動(dòng)物解剖生理實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡的使用、組織切片的顯微觀(guān)察實(shí)驗(yàn)二、犬骨骼的觀(guān)察、骨骼辨認(rèn)測(cè)試實(shí)驗(yàn)三、血液的凝固實(shí)驗(yàn)四、紅細(xì)胞的脆性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)五、蛙心活動(dòng)觀(guān)察實(shí)驗(yàn)六、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)七、反射弧分析及脊髓反射活動(dòng)觀(guān)察實(shí)驗(yàn)八、胃腸運(yùn)動(dòng)觀(guān)察和小腸吸收觀(guān)察 實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造、使用和保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私怙@微鏡的基本構(gòu)造，掌握顯微鏡的使用方法和保養(yǎng)方法。材料設(shè)備顯微鏡、組織切片、擦鏡紙等。方法步驟（一）機(jī)械部分1、鏡筒2、物鏡轉(zhuǎn)換器3、鏡臂4、調(diào)焦器5、載物臺(tái)6、鏡柱7、鏡座（二）光學(xué)系統(tǒng)部分光鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡、目鏡和照明裝置（反光鏡、聚光器和光圈等）。1、 目鏡：常見(jiàn)的有5X、10X和15X （X表示放大倍數(shù)）

2、的目鏡，可根據(jù)不同的需要選擇使用， 最常使用的是10X目鏡。2、 物鏡：常用物鏡的放大倍數(shù)有10 X、40 X和100X等幾種。一般將 8X或10X的物鏡稱(chēng)為低倍鏡（而將5 X以下的叫做放大鏡）；將40 X或45 X的稱(chēng)為1高倍鏡；將90 X或100 X的稱(chēng)為油鏡（這種鏡頭在使用時(shí)需浸在鏡油中）圖 1-3 物鏡的性能參數(shù)及工作距離C 線(xiàn)為蓋玻片的的上表面， 10 物鏡的工作距離為7.63mm； 40 物鏡的工作距離為 0.198mm；10/0.25 、40/0.65 、100/1.25 表示鏡頭的放大倍數(shù)和數(shù)字孔徑。 160/0.17 表示鏡筒長(zhǎng)度為 160mm， 蓋玻片厚度為 0.17mm。

3、3、聚光器：調(diào)節(jié)光線(xiàn)的強(qiáng)弱，升高聚光器可使光線(xiàn)增強(qiáng)，反之則光線(xiàn)變?nèi)酢?光圈能控制進(jìn)入聚光器的光束大小的可變光闌。 以調(diào)節(jié)光線(xiàn)的強(qiáng)弱。 在光圈的下方常裝有濾光片 框，可放置不同顏色的濾光片。4、反光鏡：反光鏡有兩個(gè)面，一面為平面鏡，另一面為凹面鏡，凹面鏡有聚光作用，適于較弱 光和散射光下使用，光線(xiàn)較強(qiáng)時(shí)則選用平面鏡。二、光學(xué)顯微鏡的使用方法（）準(zhǔn)備 將顯微鏡平穩(wěn)地放在身前的實(shí)驗(yàn)桌上，略偏左，使鏡臂對(duì)著身體，鏡筒向前。（二）對(duì)光 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器， 使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔， 轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器， 使低倍鏡前端距載物臺(tái)約 1-2 厘米的距離。 將光圈放大；讓左眼朝目鏡里注視，同時(shí)用手將反光鏡轉(zhuǎn)向光源；調(diào)節(jié)反光鏡，直

4、至從目鏡里看到一個(gè)白色明亮的圓形視野。（三）低倍鏡觀(guān)察 將玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上，使待檢查部分位于通光孔中心，用彈簧夾片壓住載玻片兩端。 兩眼從側(cè)面注視，將物鏡降至距標(biāo)本約0.5厘米時(shí)停止。 用左眼朝目鏡里觀(guān)察，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，緩慢上升鏡筒，直到視野中岀現(xiàn)物象，再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)。（四）高倍鏡觀(guān)察 先將低倍鏡下找到所需觀(guān)察的物象，把要進(jìn)一步放大的部位移到視野正中央。 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡到位。調(diào)節(jié)反光鏡和光圈，使光照明亮，再微微調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)器，直到物 象清晰。（五）顯微鏡復(fù)原用擦鏡紙揩凈目鏡和物鏡，用清潔紗布揩凈鏡體。再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，把兩個(gè)物鏡偏到兩旁，并將鏡筒下降，然后將顯微鏡平穩(wěn)地放入鏡箱內(nèi)保存

