長期毒性作用及其試驗方法課件

1、2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法1 第十四章第十四章長期毒性作用及其試驗方法長期毒性作用及其試驗方法 long-term toxicity impact and test method 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法2 第一節(jié)第一節(jié) 基本概念和目的基本概念和目的 第二節(jié)第二節(jié) 試驗設計原則及方法試驗設計原則及方法2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法32022-1-31長期毒性作用及其試驗方法4 長期毒性作用是指藥物以一定的等級劑量長期毒性作用是指藥物以一定的等級劑量連續(xù)連續(xù)多日多日給予受試動物所產(chǎn)生的有害作用。為觀察這種給予受試動物所產(chǎn)生的有害作用。為觀察這種有害作

2、用而設計的毒理學試驗稱之為長期毒性試驗。有害作用而設計的毒理學試驗稱之為長期毒性試驗。一、定義一、定義 急性毒性試驗急性毒性試驗 是為觀察和評價急性毒性的有害作用或中毒反應是為觀察和評價急性毒性的有害作用或中毒反應而設計的一種毒理學試驗。研究藥物一次或而設計的一種毒理學試驗。研究藥物一次或2424小時內小時內多次給予受試藥物后，一定時間內所產(chǎn)生的毒性反應。多次給予受試藥物后，一定時間內所產(chǎn)生的毒性反應。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法5123給給 藥藥 的的 期期 限限 不不 同同長期毒性試驗與急性毒性試驗長期毒性試驗與急性毒性試驗的根本差別的根本差別2022-1-31長期毒性作用及

3、其試驗方法6根據(jù)給藥期限的長短，可分為：根據(jù)給藥期限的長短，可分為：n亞慢性毒性試驗亞慢性毒性試驗給藥期限不超過給藥期限不超過90天天 或不超過試驗動物平均壽命的或不超過試驗動物平均壽命的10%；n慢性毒性試驗慢性毒性試驗給藥期限超過給藥期限超過90天天 或超過試驗動物平均壽命的或超過試驗動物平均壽命的10%；n終生毒性試驗終生毒性試驗n數(shù)代毒性試驗數(shù)代毒性試驗2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法7123給給 藥藥 的的 期期 限限 不不 同同給給 藥藥 的的 劑劑 量量 范范 圍圍 不不 同同長期毒性試驗與急性毒性試驗長期毒性試驗與急性毒性試驗的根本差別的根本差別2022-1-31長期

4、毒性作用及其試驗方法8蓄積作用蓄積作用 (accumulation action)(accumulation action) 當較長時間連續(xù)、反復給藥時，或者說給藥的當較長時間連續(xù)、反復給藥時，或者說給藥的時間間隔和劑量超過機體消除藥物的能力，就會出時間間隔和劑量超過機體消除藥物的能力，就會出現(xiàn)藥物進入機體的速度現(xiàn)藥物進入機體的速度 ( (或總量或總量) ) 超過排除的速度超過排除的速度 ( (或總量或總量) ) 的現(xiàn)象，此時藥物就有可能在體內逐漸增的現(xiàn)象，此時藥物就有可能在體內逐漸增加并貯存起來，即蓄積作用。加并貯存起來，即蓄積作用。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法9 蓄積作用的

5、表現(xiàn)形式蓄積作用的表現(xiàn)形式作用量積蓄作用量積蓄功能性蓄積功能性蓄積2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法10123給給 藥藥 的的 期期 限限 不不 同同給給 藥藥 的的 劑劑 量量 范范 圍圍 不不 同同觀觀 察察 的的 毒毒 效效 應應 不不 同同長期毒性試驗與急性毒性試驗長期毒性試驗與急性毒性試驗的根本差別的根本差別2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法11急性毒性試驗是以死亡為觀察終點的急性毒性試驗是以死亡為觀察終點的質反應質反應過程過程長期毒性試驗重點觀察體重、血液生化等長期毒性試驗重點觀察體重、血液生化等量反應量反應指標（量變指標（量變質變質變）2022-1-31長期毒性作

6、用及其試驗方法12二、目的與意義二、目的與意義2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法131預測受試物可能引起的臨床不良反應預測受試物可能引起的臨床不良反應2判斷受試物反復給藥的毒性靶器官或組織判斷受試物反復給藥的毒性靶器官或組織提示臨床試驗中需重點監(jiān)測的指標提示臨床試驗中需重點監(jiān)測的指標43推測臨床試驗的起始劑量和重復用藥的安全劑量范圍推測臨床試驗的起始劑量和重復用藥的安全劑量范圍為臨床試驗中的解毒或解救措施提供參考為臨床試驗中的解毒或解救措施提供參考5長期毒性試驗的目的2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法14第二節(jié)第二節(jié)試試 驗驗 設設 計計 原原 則則 及及 方方 法法2022-

