泌中、晚期，內(nèi)膜的平滑肌

4、細胞呈加速生長。本研究表明，正常子宮內(nèi)膜vegf陽性表達增殖期與分泌期兩者比較無顯著性差異，而子宮腺肌癥在位內(nèi)膜陽性表達分泌期較增殖期顯著升高，提示分泌期子宮內(nèi)膜更易于種植。 1 對象與方法 1.1 研究對象 本研究收集德州市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科2005 年8 月2007年8 月因子宮腺肌癥而行子宮切除術(shù)的患者30例作為試驗組，年齡2745歲，平均36.5歲，術(shù)后病理檢查均證實為子宮腺肌癥，增殖期內(nèi)膜14例，分泌期內(nèi)膜16例。對照組為正常子宮內(nèi)膜標(biāo)本26例，其中增殖期內(nèi)膜14例，分泌期內(nèi)膜12例，年齡3149歲，平均41歲。兩組患者無其他內(nèi)分泌疾病和內(nèi)外科疾病，術(shù)前3個月未用過甾體類激素治療。 1.

5、2 化學(xué)試劑 vegf（濃縮型）為鼠抗人單克隆抗體，編號為sc-7269，美國santa cruz公司的產(chǎn)品（購自北京中山生物技術(shù)有限公司）。 1.3 實驗方法 采用鏈霉素過氧化物酶法（sp法）處理標(biāo)本。用已知的陽性切片作陽性對照，pbs 代替一抗作陰性對照。 1.4 免疫組化結(jié)果判斷 vegf 主要定位于上皮細胞、毛細血管內(nèi)皮細胞的胞漿中，vegf蛋白染色陽性表達為棕黃色，主要存在于細胞漿，胞膜和胞漿同時著色亦為陽性。在高倍鏡（400）下對每張切片隨機選擇5個視野，計數(shù)200個細胞/視野，共計1 000個細胞，以陽性細胞數(shù)目的百分比，結(jié)合著色強度進行半定量評分。根據(jù)陽性細胞百分率及顯色深淺分

6、級：（1）陽性細胞百分率：無細胞顯色或陽性細胞百分?jǐn)?shù)5%為0；5%35%細胞顯色為1；36%65%細胞顯色為2；66%細胞顯色為3。（2）顯色深淺:不顯色或顯色不清為0；淺黃色為1；棕黃色為2；深褐色為3。將二者評分相加除以2，作為該切片的最終評分，將0、0.51、1.52、2.53分分別定為陰性（-）、弱陽性（+）、陽性（+）、強陽性（+） 1。 1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用spss 11.0軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料采用2 檢驗；采用spearman 軟件做等級相關(guān)性分析。p0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，p0.01為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。 2 結(jié)果 2.1 異位內(nèi)膜組織與

7、正常內(nèi)膜組織中vegf的表達 免疫組化研究表明，vegf蛋白陽性表達在子宮腺肌癥患者的異位、在位內(nèi)膜以及正常對照內(nèi)膜的腺上皮細胞、間質(zhì)細胞和血管內(nèi)皮細胞的胞漿內(nèi)，在上皮細胞的表達強于間質(zhì)細胞。試驗組在位內(nèi)膜vegf的陽性表達率為83.3%，異位內(nèi)膜陽性表達率為63.3%，均顯著高于正常內(nèi)膜組vegf的陽性表達率23.1%（p0.05）；在位內(nèi)膜中vegf的陽性表達明顯高于同組異位內(nèi)膜（p0.05）；子宮腺肌癥在位內(nèi)膜陽性表達率分泌期為93.3%，較增殖期73.3%高（p0.05）。子宮肌腺癥的異位組織對卵巢激素不敏感，大部分均為增殖期改變，故不分期。見表2。表2 血管內(nèi)皮生長因子的表達與月經(jīng)周

8、期的關(guān)系 子宮腺肌癥多發(fā)生于3050歲的經(jīng)產(chǎn)婦，約有15%患者合并子宮內(nèi)膜異位癥。近年，子宮腺肌癥的發(fā)病有上升和年輕化的趨勢，其確切發(fā)病機制至今尚不清楚。我們通過檢測正常子宮內(nèi)膜與子宮腺肌癥異位與在位內(nèi)膜組織中血管內(nèi)皮生長因子（vegf）的表達并進行統(tǒng)計學(xué)分析，探討vegf在子宮腺肌癥發(fā)生發(fā)展中的作用?！緟⒖嘉墨I】2 guidi aj，abu jawdeh g，tognazzi k，et al.expression of vascular permeability factor（vascular endothelial growth factor）and its endometrial carcinoma.cancer，1996，78：454-460. 1 pepper ms，ferrara n，orci l，et al.potent synergism between vascular endothelial gro