5、。實(shí)驗(yàn)二 動(dòng)物主要組織的顯微鏡識(shí)別 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握單層扁平上皮、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨骼肌、平滑肌、神經(jīng)元的 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 材料設(shè)備 顯微鏡、單層扁平上皮、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨骼肌、平滑肌、神經(jīng) 組織切片及相關(guān)的圖。 方法步驟 1、取鏡與放置 移動(dòng)顯微鏡時(shí)，要一手拿鏡臂，一手托鏡座，將顯微鏡放置在前方桌面上。2、打開(kāi)光源，上升聚光鏡，開(kāi)大孔徑光闌。3、觀(guān)察 將被檢標(biāo)本置于載物臺(tái)上，用壓片夾夾住 , 旋轉(zhuǎn)最低倍數(shù)物鏡觀(guān)察。 調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋，使載物臺(tái)緩緩上升，直至物鏡鏡頭接近標(biāo)本。這時(shí)，一邊使用目鏡觀(guān)察，一邊 調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋使載物臺(tái)下降，直至視野中看到物

6、像為止。移動(dòng)載片位置， 使物象處于視野的中心， 此時(shí)再調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋以增加物象的清晰度， 可以調(diào)節(jié) 聚光鏡和孔徑光闌，使光線(xiàn)強(qiáng)弱適中，以便于觀(guān)察。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，換用高倍鏡頭。用細(xì)調(diào)焦螺旋調(diào)節(jié)，換用高倍鏡后， 可調(diào)節(jié)聚光鏡和孔徑光闌 以增加亮度。觀(guān)察更細(xì)微結(jié)構(gòu)必需使用油鏡時(shí)， 則在制片上滴一滴香柏油。 油鏡使用完后， 要及時(shí)地用蘸有乙 醚的擦鏡紙把油鏡鏡頭擦拭干凈。4. 收顯微鏡 關(guān)閉光源；下降聚光鏡；關(guān)閉孔徑光闌；轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，使之處于最低倍數(shù)物鏡下。 顯微鏡保持清潔。顯微鏡的光學(xué)部分只能用專(zhuān)門(mén)的擦鏡紙擦拭。按實(shí)驗(yàn)室的要求，做好顯微鏡的使用記錄等。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1復(fù)層上皮組織 2平滑肌3.

7、神經(jīng)組織4. 心肌切片5. 硬骨組織6. 軟骨組織實(shí)驗(yàn)三 犬全身主要骨、關(guān)節(jié)、骨性標(biāo)志的識(shí)別 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?在犬骨骼標(biāo)本上識(shí)別各部位骨骼及骨性標(biāo)志。 材料設(shè)備 犬骨骼標(biāo)本。 方法步驟 1 脊柱骨的組成：頸椎、胸椎、腰椎、薦椎、尾椎的形態(tài)與連結(jié)。2 胸廓的組成：胸椎、肋骨和胸骨。3 骨盆腔構(gòu)造：背側(cè)薦骨、側(cè)面髖骨、后側(cè)坐骨、腹側(cè)恥骨組成。4 四肢骨組成及分布：骨骼名稱(chēng)、形態(tài)、關(guān)節(jié)名稱(chēng)、關(guān)節(jié)角度。5 骨性標(biāo)志：肩胛岡、大結(jié)節(jié)、髖結(jié)節(jié)、大轉(zhuǎn)子、坐骨結(jié)節(jié)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 繪制犬全身主要骨、關(guān)節(jié)和骨性標(biāo)志的圖示。 技能考核 在標(biāo)本和活體上識(shí)別主要骨、關(guān)節(jié)及骨性標(biāo)志。*骨骼辨認(rèn)測(cè)試實(shí)驗(yàn)三 血液凝固 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?以血