7、1-31長期毒性作用及其試驗方法15一、一般原則和要求一、一般原則和要求基本原則基本原則全面、嚴謹、合理全面、嚴謹、合理整體性整體性隨機、對照、重復隨機、對照、重復2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法16一、一般原則和要求一、一般原則和要求基本原則基本原則整體性整體性長期毒性試驗不能與藥效學、藥代長期毒性試驗不能與藥效學、藥代動力性和其他毒理學研究割裂，試動力性和其他毒理學研究割裂，試驗設計應充分考慮其他藥理毒理研驗設計應充分考慮其他藥理毒理研究的試驗設計和研究結果。長期毒究的試驗設計和研究結果。長期毒性試驗的結果應該力求與其他藥理性試驗的結果應該力求與其他藥理毒理試驗結果互為印證、說明

8、和補毒理試驗結果互為印證、說明和補充。充。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法17一、一般原則和要求一、一般原則和要求基本要求基本要求2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法18一、一般原則和要求一、一般原則和要求基本要求基本要求2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法19一、一般原則和要求一、一般原則和要求基本要求基本要求2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法20一、一般原則和要求一、一般原則和要求 口服給藥大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量為每口服給藥大鼠一般常用灌胃，灌胃的容量為每天天12ml/100g，也可將受試藥物混在飼料或水中給予，也可將受試藥物混在飼料或水中給予，但要保證

9、每只動物按規(guī)定劑量在一定時間內服入。但要保證每只動物按規(guī)定劑量在一定時間內服入。 靜脈注射大鼠時可采用腹腔或皮下代替，各劑靜脈注射大鼠時可采用腹腔或皮下代替，各劑量組采用等容量不等濃度給藥。特殊情況另作說明。量組采用等容量不等濃度給藥。特殊情況另作說明?；疽蠡疽?022-1-31長期毒性作用及其試驗方法21理想動物的標準：理想動物的標準：n對受試物的生物轉化與人體相近；對受試物的生物轉化與人體相近；n對受試物敏感；對受試物敏感；n已有大量歷史對照數(shù)據(jù)。已有大量歷史對照數(shù)據(jù)。二、實驗動物二、實驗動物 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法22我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物我

10、國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物, , 一種為嚙一種為嚙齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。1.1.種類及品系種類及品系二、實驗動物二、實驗動物 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法23我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物, , 一種為嚙一種為嚙齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。1.1.種類及品系種類及品系二、實驗動物二、實驗動物 Wistar大鼠SD大鼠 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法24我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用

11、兩種動物我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物, , 一種為嚙一種為嚙齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。1.1.種類及品系種類及品系二、實驗動物二、實驗動物 一類新藥：Beagle犬 二類新藥：雜種狗 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法25我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物我國藥政部門規(guī)定的基本原則是選用兩種動物, , 一種為嚙一種為嚙齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。齒類，首選大白鼠；另一種為非嚙齒類，首選狗。1.1.種類及品系種類及品系二、實驗動物二、實驗動物 在吸入給藥時，猴是首先推薦的動物，因為它在呼吸系統(tǒng)

12、在吸入給藥時，猴是首先推薦的動物，因為它在呼吸系統(tǒng)的解剖學和生理學方面比其它動物更接近人類。的解剖學和生理學方面比其它動物更接近人類。如研究計劃生育用藥，應選擇猴或其他大動物。如研究計劃生育用藥，應選擇猴或其他大動物。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法262022-1-31長期毒性作用及其試驗方法272022-1-31長期毒性作用及其試驗方法28 Beagle犬：原產(chǎn)英國，純種小獵兔犬 Beagle犬的特點：體型小,毛短,性情溫和,親人,抗病力強 缺點：價格昂貴2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法292. 2. 起始月起始月( (周周) )齡齡一般選擇較年輕的或正處于生長發(fā)育階段

