島津LC20AD液相色譜儀操作規(guī)程

1、島津 LC-20AD 型液相色譜儀操作規(guī)程1目的規(guī)范島津 LC-20AD 型高效液相色譜儀的使用。2范圍適用于島津 LC-20AD 型高效液相色譜儀的使用。3職責(zé)質(zhì)檢員對(duì)本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。4規(guī)程4.1 系統(tǒng)組成：本系統(tǒng)由 2個(gè) LC-20AD 溶劑輸送泵（分主 /A 泵和副 /B 泵）、SIL-20A 自動(dòng)進(jìn) 樣閥、 SPD-20A 紫外 -可見(jiàn)檢測(cè)器、 CTO-20A 柱箱、 LCsolution 色譜數(shù)據(jù)工作站和 IBM 臺(tái) 式電腦等組成 。4.2 準(zhǔn)備4.2.1 準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的 0.45 m 濾膜過(guò)濾，超聲脫氣 20min 。4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注

2、意方向）和定量環(huán)。4.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制），用合適的 0.45 m 濾膜過(guò)濾。4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。4.3 開機(jī)4.3.1 接通電源，依次開啟不間斷電源、 B 泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器、柱溫箱、 A 泵4.3.2 待泵和檢測(cè)器自檢結(jié)束后， 打開打開色譜工作站， 點(diǎn)擊按鈕 “1”，輸入用戶名 :ADMIN 。4.3.3 當(dāng) SPD-20A 發(fā)出蜂鳴聲后，說(shuō)明已建立與計(jì)算機(jī)之間的連接， LC 窗口打開。4.4 參數(shù)設(shè)定4.4.1 設(shè)置新的分析參數(shù)時(shí)，請(qǐng)從通過(guò)鍵盤在 LC 窗口 的“ Instrument Parameters

3、View ” 中輸入?yún)?shù)（即 A、 B 泵的流速，波長(zhǎng)，柱溫；柱在線時(shí)流速一般不超過(guò)1ml/min ）4.4.2 選擇 File >Save Method File As，輸入方法名稱后保存。4.4.3 點(diǎn)擊“ Download ”鍵，將保存好的方法下載4.5 更換流動(dòng)相并排氣泡4.5.1 將 A/B 管路的吸濾器放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相的儲(chǔ)液瓶中；4.5.2 逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng) A/B 泵的排液閥 360 °4.5.3 按 A/B 泵的purge 鍵， pump 指示燈亮， 1min 再次按 A/B 泵的purge 鍵4.5.4 順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng) A/B 泵的排液閥 , 關(guān)閉排液閥4.5.5

4、 如管路中仍有氣泡，則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡4.6 平衡系統(tǒng)4.6.1 更換流動(dòng)相并排氣泡后，在工作站中輸入實(shí)驗(yàn)信息并設(shè)定各項(xiàng)方法參數(shù)4.6.2 等度洗脫方式4.6.2.1 點(diǎn)擊“ Instrument on/off ”按鈕， A 、 B 泵將同時(shí)啟動(dòng)， pump 指示燈亮。用檢驗(yàn)方 法規(guī)定的流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)，一般最少需6倍柱體積的流動(dòng)相。4.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應(yīng)予以排除。4.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動(dòng)應(yīng)不超過(guò)1MPa 。如超過(guò)則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，應(yīng)重新排氣泡。4.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移 <0.01mV/mi

5、n ，噪聲為 <0.001mV 時(shí)，可認(rèn)為 系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。4.6.3 梯度洗脫方式4.6.3.1 以檢驗(yàn)方法規(guī)定的梯度初始條件，按 項(xiàng)下方法平衡系統(tǒng)。4.6.3.2 在進(jìn)樣前運(yùn)行 12 次空白梯度。4.7 進(jìn)樣4.7.1 進(jìn)樣前按軟件中 零點(diǎn)校正 按鈕校正基線零點(diǎn)4.7.2 點(diǎn)擊“ Single start ”按鈕，設(shè)置好保存路徑并輸入試樣位置，系統(tǒng)開始自動(dòng)進(jìn)樣4.7.3 樣品采集完畢后， 點(diǎn)擊“ Stop ”按鈕，接著就會(huì)出現(xiàn)一條消息， 詢問(wèn)您是否 “Abort the current run ”, 單擊 Yes ，當(dāng)前的數(shù)據(jù)采集就會(huì)終止。4.8 清洗系統(tǒng)和關(guān)機(jī)4.8.1 數(shù)據(jù)采集完畢后，關(guān)閉泵，待壓力降為0后，將工作流動(dòng)相換水相，設(shè)定流動(dòng)相比例，沖洗色譜柱4.8.2 清洗柱4.8.2.1 C18柱先用 95%的水以 1ml/min 沖洗 40min 以上，再用 90%的甲醇或乙腈沖洗 20min ，最后用 40% 的水沖洗 10min4.8.2.2 Protein PAK60 柱先用超純水沖洗 90min 以上，再用甲醇或乙腈沖洗 40min4.8.3 清洗完成后，先關(guān)閉泵，待壓力降至為“0”時(shí)，關(guān)閉各組件電源，關(guān)閉計(jì)算機(jī)4.9 填寫使用記錄