8、液凝固時(shí)間作為指標(biāo)，了解對(duì)血液凝固影響的因素，加深對(duì)生理止血過(guò)程的理解。 實(shí)驗(yàn)原理 血液凝固是一個(gè)酶的有限水解激活過(guò)程，可分為三個(gè)環(huán)節(jié)：（1）凝血酶原激活物的形成； （ 2）凝血酶原激活為凝血酶； （ 3）纖維蛋白的形成。在此過(guò)程中有多種凝血因子和Ca 離子的參與。根據(jù)凝血過(guò)程起動(dòng)時(shí)激活因子來(lái)源不同，可將血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。 內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中， 外源性激活途徑是指受損的組織中 的組織因子進(jìn)入血管后，與血管內(nèi)的凝血因子共同作用而啟動(dòng)的激活過(guò)程。 實(shí)驗(yàn)藥品和器材 生理鹽水，液狀石蠟、草酸鹽、檸檬酸鹽、肝素（ 8 U/ml ）。注射器，試管

9、 6 支，小燒杯 2 個(gè)， 試管架，竹簽 1 束 （或細(xì)試管刷 ），秒表。 實(shí)驗(yàn)方法與步驟 1. 采血（動(dòng)物不限） 。2. 準(zhǔn)備試管。試管 1不加任何處理（對(duì)照管）試管 2用液狀石蠟潤(rùn)滑整個(gè)試管內(nèi)表面試管 3放少許脫脂棉試管4加草酸鉀12 ml試管5加檸檬酸鹽12 ml3. 每管加入血液 1-2 ml 。將多余的血盛于小燒杯中，并不斷用竹簽攪動(dòng)直至纖維蛋白形成。4. 記錄凝血時(shí)間每個(gè)試管加血1-2 ml后，即刻開(kāi)始計(jì)時(shí)，每隔壁 15 s傾斜一次，觀(guān)察血液是否凝固，至血液成為凝膠狀不再流動(dòng)為止，記錄所經(jīng)歷的時(shí)間。4、5號(hào)試管加入血液后，用拇指蓋住試管口將試管顛倒兩次，使血液與藥物混合。5. 如果

10、加草酸鉀和檸檬酸鹽的試管不出現(xiàn)血凝,可再向兩管內(nèi)分別加入 60.025 mol?L-1的CaCI溶液23滴，觀(guān)察血液是否發(fā)生凝固 ？ 2注意事項(xiàng)1. 采血的過(guò)程盡量要快，以減少計(jì)時(shí)的誤差。對(duì)比實(shí)驗(yàn)的采血時(shí)間要緊接著進(jìn)行。2. 判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要力求一致。一般以?xún)A斜試管達(dá) 45 度時(shí)，試管內(nèi)血液不見(jiàn)流動(dòng)為準(zhǔn)。3. 每支試管口徑大小及采血量要相對(duì)一致，不可相差太大。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 將實(shí)驗(yàn)結(jié)果及各種條件下的凝血時(shí)間，并進(jìn)行比較、分析解釋產(chǎn)生差異的原因。 思考題 1 .血液凝固的機(jī)制及影響血凝的外界因素？2. 為什么有幾管不凝？為什么有幾管比對(duì)照組管凝血時(shí)間長(zhǎng)？為什么有幾管比對(duì)照管凝血時(shí) 間短？實(shí)驗(yàn)四 紅細(xì)

11、胞脆性的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法， 理解細(xì)胞外液滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。 實(shí)驗(yàn)原理 正常紅細(xì)懸浮于等滲的血漿中，若置于高滲溶液內(nèi)，則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮；反之，置于低滲溶液內(nèi)，則水進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼續(xù)下降，紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂，釋放血紅蛋白，稱(chēng)之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱(chēng)為紅細(xì)胞 的滲透脆性。 紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液的抵抗力越大， 紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生溶血， 即紅 細(xì)胞滲透脆性越小。 將血液滴入不同的低滲溶液中， 可檢查紅細(xì)胞膜對(duì)于低滲溶液抵抗力的大小。 開(kāi)始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲溶液濃度， 為該血液