13、的動物。一般選擇較年輕的或正處于生長發(fā)育階段的動物。二、實驗動物二、實驗動物 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法302. 2. 起始月起始月( (周周) )齡齡二、實驗動物二、實驗動物 長期毒性試驗的給藥期限較長；長期毒性試驗的給藥期限較長；1原因原因：處于生長發(fā)育階段的動物對藥物處于生長發(fā)育階段的動物對藥物的毒性反應較敏感；的毒性反應較敏感；2年齡較大的動物反應性降低年齡較大的動物反應性降低, , 存在存在許多自發(fā)性疾病干擾試驗結果。許多自發(fā)性疾病干擾試驗結果。3一般選擇較年輕的或正處于生長發(fā)育階段的動物。一般選擇較年輕的或正處于生長發(fā)育階段的動物。2022-1-31長期毒性作用及其

14、試驗方法31n嚙齒類動物最好在斷奶后不久即開始給藥嚙齒類動物最好在斷奶后不久即開始給藥 大鼠大鼠起始周齡要求在起始周齡要求在 49周齡；周齡； n犬犬的起始月齡為的起始月齡為49月齡，一般不超過月齡，一般不超過 12 月月 齡；齡；如選用雜種狗，起始年齡可稍大些。如選用雜種狗，起始年齡可稍大些。二、實驗動物二、實驗動物 2. 2. 起始月起始月( (周周) )齡齡2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法32n起始體重應在體重均值起始體重應在體重均值 20% 的范圍內。的范圍內。二、實驗動物二、實驗動物 2. 2. 起始月起始月( (周周) )齡齡2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法33

15、3. 3. 性別及數(shù)量性別及數(shù)量 （1 1）性別）性別二、實驗動物二、實驗動物 一般來講是兼用兩種性別的動物，每個劑量組中一般來講是兼用兩種性別的動物，每個劑量組中 雌雄性別的動物數(shù)必須一致。雌雄性別的動物數(shù)必須一致。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法34 在特殊情況下如藥物對雄性（或雌性）生殖細胞在特殊情況下如藥物對雄性（或雌性）生殖細胞的毒效應已確知，或者急性試驗已證明藥物對雌雄兩的毒效應已確知，或者急性試驗已證明藥物對雌雄兩性動物的毒性有明顯差別時，就應主要選用敏感性別性動物的毒性有明顯差別時，就應主要選用敏感性別的動物進行試驗。的動物進行試驗。 二、實驗動物二、實驗動物 3.

16、3. 性別及數(shù)量性別及數(shù)量 （1 1）性別）性別2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法35超過超過 90 天的試驗天的試驗 嚙齒類動物每組至少嚙齒類動物每組至少 40 只（雌雄各只（雌雄各 20 只）；只）； 非嚙齒類每組非嚙齒類每組 810 只（雌雄各只（雌雄各 45 只）。只）。 90 天以內的試驗天以內的試驗 嚙齒類動物每組至少嚙齒類動物每組至少20只（雌雄各只（雌雄各 10 只）；只）； 非嚙齒類每組非嚙齒類每組 6 只（雌雄各只（雌雄各 3只）；只）；二、實驗動物二、實驗動物 3. 3. 性別及數(shù)量性別及數(shù)量 （2 2）數(shù)量）數(shù)量2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法36超過

17、超過 90 天的試驗天的試驗 嚙齒類動物每組至少嚙齒類動物每組至少 40 只（雌雄各只（雌雄各 20 只）；只）； 非嚙齒類每組非嚙齒類每組 810 只（雌雄各只（雌雄各 45 只）。只）。 90 天以內的試驗天以內的試驗 嚙齒類動物每組至少嚙齒類動物每組至少20只（雌雄各只（雌雄各 10 只）；只）； 非嚙齒類每組非嚙齒類每組 6 只（雌雄各只（雌雄各 3只）；只）；二、實驗動物二、實驗動物 3. 3. 性別及數(shù)量性別及數(shù)量 （2 2）數(shù)量）數(shù)量指導原則指導原則：一般大鼠為雌、雄各：一般大鼠為雌、雄各30只，只， Beagle犬或猴各犬或猴各36只。只。2022-1-31長期毒性作用及其試驗

18、方法37n恢復期觀察的動物數(shù)；恢復期觀察的動物數(shù)；n給藥期的長短，過長，試驗過程中的自然死亡動物數(shù)。給藥期的長短，過長，試驗過程中的自然死亡動物數(shù)。注意注意2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法384. 4. 飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)管理 嚴格控制環(huán)境條件，避免不必要的干擾因素嚴格控制環(huán)境條件，避免不必要的干擾因素是非常重要的。是非常重要的。二、實驗動物二、實驗動物 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法39酮癥酸中毒酮癥酸中毒室內溫度室內溫度飼料或飼料配方飼料或飼料配方濕濕 度度光光 照照通風條件通風條件飲水質量飲水質量4. 4. 飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)管理二、實驗動物二、實驗動物 2022-1-31長期

