實(shí)驗(yàn) - 細(xì)胞膜的滲透性

1、實(shí)驗(yàn)二 細(xì)胞膜的滲透性1何為細(xì)胞膜？2為何不同物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度不同？3何為溶血現(xiàn)象？4你知道有哪些血液抗凝劑？一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饧?xì)胞膜1的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度2二、 實(shí)驗(yàn)原理1、 在等滲溶液中，細(xì)胞對(duì)各種溶質(zhì)的透過性不同。有的溶質(zhì)可以進(jìn)入，有的溶質(zhì)不能滲入。2、 滲入的溶質(zhì)能提高細(xì)胞的滲透壓，促進(jìn)水分子進(jìn)入細(xì)胞，引起溶血現(xiàn)象3。3、 不同的溶質(zhì)滲入到細(xì)胞內(nèi)的速度不同，因此溶血時(shí)間也不同。三、 實(shí)驗(yàn)材料新鮮血液（雞血、豬血、牛血等）四、 實(shí)驗(yàn)器材試管（1.5 cm X 18 cm）、試管架、10 ml移液管、1 ml移液管、200 ml燒杯（2個(gè)）、250ml容量瓶、移液槍、膠頭滴管

2、、菜刀、吸球、電子天平、顯微鏡、蓋玻片、載玻片、秒表五、 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑0.17 M NaCl、 0.17 M NH4Cl、 0.17 M NH4Ac、 0.17 M NaNO3、 0.12 M Na2SO4、 0.12 M 草酸銨、 0.32 M 葡萄糖、 0.32 M 甘油、 0.32 M 乙醇、 0.32 M 丙酮、肝素抗凝劑4六、 實(shí)驗(yàn)步驟1、 制備血液稀釋液（1） 抗凝劑的制備：首先稱取1克肝素鈉粉末，然后加入0.17 M NaCl溶液 10 ml（110的比例），混合均勻，制成肝素抗凝劑。（2） 血液稀釋液的制備：取新鮮血液，按比例（肝素抗凝劑:血液=110）混合均勻，配制成經(jīng)肝素

3、抗凝的血5注意：這一步，動(dòng)作要非常迅速，否則雞血會(huì)凝固?；蛘呦劝芽鼓齽┘尤氲綗校偌尤胄迈r的雞血，邊加邊震蕩即可。6為什么新鮮的雞血會(huì)凝固？7為什么這一步要使用0.17 M 的 NaCl 溶液？液5 6。（3） 按比例（經(jīng)肝素抗凝的血液0. 17 M NaCl 溶液=110）混合均勻，形成一種不透明的紅色液體7。2、 低滲溶液（空白對(duì)照）的觀察取試管一只，加入10 ml 蒸餾水，然后再加入1 ml 稀釋的血液。注意觀察溶液顏色的變化。結(jié)果是溶液由不透明的紅色變?yōu)槌吻?。記錄下這個(gè)過程所要的時(shí)間。3、 紅血球的滲透性按表一的配制，分別在下列十種等滲溶液中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。輕輕搖動(dòng)，注意有無顏色變化，是

4、否有溶血現(xiàn)象發(fā)生，記下時(shí)間（自加入稀釋血液到溶液逐漸由紅色變?yōu)橥该鞒吻?，紅血球全部溶血所需時(shí)間），填入表一的空格中。4、 顯微觀察（1） 血液紅細(xì)胞的觀察滴一滴稀釋的血液于載玻片上，蓋上蓋玻片。用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞的種類、形狀和顏色。（2） 細(xì)胞破碎的觀察在上一步的載玻片的一端滴加清水，在另一端吸水，并在顯微鏡下觀察細(xì)胞的破裂。七、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析1、 比較和分析你所觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并解釋原因。結(jié)果：（1）在所提供的試劑中不溶血的有：（2）在所提供的試劑中不完全溶血的有：（3）在所提供的試劑中完全溶血的有：結(jié)果分析與比較：結(jié)論：2、 繪制你所觀察到的血液細(xì)胞圖。3、 討論溶血實(shí)驗(yàn)在研究中應(yīng)用

5、的可能性。附1：試劑配制表1、 0.17 M NaCl 需要 克NaCl，定容至100ml。2、 0.17 M NH4Cl 需要 克NH4Cl，定容至100ml。3、 0.17 M NH4Ac 需要 克NH4Ac，定容至100ml。4、 0.17 M NaNO3 需要 克NaNO3，定容至100ml。5、 0.12 M Na2SO4 需要 克Na2SO4，定容至100ml。6、 0.12 M草酸銨 需要 克草酸銨，定容至100ml。7、 0.32 M葡萄糖 需要 克葡萄糖，定容至100ml。8、 0.32 M甘油 需要 克甘油（100%），定容至250 ml。9、 0.32 M乙醇 需要 克無