12、紅細(xì)胞的最小抵抗力； 出現(xiàn)完全溶血時(shí)的低滲溶液 濃度，則為該血液紅細(xì)胞的最大抵抗力。生理學(xué)上將與血漿滲透壓相等的溶液稱(chēng)為等滲溶液；而將能維持紅細(xì)胞正常形態(tài)、 大小和懸浮于其中的溶液稱(chēng)為等張溶液。等滲溶液不一定是等張溶液（如1.99%的尿素溶液），但等張溶液一定是等滲溶液。實(shí)驗(yàn)藥品1%肝素，1%氯化鈉溶液，2%氯化鈉溶液，蒸餾水。儀器與器材10 ml小試管，試管架，滴管， 1 ml移液管，2 ml移液管。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 溶液配制：取11個(gè)小試管，配制岀 11種不同濃度的氯化鈉低滲溶液。 不同濃度的NaCL溶液配制1 2 3 4 試管號(hào) 試液 1%NaCl/ml 1.21.1 0.8 0.9

13、/ml 蒸餾水 0.55 0.6 NaCl 濃 度1.4 1.30.6 0.7 0.70.650.50.42.制備抗凝血：不同動(dòng)物采血方法各有所異，但多采用末梢血，將血滴在有1%肝素（或檸檬酸鹽）的表面皿上，混勻（1%肝素0.1 ml可抗10 ml血）。83. 加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，在各試管中各加一滴，輕輕搖勻，靜置0.51 ho4. 觀(guān)察結(jié)果：根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同，判斷紅細(xì)胞脆性。 未發(fā)生溶血的試管：液體下層為大量紅細(xì)胞沉淀，上層為無(wú)色透明，表明無(wú)紅細(xì)胞破裂。 部分紅細(xì)胞溶血的試管：液體下層為紅細(xì)胞沉淀，上層岀現(xiàn)透明淡紅（淡紅棕）色，表明部 分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂，稱(chēng)為不完全溶血

14、。 紅細(xì)胞全部溶血的試管：液體完全變成透明紅色，管底無(wú)紅細(xì)胞沉淀，表明紅細(xì)胞完全破裂， 稱(chēng)為完全溶血。實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞的最小滲透抵抗力和最大滲透抵抗力。將全班的結(jié)果加以統(tǒng)計(jì)，并用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示。討論如何通過(guò)滲透脆性特征判斷機(jī)體的健康狀況。注意事項(xiàng)小試管要干燥，加抗凝血的量要一致，只加一滴?；靹驎r(shí)，輕輕傾倒12次，減少機(jī)械震動(dòng)，避免人為溶血?？鼓齽┳詈脼楦嗡?，其他抗凝劑可改變?nèi)芤旱臐B透性。配制不同濃度的 NaCI溶液時(shí)應(yīng)力求準(zhǔn)確、無(wú)誤。NaCI溶液的濃度梯度可根據(jù)動(dòng)物的實(shí)際情況適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。思考題1. 紅細(xì)胞的形態(tài)與生理特征有何關(guān)系？2. 根據(jù)結(jié)果分析血漿晶體滲透壓保持相對(duì)穩(wěn)定的