19、毒性作用及其試驗方法40光光 照照通風條件通風條件酮癥酸中毒酮癥酸中毒室內溫度室內溫度飼料或飼料配方飼料或飼料配方濕濕 度度飲水質量飲水質量4. 4. 飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)管理二、實驗動物二、實驗動物 適宜溫度為適宜溫度為 1826 。 相對濕度為相對濕度為 40%70%。光照宜持續(xù)光照宜持續(xù) 12 h明亮，明亮，12 h黑暗。黑暗。通風條件良好。通風條件良好。所用飼料應符合動物的營養(yǎng)標準。所用飼料應符合動物的營養(yǎng)標準。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法41光光 照照通風條件通風條件酮癥酸中毒酮癥酸中毒室內溫度室內溫度飼料或飼料配方飼料或飼料配方濕濕 度度飲水質量飲水質量4. 4. 飼養(yǎng)管理飼

20、養(yǎng)管理二、實驗動物二、實驗動物 嚙齒類動物嚙齒類動物雌雄動物應分開飼養(yǎng)，每籠不宜超過雌雄動物應分開飼養(yǎng)，每籠不宜超過5 5只只2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法42酮癥酸中毒酮癥酸中毒4. 4. 飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)管理二、實驗動物二、實驗動物 犬犬光光 照照通風條件通風條件酮癥酸中毒酮癥酸中毒室內溫度室內溫度飼料或飼料配方飼料或飼料配方濕濕 度度飲水質量飲水質量單籠飼養(yǎng)，定量喂食。單籠飼養(yǎng)，定量喂食。 Beagle 犬實驗前至少馴養(yǎng)犬實驗前至少馴養(yǎng) 12 周周; 雜種狗應先檢疫，驅蟲。雜種狗應先檢疫，驅蟲。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法43n試驗前觀察記錄動物的行為活動、飲食、體

21、重、精試驗前觀察記錄動物的行為活動、飲食、體重、精神狀況、心電圖，檢測心、肝、腎功能神狀況、心電圖，檢測心、肝、腎功能2 2次；次；n選擇正常、健康、雌性無孕的動物作為受試動物。選擇正常、健康、雌性無孕的動物作為受試動物。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法44 雪貂雪貂作為實驗動物的資料介紹，還在本世紀，雖作為實驗動物的資料介紹，還在本世紀，雖然它還未被廣泛應用，但它對人類健康的貢獻無疑是然它還未被廣泛應用，但它對人類健康的貢獻無疑是很重要的（很重要的（北美常用北美常用）。）。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法45 雪貂是食肉類動物，屬于鼬科。經(jīng)馴化供實驗的雪貂是食肉類動物，

22、屬于鼬科。經(jīng)馴化供實驗的雪貂毛色呈野生色或白化的。它缺乏盲腸、汗腺，雄雪貂毛色呈野生色或白化的。它缺乏盲腸、汗腺，雄貂缺乏前列腺。通常雪貂的實驗和繁殖期為貂缺乏前列腺。通常雪貂的實驗和繁殖期為5 5至至6 6年，年，而整個壽命約而整個壽命約1414年。雄貂體重可為雌貂的兩倍。年。雄貂體重可為雌貂的兩倍。 雪貂在早期用于傳播病毒性疾病的研究，如犬瘟雪貂在早期用于傳播病毒性疾病的研究，如犬瘟和人類流感，對其它一些病毒性疫病，雪貂也提供了和人類流感，對其它一些病毒性疫病，雪貂也提供了獨特的、合適的模型，如麻疹、皰疹性口炎，阿留申獨特的、合適的模型，如麻疹、皰疹性口炎，阿留申病和牛鼻氣管炎。雪貂已應用

23、于病毒學、生殖生理、病和牛鼻氣管炎。雪貂已應用于病毒學、生殖生理、藥理學等研究，最近報導特殊適合毒理學試驗。還可藥理學等研究，最近報導特殊適合毒理學試驗。還可作為小腦發(fā)育不全、流行性感冒等動物模型來研究人作為小腦發(fā)育不全、流行性感冒等動物模型來研究人類相應的疾病。類相應的疾病。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法46三、給藥期限三、給藥期限 按我國藥政管理部門的要求，長期毒性試驗的按我國藥政管理部門的要求，長期毒性試驗的給藥期限一般為臨床療程的給藥期限一般為臨床療程的34倍時間。創(chuàng)新藥品倍時間。創(chuàng)新藥品試驗周期應不少于試驗周期應不少于90天，天， 超過超過180天的新藥可以在天的新藥可

