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1、 二、抗人球蛋白法配血試驗(yàn) 目的 掌握抗人球法原理、方法 原理 檢查有無IgG抗體 記號(hào)筆、顯微 器材 小試管、滴管、試管架、記號(hào)筆 記號(hào)筆 鏡、離心機(jī)、37水浴箱。 37水浴箱 37水浴箱 試劑 抗人球試劑(多抗)、生理鹽水。 標(biāo)本 靜脈血。 操 作 1.標(biāo)記試管 標(biāo)記試管,標(biāo)明主側(cè)、次側(cè) 標(biāo)記試管 2.加樣 加樣 主側(cè)管:供血者35%懸紅1滴+受血者血清2滴 主側(cè)管 + 次側(cè)管:受血者35%懸紅1滴+供血者血清2滴 次側(cè)管 + 3.離心15秒,觀察是否凝集 離心15 離心15秒 4.混勻,37水浴30min,鹽水洗滌3次(快), 扣干。 5.加抗人球蛋白試劑1滴,混勻,離心15秒。 6.輕
2、搖 輕搖,觀察結(jié)果。 輕搖 注 意 事 項(xiàng) 1.洗滌要迅速,中途不能停,洗徹底。 1.洗滌要迅速,中途不能停,洗徹底。 洗滌要迅速 2.嚴(yán)格把握離心速度和時(shí)間。 嚴(yán)格把握離心速度和時(shí)間 2.嚴(yán)格把握離心速度和時(shí)間。 3.觀察結(jié)果時(shí) 觀察結(jié)果時(shí), 輕搖。 3.觀察結(jié)果時(shí),須輕搖。 4.冷凝集素 臍血有網(wǎng)織紅細(xì)胞、洗滌不充分、 冷凝集素、 4.冷凝集素、臍血有網(wǎng)織紅細(xì)胞、洗滌不充分、抗人球 蛋白血清中含有抗運(yùn)鐵蛋白 可使紅細(xì)胞凝集。 抗運(yùn)鐵蛋白, 蛋白血清中含有抗運(yùn)鐵蛋白,可使紅細(xì)胞凝集。 5.先鹽水觀察, 溶血標(biāo)本棄用 先鹽水觀察 棄用。 5.先鹽水觀察,有溶血標(biāo)本棄用。 6.加陽(yáng)性 陰性對(duì)照。主側(cè)次側(cè)交叉結(jié)束后, 加陽(yáng)性、 6.加陽(yáng)性、陰性對(duì)照。主側(cè)次側(cè)交叉結(jié)束后,加1滴陽(yáng)性 對(duì)照細(xì)胞,離心后應(yīng)有紅細(xì)胞凝集,若不凝需重做。 對(duì)照細(xì)胞,離心后應(yīng)有紅細(xì)胞凝集,若不凝需重做。 7.抗人球試驗(yàn)費(fèi)時(shí) 繁瑣, 靈敏度好、特異性強(qiáng)。 抗人球試驗(yàn)費(fèi)時(shí)、 7.抗人球試驗(yàn)費(fèi)時(shí)、繁瑣,但靈敏度好、特異性強(qiáng)。 思考題 1、哪些因素可影響抗人球蛋白交叉
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