15、生理學(xué)意義。3. 輸液時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)五蛙心活動(dòng)觀(guān)察實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^(guān)察滴加乙酰膽堿、腎上腺素對(duì)心臟運(yùn)動(dòng)的影響。實(shí)驗(yàn)原理9心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性，但各部分的自動(dòng)節(jié)律性高低不同。兩棲類(lèi)動(dòng)物的心臟起搏點(diǎn)是靜脈竇（哺乳動(dòng)物的是竇房結(jié)）。正常情況下，靜脈竇（竇房結(jié)）的自律性最高，能自動(dòng)產(chǎn) 生節(jié)律性興奮，并依次傳到心房、房室交界區(qū)、心室，引起整個(gè)心臟興奮和收縮，因此靜脈竇（竇房結(jié)）是主導(dǎo)整個(gè)心臟興奮和搏動(dòng)的正常部位，被稱(chēng)為正常起搏點(diǎn)；其他部位的自律組織僅起著興奮傳導(dǎo)作用，故稱(chēng)之為潛在起搏點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)材料蛙或蟾蜍。任氏液、1:10000腎上腺素、1： 10000乙酰膽堿。儀器與器械蛙板，蛙類(lèi)常用手術(shù)器械

16、一套，蛙釘，玻璃分針，秒表，滴管。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備（1）在體蛙心的制備取蛙一只，破壞腦、脊髓后背位固定于蛙板上，左手持鑷子提起胸骨后端的皮膚剪一小口，然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開(kāi)皮膚。把游離的皮膚掀向頭端。再用鑷子,提起胸骨后方的腹肌，剪開(kāi)一小口后，剪刀伸入胸腔（勿傷及心臟和血管），沿皮膚切口剪開(kāi)胸壁，剪斷左右烏喙骨和鎖 骨，使創(chuàng)口呈一倒三角形，充分暴露心臟部位。持眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開(kāi)心包膜，暴露心臟（圖5.4-1 ）。.2. 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目10（1）觀(guān)察心臟的結(jié)構(gòu)參照?qǐng)D5.4-1識(shí)別蛙類(lèi)心臟。自心臟腹面可觀(guān)察到心室、心房，動(dòng)脈球和主動(dòng)脈。用玻璃分針向前翻轉(zhuǎn)蛙心，暴露心臟背面

17、可觀(guān)察到靜脈竇和心房。記錄每分鐘的收縮次數(shù)（次min-1），注意它們的跳動(dòng)次序（2）在靜脈竇上分別滴加1:10000腎上腺素2滴，記錄每分鐘心臟收縮次數(shù)，滴加數(shù)滴任氏液，用吸水紙吸干。（3）再在靜脈竇上滴加 1 : 10000乙酰膽堿2滴，記錄每分鐘心臟收縮次數(shù)，滴加數(shù)滴任氏液， 用吸水紙吸干。實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄并分析各項(xiàng)結(jié)果。思考題1. 正常情況下，兩棲類(lèi)動(dòng)物（或哺乳類(lèi)動(dòng)物）的心臟起搏點(diǎn)是心臟的哪一部分？它為什么能控 制潛在起搏點(diǎn)的活動(dòng)？2. 如何證明兩棲類(lèi)心臟的起搏點(diǎn)是靜脈竇？11實(shí)驗(yàn)六紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)、掌握應(yīng)用稀釋法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞的方法。實(shí)驗(yàn)原理血液中血細(xì)胞數(shù)很多，無(wú)法直接計(jì)數(shù)，需

18、要將血液稀釋到一定倍數(shù)，然后再用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積的稀釋血液中的紅、白細(xì)胞數(shù)量，最后將之換算成每升血液中所含的紅、白細(xì) 胞數(shù)。常用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板是改良式牛鮑爾計(jì)數(shù)板），為優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成。每塊計(jì)數(shù)板由 Neubauer （計(jì)數(shù)池的兩側(cè)各有一個(gè)支持堤，。（圖6.5-1）“H"型凹槽分為兩個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池的1 mmmm寬各3.00，平均分成邊長(zhǎng)為。比計(jì)數(shù)池高岀0.1mni十?dāng)?shù)池的長(zhǎng)、3個(gè)大格中，位于四角的四個(gè)大方格是計(jì)9每個(gè)大格容積為 0.1mm。在個(gè)大格。9個(gè)中方格；位于中央的大方格用16數(shù)白細(xì)胞的區(qū)域，每個(gè)大方格又用單線(xiàn)分為個(gè)中方格是計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和血小個(gè)中方格，其中位于正