24、以在試驗開始試驗開始90天后，同時進行天后，同時進行I期臨床試驗。期臨床試驗。 創(chuàng)新藥物是指具有自主知識產(chǎn)權專利的藥物。創(chuàng)新藥物是指具有自主知識產(chǎn)權專利的藥物。相對于仿制藥，創(chuàng)新藥物強調化學結構新穎或新的相對于仿制藥，創(chuàng)新藥物強調化學結構新穎或新的治療用途，在以前的研究文獻或專利中，均未見報治療用途，在以前的研究文獻或專利中，均未見報道。道。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法47 臨床擬用臨床擬用 毒性試驗期限毒性試驗期限 給藥時間給藥時間 嚙齒類動物嚙齒類動物 非嚙齒類動物非嚙齒類動物5 5天天 2 2周周 2 2周周2 2周周 1 1月月 1 1月月 2-42-4周周 3 3月月

25、 3 3月月 1-31-3月月 6 6月月 6 6月月 3 3月月 6 6月月 9 9月月 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法48 臨床擬用臨床擬用 毒性試驗期限毒性試驗期限 給藥時間給藥時間 嚙齒類動物嚙齒類動物 非嚙齒類動物非嚙齒類動物5 5天天 2 2周周 2 2周周2 2周周 1 1月月 1 1月月 2-42-4周周 3 3月月 3 3月月 1-31-3月月 6 6月月 6 6月月 3 3月月 6 6月月 9 9月月 每天給藥最好固定時間。每天給藥最好固定時間。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法49四、劑量水平的選擇四、劑量水平的選擇 三個劑量組是必不可少的：三個劑量組

26、是必不可少的：n一個是足以引起明顯的一個是足以引起明顯的毒性反應毒性反應的高劑量，但死亡的高劑量，但死亡率應控制在率應控制在 10% 以內；以內；n一個是不引起毒性作用的低劑量一個是不引起毒性作用的低劑量(一般為動物有效劑一般為動物有效劑量或臨床治療量的量或臨床治療量的23倍倍)；n為表明毒性作用的量為表明毒性作用的量效關系，在上述兩個劑量之效關系，在上述兩個劑量之間插入一個間插入一個(或多個或多個)中間劑量。中間劑量。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法50亞慢性毒性試驗基礎亞慢性毒性試驗基礎n最大劑量最大劑量：選擇：選擇9090天試驗中體重增長不到天試驗中體重增長不到10%10%的

27、劑量；的劑量；n中劑量中劑量：1/41/4最大劑量；最大劑量；n低劑量低劑量：1/81/8最大劑量。最大劑量。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法51最高劑量組的基本要求最高劑量組的基本要求 僅出現(xiàn)輕度毒性，不改變試驗動物的正常壽命，僅出現(xiàn)輕度毒性，不改變試驗動物的正常壽命，或至少在給藥的前四分之一時間內不影響動物的體或至少在給藥的前四分之一時間內不影響動物的體質，外觀無異常，可有血清酶活力的改變或輕度體重質，外觀無異常，可有血清酶活力的改變或輕度體重增長抑制（增長抑制（10%）。）。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法52 在選擇合適的劑量時還應考慮到：在選擇合適的劑量時還應考慮

28、到： 藥物在體內的生物蓄積作用藥物在體內的生物蓄積作用。對于高蓄積性藥。對于高蓄積性藥物應適當減少其劑量，否則在長期毒性試驗結束時各劑物應適當減少其劑量，否則在長期毒性試驗結束時各劑量均有可能出現(xiàn)毒性作用；量均有可能出現(xiàn)毒性作用； 藥物是否有可能被特殊的酶所藥物是否有可能被特殊的酶所“解毒解毒”或或“活化活化增毒增毒”，而這些酶又是否易被藥物本身所誘導或抑制。，而這些酶又是否易被藥物本身所誘導或抑制。 藥物在消化道中的穩(wěn)定性藥物在消化道中的穩(wěn)定性。與胃腸道內容物有。與胃腸道內容物有親和性的藥物，則應酌情增加劑量。親和性的藥物，則應酌情增加劑量。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法53可

