(生物選修一)菊花組織培養(yǎng)

1、 2.植物組織培養(yǎng)的過(guò)程：植物組織培養(yǎng)的過(guò)程：離體的植離體的植物組織或物組織或細(xì)胞（又細(xì)胞（又叫外植體）叫外植體）愈傷組織愈傷組織胚狀體、胚狀體、 叢芽等叢芽等新個(gè)體新個(gè)體脫分化脫分化再分化再分化生長(zhǎng)生長(zhǎng) 細(xì)胞分化：細(xì)胞分化：形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能穩(wěn)定性穩(wěn)定性。 愈傷組織：愈傷組織：是通過(guò)是通過(guò)細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂形成的，其細(xì)形成的，其細(xì)胞排列胞排列疏松而無(wú)規(guī)則疏松而無(wú)規(guī)則，高度，高度液泡化液泡化的呈的呈無(wú)無(wú)定形定形狀態(tài)的狀態(tài)的薄壁細(xì)胞薄壁細(xì)胞 脫分化脫分化(或者叫去分化或者叫去分化)：由高度分化的植物由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織愈傷組織的過(guò)程的過(guò)程 再分

2、化：再分化：脫分化脫分化產(chǎn)生的產(chǎn)生的愈傷組織愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽根或芽等器官等器官 外植體外植體:鞏固練習(xí)：鞏固練習(xí)：下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示。據(jù)此回答：下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示。據(jù)此回答：（1）表示表示_，它能被，它能被培養(yǎng)成為培養(yǎng)成為的根本原因是的根本原因是_。（2）表示表示_，它與，它與相比分相比分化程度化程度_，全能性，全能性_。脫分化脫分化再分化再分化離體的植物組織或器官離體的植物組織或器官植物細(xì)胞具有全能性植物細(xì)胞具有全能性愈傷組織愈傷組織低低高高(二二)、影響植物組織培養(yǎng)的因素、影響植物組織培養(yǎng)的因素.思考思考一般來(lái)說(shuō)

3、，容易進(jìn)行一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行_繁殖的植物容繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。易進(jìn)行組織培養(yǎng)。思考思考選取生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的原因選取生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的原因?無(wú)性無(wú)性嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化2.營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng) 成分：成分：大量元素大量元素: 如如N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素微量元素: 如如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有機(jī)物有機(jī)物: 如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素，以及蔗糖等。如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素，以及蔗糖等。使用的先后順序使用的先后順序:使用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素

4、胞分裂素有利于細(xì)胞分裂但不分化有利于細(xì)胞分裂但不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂又分化細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用同時(shí)使用分化頻率提高分化頻率提高生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量裂素用量植物細(xì)胞的發(fā)育方向植物細(xì)胞的發(fā)育方向比值高時(shí)比值高時(shí)使根分化、抑芽形成使根分化、抑芽形成比值低時(shí)比值低時(shí)使芽分化、抑根形成使芽分化、抑根形成比值適中時(shí)比值適中時(shí)促進(jìn)愈傷組織的形成促進(jìn)愈傷組織的形成用量的比例用量的比例:（1）MS培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有何作用？培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有何作用？微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必

5、需的無(wú)機(jī)鹽；需的無(wú)機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞的滲透壓；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞的滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿(mǎn)足離體甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿(mǎn)足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。討論：討論：（2）同專(zhuān)題）同專(zhuān)題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生大量無(wú)

6、機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類(lèi)。長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類(lèi)。(3)生長(zhǎng)素比細(xì)胞分裂素比值低時(shí)生長(zhǎng)素比細(xì)胞分裂素比值低時(shí) , 則則 ( ) 。A.有利于根的分化有利于根的分化 , 抑制芽的形成抑制芽的形成 B. 有利于芽的分化有利于芽的分化 , 抑制根的形成抑制根的形成C. 促進(jìn)愈傷組織形成促進(jìn)愈傷組織形成D. 促進(jìn)根和芽的分化促進(jìn)根和芽的分化B 實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作1.制備制備MS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基2.外植體消毒外植體消毒 （70酒精、氯化汞、無(wú)菌水、無(wú)菌吸水紙）酒精、氯化汞、無(wú)菌水、無(wú)菌吸水紙）3.接種接種（步驟）（步驟）4.培養(yǎng)培養(yǎng)（條件）（條件）5.移

7、栽移栽6.栽培栽培思考思考外植體在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)被污染，你認(rèn)為造成污染的原外植體在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)被污染，你認(rèn)為造成污染的原因有哪些？因有哪些？ 外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。形瓶密封性差等。思考思考在此消毒過(guò)程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？在此消毒過(guò)程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？ 不是。對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，既要考慮到藥劑的消毒效果，不是。對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，既要考慮到藥劑的消毒效果，又要考慮到植物的耐受力。又要考慮到植物的耐受力。結(jié)果分析與評(píng)價(jià)結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 定期觀察生長(zhǎng)狀態(tài)并記錄，如果出現(xiàn)問(wèn)定期觀察生長(zhǎng)狀態(tài)并記錄，如果出現(xiàn)問(wèn)題，及時(shí)分析處理。題，及時(shí)分析處理。（一）選材是否恰當(dāng)：要選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝。（一）選材是否恰當(dāng)：要選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝。（二）無(wú)菌技術(shù)是否過(guò)關(guān)：如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，（二）無(wú)菌技術(shù)是否過(guò)關(guān)：如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，說(shuō)明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒說(shuō)明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問(wèn)題?；蚪臃N等有問(wèn)題。