19、中及四角的5雙線(xiàn)分成25。圖個(gè)小方格板的區(qū)域，每個(gè)中方格又用單線(xiàn)分為 16（6.5-2） 12動(dòng)物種類(lèi)不限。實(shí)驗(yàn)對(duì)象酒精，乙醚，血細(xì)胞稀釋液。75%酉精，95%實(shí)驗(yàn)藥品 蒸餾水，）， 小試管，微量（血 Neubauer顯微鏡，血細(xì)胞記數(shù)板（改良 儀器器材ml移液管，玻璃棒， 刺血針，干棉球。紅蛋白）采血管，1 ml、5實(shí)驗(yàn)方法和步驟采血與血液的稀釋?zhuān)?.）4 ml20卩l(xiāng)血液，加至有紅細(xì)胞稀釋液（用微量（血紅蛋白）采血管吸倍（白細(xì)這樣使紅細(xì)胞稀釋了 200的試管中，吹打幾次，使稀釋液與血液混勻。倍）。胞稀釋20充池（布血）使蓋玻片平放在然后緩慢放下，將蓋玻片的一邊與計(jì)數(shù)池的縱線(xiàn)末端接觸，用微量

20、采血管或蘸有紅細(xì)，計(jì)數(shù)室兩側(cè)的隆起上（這樣可趕走蓋玻片下的空氣）靠毛細(xì)管作用將紅細(xì)胞懸浮液充入計(jì)胞懸浮液的玻璃棒靠近蓋玻片的前方邊緣，分鐘，待細(xì)胞下沉后顯微鏡下計(jì)數(shù)。若計(jì)數(shù)池未被布滿(mǎn)5數(shù)池。室溫中平放 3 或過(guò)多以致使蓋玻片浮動(dòng)，或弄到蓋玻片外面都需重新充池（布血）。計(jì)數(shù)：2.或四5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)。于高倍鏡下計(jì)數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的如果細(xì)胞壓所示。周四個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。計(jì)數(shù)視野的移動(dòng)路線(xiàn)如圖6.5-3如果各中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)相差數(shù)左不數(shù)右原則進(jìn)行。邊線(xiàn)，則按數(shù)上不數(shù)下，1320個(gè)以上（魚(yú)類(lèi)紅細(xì)胞相對(duì)較少不應(yīng)多于10個(gè)），四周各大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)相差8個(gè)以上，則說(shuō)明血細(xì)胞分布不均勻

21、，需振蕩稀釋液，重新充池（布血）。3. 計(jì)算：.000 N 101=N 200 10 25 5-1=紅細(xì)胞數(shù)L- 個(gè)中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞數(shù)；：表示5 N-1 :將五個(gè)中方格紅細(xì)胞數(shù)換算為一個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)；25 5 l血液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)。10：將一個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)換算為1卩200 :為血液稀釋倍數(shù)。注意事項(xiàng),以免凝血。1、取血操作應(yīng)迅速 吸血和稀釋液的體積一定要準(zhǔn)確。，采血管中不得有氣泡，吸取血液時(shí)2、計(jì)數(shù)時(shí)，顯微鏡要放穩(wěn)，載物臺(tái)應(yīng)置水平位，不得傾斜。一般在暗 光下計(jì)3數(shù)的效果較好。漂洗和蒸餾水漂洗，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板只能用清水浸泡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板洗 滌4、然后以濾紙吸干。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用平均值并對(duì)全班的結(jié)