6、水乙醇，定容至250 ml。10、0.32 M丙酮 需要 克丙酮，定容至250 ml。附2： 表一 在不同低滲溶液下溶血現(xiàn)象的調(diào)查編號(hào)試 劑是否溶血時(shí)間110 ml 0.17 M NaCl + 1 ml稀釋的雞血210 ml 0.17 M NH4Cl + 1 ml稀釋的雞血310 ml 0.17 M NH4Ac + 1 ml稀釋的雞血410 ml 0.17 M NaNO3 + 1 ml稀釋的雞血510 ml 0.12 M Na2SO4 + 1 ml稀釋的雞血610 ml 0.12 M 草酸銨 + 1 ml稀釋的雞血710 ml 0.32 M 葡萄糖 + 1 ml稀釋的雞血810 ml 0.32

7、 M 甘油 + 1 ml稀釋的雞血910 ml 0.32 M 乙醇 + 1 ml稀釋的雞血1010 ml 0.32 M 丙酮 + 1 ml稀釋的雞血附3： 溶血結(jié)果的判斷（1） 不溶血：液體分2層，上層淺黃色透明，下層紅色不透明，鏡檢紅細(xì)胞完好。（2） 不完全溶血：溶液混濁，上層變紅色，鏡檢有部分紅細(xì)胞破裂。（3） 完全溶血：液體變紅而且透明，鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全成碎片。附4： 細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)交換示意圖你知道嗎？ 原始生命向細(xì)胞進(jìn)化所獲得的重要形態(tài)特征之一，是生命物質(zhì)外面出現(xiàn)了一層膜性結(jié)構(gòu)，即細(xì)胞膜。細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)總稱為生物膜(biomembrane)。細(xì)胞膜(cell membrane)，又

8、稱原生質(zhì)膜，是細(xì)胞結(jié)構(gòu)中分隔細(xì)胞內(nèi)、外不同介質(zhì)和組成成分的界面。其厚度通常為78nm，由脂類和蛋白質(zhì)組成。一般蛋白質(zhì)占60%-80%，類脂占20%-40%，碳水化合物約占5%。 關(guān)于細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)模型，流體鑲嵌模型是目前被最廣泛接受和認(rèn)可的觀點(diǎn)。該模型由美國加州大學(xué)的辛格(S. J. Singer)和尼克森(G. L. Nicolson)于1972年提出。該模型突出了膜的流動(dòng)性和不對(duì)稱性，其結(jié)構(gòu)特征是：生物膜的骨架是磷脂雙分子層，其中磷脂分子的疏水性尾部相對(duì)，極性頭部朝向水相。蛋白質(zhì)或嵌在脂雙層表面，或嵌在其內(nèi)部，或橫跨整個(gè)脂雙層，表現(xiàn)出分布的不對(duì)稱性。根據(jù)在膜上的位置不同，膜蛋白可分為兩類：通

9、過強(qiáng)疏水或親水作用同膜脂牢固結(jié)合不易分開的，稱為整合蛋白(integral protein)或內(nèi)在蛋白；附著在膜表層，與膜結(jié)合比較疏松容易分離的，稱為外周蛋白(peripheral protein)。細(xì)胞膜的表面還有糖類分子，形成糖脂、糖蛋白。因脂雙層具有流動(dòng)性，故蛋白質(zhì)分子也可以在脂雙層中橫向移動(dòng)；又因膜的內(nèi)外表面上脂類和蛋白質(zhì)的分布不均勻，反映了膜兩側(cè)的功能不同。 細(xì)胞膜是細(xì)胞與周圍環(huán)境和細(xì)胞與細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)交換和信息傳遞的重要通道。其最重要的特性是半透性，或稱選擇透過性，對(duì)進(jìn)出入細(xì)胞的物質(zhì)有很強(qiáng)的選擇透過性。這是細(xì)胞膜最基本的一種功能，如果喪失了這種功能，細(xì)胞就會(huì)死亡。細(xì)胞膜的功能有：1) 分隔形成細(xì)胞和細(xì)胞器，為細(xì)胞的生命活動(dòng)提供相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境，膜的面積大大增加，提高了發(fā)生在膜上的生物功能；2) 屏障作用，膜兩側(cè)的水溶性物質(zhì)不能自由通過；3) 選擇性物質(zhì)運(yùn)輸，伴隨著能量的傳遞；4) 生物功能：激素作用