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1、醫(yī)院環(huán)境中的細(xì)菌L型研究 作者:莫浩聯(lián) 張世英 黃慈林 司徒潮滿 范蘇蕓【關(guān)鍵詞】 細(xì)菌L型【摘要】 目的 由于抗生素及消毒因子的作用,致使許多細(xì)菌細(xì)胞壁受到破壞轉(zhuǎn)化為細(xì)菌L型,增加了醫(yī)院感染的隱患。本文通過監(jiān)測醫(yī)院環(huán)境中L型菌污染情況,探討醫(yī)院環(huán)境中L型菌監(jiān)測的必要性。 方法 對醫(yī)院環(huán)境消毒前后細(xì)菌原型和L型進行監(jiān)測和對醫(yī)院“客觀”環(huán)境進行模擬消毒試驗,誘導(dǎo)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的L型菌轉(zhuǎn)變情況。 結(jié)果 對于醫(yī)院環(huán)境消毒前后不同監(jiān)測對象的細(xì)菌污染情況,除使用中的酒精外,增加監(jiān)測細(xì)菌L型
2、對細(xì)菌原型菌落總數(shù)合格率沒有影響;而在消毒污物“較多”和吸水性較強的環(huán)境時,則較易形成細(xì)菌L型。 結(jié)論 就醫(yī)院環(huán)境細(xì)菌L型監(jiān)測而言,除使用中的酒精需額外進行細(xì)菌L型監(jiān)測外,其他則必要性不大。 關(guān)鍵詞 醫(yī)院環(huán)境 細(xì)菌L型 消毒劑 The research of the bacteria L-form in the hospital 【Abstract】 Obj
3、ective As a result of the use of antibiotics and disinfection factor,many bacteria lost its cell wall and change into L-form.In the case,it increases the risk of nosocomial infections.By monitoring the L-form contamination status of hospital environment,we should know the necessity of monitoring to
4、the L-form.Methods We monitored the antetype-bacteria and the L-form in the disinfected and no-disinfected enviroment,and had many simulative disinfection tests in the“impersonal”environment to discover the situation of the antetype-bacteria of Escherichia coli,Staph aureus and hay bacillus transfer
5、ing into the L-form.Results We monitored the bacteria of the different objects in the disinfected and no-disinfected enviroment and found the additional L-form monitoring to the objects did not have the effect on the eligible rate of total number volume of antetype except of the using alcohol.L-form
6、 is easier induced when we disinfects the bibulous enviroments which have much infecants.Conclusion As for the L-form monitoring in the hospital,we should have a additional monitoring to L-form in the using alcohol but the others is not necessary. Key words hospital enviromen
7、t L-form disinfectant 細(xì)菌L型廣泛分布于自然界,過去一般認(rèn)為有致病性的細(xì)菌變?yōu)長型菌后即不致病,目前大量資料證明L型菌的形成主要與長期大量應(yīng)用抗生素有關(guān),且仍具有致病性 1 。大量的文獻顯示:迄今為止,幾乎所有的細(xì)菌、螺旋體和真菌中都發(fā)現(xiàn)L型的存在 2 。有人指出:在有條件的單位,應(yīng)逐步開展細(xì)菌L型的檢測以防病原菌的漏檢 3 ;亦有人指出過高估計了細(xì)菌L型在臨床感染中所占病原菌的比例及其重要性 3 ,因此為了解醫(yī)院環(huán)境中L型菌的污染情況,增強對醫(yī)院“客觀”環(huán)境的消毒和某些消毒因子的進一步認(rèn)識,提高消毒
8、質(zhì)量,為CDC指導(dǎo)下級醫(yī)院消毒監(jiān)測提供依據(jù),我們對醫(yī)院環(huán)境消毒前后細(xì)菌原型和L型進行監(jiān)測并對醫(yī)院“客觀”環(huán)境進行模擬消毒實驗,通過觀察細(xì)菌L型的形成情況以了解L型菌與消毒因子的關(guān)系及存在情況。現(xiàn)將結(jié)果報告如下。 1 材料與方法 1.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株 大腸埃希菌(ATCC25922),金黃色葡萄球菌(ATCC25923),枯草桿菌(ATCC9372),由中國藥品生物制品檢定所提供。1.2 培養(yǎng)基 1.2.1 普通營養(yǎng)瓊脂 北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司提供,并按其使用要求配制備用。 1.
9、2.2 細(xì)菌L型分離培養(yǎng)基 由中國腹瀉病控制上海試劑供應(yīng)研究中心提供,并按其使用要求配制備用。 1.2.3 監(jiān)測用的細(xì)菌原型無菌洗脫液和相應(yīng)消毒液中和劑 按衛(wèi)生部頒發(fā)的消毒技術(shù)規(guī)范 4 要求進行配制使用,監(jiān)測用的細(xì)菌L型無菌洗脫液(僅限于物體表面和醫(yī)護人員手監(jiān)測)配制:按細(xì)菌L型培養(yǎng)滲透壓的要求,在細(xì)菌原型洗脫液的基礎(chǔ)上加入一定量的鹽分。 1.2.4 細(xì)胞壁鞣酸染色液和細(xì)菌L型菌落染色液 5 按要求配制使用。 1.3 菌懸液的制備 把大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草桿菌增菌后
10、,把新鮮增菌液分別稀釋成含菌量為5×10 5 5×10 6 (按GB15981-1995消毒劑定量消毒試驗要求操作) 6 。 1.4 實驗方法 1.4.1 細(xì)菌L型的培養(yǎng)及鑒定 把細(xì)菌L型培養(yǎng)平皿置于5%10%CO 2 培養(yǎng)箱中,(36±1)培養(yǎng)37天 5 ,然后用低倍鏡觀察菌落特征,并進行細(xì)胞壁染色和菌落染色確認(rèn)。 1.4.2 對空氣、物體表面、醫(yī)護人員手進行消毒前后含菌情況監(jiān)測,使用中消毒液(物品)殘存菌監(jiān)測 消毒前監(jiān)測由我中心人員在沒有通知醫(yī)院(區(qū)級以上醫(yī)院)的前提下進行突擊抽檢,消毒后監(jiān)測則由我中心人員通知醫(yī)院消毒完成的前提下進行抽檢;采樣時在“同一地方”采雙份樣品,一份置細(xì)菌原型無菌洗脫液,一份置細(xì)菌L型無菌洗脫液進行檢測,細(xì)菌原型的檢測操作則按消毒技術(shù)規(guī)范 4 進行;細(xì)菌L型的檢測操作除用細(xì)菌L型分離培養(yǎng)基代替普通營養(yǎng)瓊脂外,其他大部分操作同細(xì)菌原型,平板傾注后按1.4.1進行培養(yǎng)鑒定。 1.4.3 模擬“客觀”環(huán)境進行消毒試驗,觀察細(xì)菌L型的形成情況 選擇常用
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