22、果加以統(tǒng)計(jì)，報(bào)告該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的紅細(xì)胞數(shù)和白細(xì)胞數(shù)。士標(biāo)準(zhǔn)差表示。思考題1.稀釋液裝入計(jì)數(shù)板后，為什么要靜止一段時(shí)間才開(kāi)始計(jì)數(shù)？2. 顯微鏡載物臺(tái)為什么應(yīng)置于水平位，而不能傾斜？3. 分析影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的可能因素。反射弧分析及脊髓反射活動(dòng)觀(guān)察實(shí)驗(yàn)七 實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)對(duì)脊蛙的屈肌反射的分析，探討反射弧的完整性與反射活動(dòng)的關(guān)系；1.以蛙的屈肌反射為指標(biāo)，觀(guān)察脊髓反射中樞活動(dòng)的某些基本特征，并分析2.它們產(chǎn)生可能的神經(jīng)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理較在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下，機(jī)體對(duì)刺激所產(chǎn)生的適應(yīng)反應(yīng)過(guò)程稱(chēng)為反射。較簡(jiǎn)單的反射只需復(fù)雜的反射需要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)較高級(jí)的部位整合才能完成，僅保留脊髓將動(dòng)物的高位中樞切除， 通過(guò)中樞

23、神經(jīng)系統(tǒng)較低級(jí)的部位就能完成。由于脊髓的動(dòng)物稱(chēng)為脊動(dòng)物。此時(shí)動(dòng)物產(chǎn)生的各種反射活動(dòng)為單純的脊髓反射。便于觀(guān)察和分析反射過(guò)所以反射活動(dòng)比較簡(jiǎn)單, 已失去了高級(jí)中樞的正常調(diào)控，14程的某些特征。反射活動(dòng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧。典型的反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳岀神經(jīng)和效應(yīng)器五個(gè)部分組成。 引起反射的首要條件是反射弧必須保持完整性。反射弧任何一個(gè)環(huán)節(jié)的解剖結(jié)構(gòu)或生理完整性一旦受到破壞，反射活動(dòng)就無(wú)法實(shí)現(xiàn)。完成一個(gè)反射所需要的時(shí)間稱(chēng)為反射時(shí)。 反射時(shí)除與刺激強(qiáng)度有關(guān)外， 反射時(shí)的長(zhǎng)短與反射弧在 中樞交換神經(jīng)元的多少及有無(wú)中樞抑制存在有關(guān)。 由于中間神經(jīng)元連結(jié)的方式不同， 反射活動(dòng)的 范圍和持續(xù)時(shí)

24、間，反射形成難易程度都不一樣。 實(shí)驗(yàn)藥品與器材 硫酸溶液（ 0.1%、0.3% 、0.5%、 1%）、1%可卡因或普魯卡因。蛙類(lèi)手術(shù)器械、鐵支柱、玻 璃平皿、燒杯（500 ml或搪瓷杯）、小濾紙（約 1 cm x 1 cm ）、紗布、秒表。 實(shí)驗(yàn)方法與步騾 1. 標(biāo)本制備取一只蟾蜍， 用粗剪刀由兩側(cè)口裂剪去上方頭顱， 或用探針沿枕骨大孔刺入腦腔， 破壞腦髓， 制成脊蟾蜍。 將動(dòng)物俯臥位固定在蛙板上， 于右側(cè)大腿背部縱行剪開(kāi)皮膚， 在股二頭肌和半膜肌 之間的溝內(nèi)找到坐骨神經(jīng)干，在神經(jīng)干下穿一條細(xì)線(xiàn)備用。將脊蟾蜍懸掛在鐵支柱上。2. 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目（ 1 ）脊髓反射的基本特征： 騷扒反射 將浸有 1%硫

25、酸溶液的小濾紙片貼在蟾蜍的下腹部，可見(jiàn)四肢向此處騷扒。之 后將蟾蜍浸入盛有清水的大燒杯中，洗掉硫酸濾紙片。 屈肌反射和反射時(shí)的測(cè)定：在平皿內(nèi)盛適量的 趾，浸入硫酸溶液中，同時(shí)按動(dòng)秒表開(kāi)始記錄時(shí)間， 該足趾浸入大燒杯水中浸洗數(shù)次， 然后用紗布擦干。 所經(jīng)歷的時(shí)間，稱(chēng)為反射時(shí)。用上述方法重復(fù)三次，0.1%硫酸溶液，將蟾蜍一側(cè)后肢的一個(gè)腳 當(dāng)屈肌反射一出現(xiàn)立刻停止記時(shí)， 并立即將 此時(shí)秒表所示時(shí)間為從刺激開(kāi)始到反射出現(xiàn) 注意每次浸入趾尖的深度要一致， 相鄰兩次實(shí)驗(yàn)間隔至少要 23 s。三次所測(cè)時(shí)間的平均值即為此反射的反射時(shí)。再用不同的硫酸濃度測(cè)定 反射的反射時(shí)。2）反射弧的分析分別將左右后肢趾尖浸入

