海洋弧菌堿性蛋白酶的分離純化及部分性質(zhì)研究

1、維普資訊 維普資訊 期 劉 成 圣 ， ： 洋 弧 菌 堿 性 蛋 白 酶 的 分 離 純 化 及 部 分 性 質(zhì) 研 究 等 海 制 作 用 越 弱 。這 一 點(diǎn)提 示 只 要 適 當(dāng)控 制 酶 濃 度 就 能 彌 補(bǔ) 對(duì) 它 的 抑 制 作 用 。這 一 性 質(zhì) 十 分 有利于該酶 在核酸提取 使用 。 酶 對(duì) 各 種 天 然 蛋 白質(zhì) 的 水 解 作 用 以酪 蛋 白 、 血 清 白 蛋 白 、 胞 色 素 、 菌 酶 、 牛 細(xì) 溶 組 蛋 白 等 天 然 蛋 白 質(zhì) 為 底 物 ， 用 的 硼 砂 一 緩 沖 液 配 成 的溶 液 ， 定 酶 測(cè) 活 力 。 果 表 明 ， 酶 對(duì)

2、酪 蛋 白水 解 作 用 最 強(qiáng) ， 血 清 白 蛋 白 、 胞色 素 、 菌 酶 、 蛋 白次 之 結(jié) 該 牛 細(xì) 溶 組 （ 。說(shuō) 明該 酶是 種 廣 譜 蛋 白酶 。 表 ） 純 酶 制 品 對(duì) 和 酶 的 作 用 將純酶液 與 和 分 別 作 用 ， 過(guò) 通 瓊 脂 糖 凝 膠 電 泳 檢 測(cè) 。 由圖 結(jié) 果 可 知 ， 品 檢 測(cè) 不 出 譜 帶 ， 明 完 全 被 樣 說(shuō) 解 。樣 品 有 清 晰 的 單 一 譜 帶 ， 步 說(shuō) 明該 酶 對(duì) 降 初 沒(méi) 有 降 解 作 用 。樣 品 也有清 晰的 單 一 譜 帶 ， 明純 酶 將 解 ， 使 得 說(shuō) 水 而 不 被 降解 。 所

3、 表 酶 對(duì) 各 種 天 然 蛋 白 質(zhì) 的 水 解 作 用 蛋 白 質(zhì) 底 物 （ ） 相對(duì) 酶 活 （ ） 酪 蛋 白 ； 經(jīng) 保 溫 處 理 過(guò) 的 ； 經(jīng) 純 酶 保 溫 處 理 過(guò) 的 ； 純 酶 和 混 合 物 保 溫處 理過(guò) 的 ； ； ； 牛 血 清 白 蛋 白 細(xì) 胞 色 素 溶 菌 酶 組 蛋 白 注 ： 酪蛋 白的活力 定義 為 將 圖 純酶 制 品對(duì) 和 酶 的 作 用 的 瓊 脂 糖 凝 膠 電 泳 圖 結(jié)論 核酸提 取過(guò) 程 中 ， 加 入 常 等 金 屬 螯 合 劑 用 以螫 合 二 價(jià) 離 子 ， 抑 制 以 酶 的 活 性 ； 入 加 用 以 破 細(xì) 胞 、

4、制 酶 活 性 、 聚 核 蛋 白等 。作 為 種 理 想 的 水 解 蛋 白質(zhì) 的 抑 解 工 具 酶 ， 要 有 耐 堿 、 受 、 的 特 性 。同 時(shí) 對(duì) 無(wú) 降 解 作 用 ， 對(duì) 酶 等 有 水 需 耐 且 解 作 用 。而 以 上 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 表 明 ， 產(chǎn) 堿 性 蛋 白 酶 （ ）在 堿 性 條 件 下 非 常 穩(wěn) 定 。（ ）純 酶 在 一 存 在 下 仍 有 分 解 蛋 白 質(zhì) 的 能 力 。 （ ）酶 活 力 基 本 不 受 的 影 響 。 （ ）純 酶 對(duì) 組 蛋 白也 有 一 定 的 水 解 作 用 。（ ）純 酶 對(duì) 酶 有 降解 作 用 ， 對(duì) 而 沒(méi) 有

5、降 解 作 用 ， 用機(jī) 理 還需 作 進(jìn) 一步研究 。 綜 上 所 述 ， 研 究選 定 的 一 本 產(chǎn) 海 洋 堿 性 蛋 白 酶 具 有 重 要 的研 究 價(jià) 值 ， 希 望 作 為 種 有 新 型 酶 制 劑 應(yīng) 用 于 核 酸 提 取 工 藝 中 ， 主要 理 化 性 質(zhì) 表 明 ， 酶 也 可 以 應(yīng) 用 于 加 酶 洗 滌 劑 中 。 其 該 因此 ， 有 廣 闊 的 實(shí) 際 前 景 。 具 維普資訊 青 島 海 洋 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 焦 參 考 文獻(xiàn) ， ： ， ： ， 著金冬雁 譯分 子克 隆實(shí)驗(yàn) 指 南（ 二版 ） 北京 ：科學(xué) 出版 社 ， 第 ： （ ） （ ） ， ， ： ， ， （ ）： ， ， ： 一 （ ） ， ， ： （ ） ， （ ） ， ： 李智盈 海 洋弧 菌 產(chǎn)生 幾丁 質(zhì)酶 的發(fā)酵 條件 研 究青 島海 洋大 學(xué)學(xué) 報(bào) ， ， （ ） ： （ ： 劉萬(wàn) 順產(chǎn)堿性 蛋 白酶 海洋 弧菌 的篩選 及 其培養(yǎng) 條件 的研 究青 島海洋 大學(xué)學(xué) 報(bào) ， ， ） 張 龍 翔 ， 庭 芳 ， 令 嬡 生 化 實(shí) 驗(yàn) 方 法 和 技 術(shù) （ 二 版 ） 北 京 ： 等 教 育 出 版 社 ， ： 張 李 第 高 ， ， 第 科 張 樹(shù) 政 酶 制 劑 工