26、盛有1%硫酸的平皿內(nèi)（深入的范圍一致）,雙后 15肢是否都有反應(yīng) ? 實(shí)驗(yàn)完后 ,將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸， 用紗布擦干皮膚。 在左后肢趾關(guān)節(jié)上作一個(gè)環(huán)形皮膚切口， 將切口以下的皮膚全部剝除 （趾尖皮膚一定要?jiǎng)兂蓛簦?，再?1%硫酸溶液浸泡該趾尖，觀(guān)察該側(cè)后肢的反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)完后,將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸，用紗布擦干皮膚。 將浸有 1%硫酸溶液的小濾紙片貼在蛙的左后肢的皮膚上。 觀(guān)察后肢有何反應(yīng) ?待出現(xiàn)反應(yīng) 后，將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸，用紗布擦干皮膚。 提起穿在右側(cè)坐骨神經(jīng)下的細(xì)線(xiàn)，剪斷坐骨神經(jīng)，刺激右后肢趾，觀(guān)察有無(wú)反應(yīng)？ 以探針搗毀蟾

27、蜍的脊髓后再重復(fù)上步驟,觀(guān)察有何反應(yīng)。 注意事項(xiàng) 1. 制備脊蛙時(shí)，顱腦離斷的部位要適當(dāng)，太高因保留部分腦組織而可能出現(xiàn)自主活動(dòng)，太低 又可能影響反射的產(chǎn)生。2. 用硫酸溶液或浸有硫酸的紙片處理蛙的皮膚后，應(yīng)迅速用自來(lái)水清洗，以清除皮膚上殘存 的硫酸，并用紗布擦干，以保護(hù)皮膚并防止沖淡硫酸溶液。3. 浸入硫酸溶液部位應(yīng)限于一個(gè)趾尖，每次浸泡范圍應(yīng)一致,切勿浸入太多。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1. 描述各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，探討形成的機(jī)制。2. 說(shuō)出有反射活動(dòng)時(shí)的反射弧的組成。 思考題 1. 右側(cè)坐骨神經(jīng)被剪斷后，動(dòng)物的反射活動(dòng)發(fā)生了什么變化？這是損傷了反射弧的哪一部分？2. 剝?nèi)ブ宏P(guān)節(jié)以下皮膚后，不再出現(xiàn)原有的反射

28、活動(dòng)，為什么？,反射時(shí)有可能增加 可能出現(xiàn)的問(wèn)題與解釋 在測(cè)反射時(shí)時(shí)，有可能出現(xiàn) H2SO4 的濃度低，反而反射時(shí)短。 （1）隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，標(biāo)本產(chǎn)生了適應(yīng)性，反應(yīng)靈敏性下降，因此濃度增加（2）標(biāo)本本身興奮性就很低。16實(shí)驗(yàn)八 胃腸運(yùn)動(dòng)和小腸吸收觀(guān)察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?觀(guān)察胃腸道的各種形式的運(yùn)動(dòng)， 以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)。 了解小腸吸收與內(nèi)容 物滲透壓間的關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)原理 消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性，可以形成多種形式的運(yùn)動(dòng)，主要有：緊張性收縮、蠕動(dòng)、分節(jié) 運(yùn)動(dòng)及擺動(dòng)。 在整體情況下， 消化道平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。 阿托品具有松弛內(nèi)臟 平滑肌的作用， 可用于治療解除平滑肌痙攣。 兔的胃腸運(yùn)動(dòng)活躍且運(yùn)動(dòng)形式典型， 是觀(guān)察胃腸運(yùn) 動(dòng)的好材料。腸內(nèi)容物的滲透壓為制