29、供參考的具體方法可供參考的具體方法（1 1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LDLD5050）法）法 根據(jù)急性毒性的根據(jù)急性毒性的LD50值決定三個劑量。一般在大鼠值決定三個劑量。一般在大鼠3個月長期毒性試驗中，高、中、低三個劑量可分別采個月長期毒性試驗中，高、中、低三個劑量可分別采用約用約LD50的的1/10、1/50和和1/100劑量，狗各劑量組可采用劑量，狗各劑量組可采用大鼠相應各組的大鼠相應各組的1/21/3劑量。劑量。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法54可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法

30、 根據(jù)急性毒性試驗所提供的相關信息，如毒性的根據(jù)急性毒性試驗所提供的相關信息，如毒性的量量效關系，毒性出現(xiàn)的劑量范圍及敏感動物等，先效關系，毒性出現(xiàn)的劑量范圍及敏感動物等，先過渡到過渡到7 7天至天至2121天的短期蓄積性試驗，再將獲得的參天的短期蓄積性試驗，再將獲得的參數(shù)外推于長期毒性試驗。數(shù)外推于長期毒性試驗。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法55急性毒性試驗急性毒性試驗蓄積毒性試驗蓄積毒性試驗和和/ /或或7 7天短期重復給藥試驗天短期重復給藥試驗9090天重復給藥試驗天重復給藥試驗180180天或更長期重復給藥試驗天或更長期重復給藥試驗2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法

31、56可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法 Traina法法 第一步：確定大鼠亞急性毒性試驗的最高劑量第一步：確定大鼠亞急性毒性試驗的最高劑量 根據(jù)大鼠的急性毒性試驗找出根據(jù)大鼠的急性毒性試驗找出最大無癥狀劑量最大無癥狀劑量，再分別以該，再分別以該劑量劑量及其及其1/3和和1/10量給三組大鼠（雌雄各半）連續(xù)服藥量給三組大鼠（雌雄各半）連續(xù)服藥23周。周。（此劑量下的動物僅出現(xiàn)輕微的毒性反應，如食耗量略減，體重增長率此劑量下的動物僅出現(xiàn)輕微的毒性反應，如食耗量略減，體重增長率略慢等略慢等）2022-1-3

32、1長期毒性作用及其試驗方法57可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法 Traina法法 Traina法法 第一步：確定大鼠亞急性毒性試驗的最高劑量第一步：確定大鼠亞急性毒性試驗的最高劑量 第二步：確定犬亞急性毒性試驗的最高劑量第二步：確定犬亞急性毒性試驗的最高劑量 以大鼠以大鼠亞急性毒性試驗的最高劑量為起點亞急性毒性試驗的最高劑量為起點，給狗單次服用，給狗單次服用，根據(jù)觀察結果適當增減劑量（對數(shù)間隔），找出狗單次服藥的最根據(jù)觀察結果適當增減劑量（對數(shù)間隔），找出狗單次服藥的最大無癥狀劑量，再分別以此劑量大

33、無癥狀劑量，再分別以此劑量及其及其1/3和和1/10量給少數(shù)狗連續(xù)服量給少數(shù)狗連續(xù)服藥藥23周。周。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法58可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法 Traina法法 Homburger法法 選擇一個劑量給雌雄各選擇一個劑量給雌雄各5 5只大鼠，連續(xù)服藥只大鼠，連續(xù)服藥2 2周。周。 如果無動物死亡，再成倍增加劑量，直至出現(xiàn)死亡；如果無動物死亡，再成倍增加劑量，直至出現(xiàn)死亡； 如果第一個劑量就出現(xiàn)動物死亡，再成倍減少劑量，直至無死亡出現(xiàn)。如果第一個劑量就出現(xiàn)動物死亡，再

34、成倍減少劑量，直至無死亡出現(xiàn)。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法59可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法 Traina法法 Homburger法法 選擇一個劑量給雌雄各選擇一個劑量給雌雄各5 5只大鼠，連續(xù)服藥只大鼠，連續(xù)服藥2 2周。周。 如果如果無動物死亡無動物死亡，再成倍增加劑量，直至出現(xiàn)，再成倍增加劑量，直至出現(xiàn)死亡死亡； 如果第一個劑量就出現(xiàn)如果第一個劑量就出現(xiàn)動物死亡動物死亡，再成倍減少劑量，直至，再成倍減少劑量，直至無死亡無死亡出現(xiàn)。出現(xiàn)。 以以無動物死亡無動物死亡的劑量為最大非致

35、死量，以首次出現(xiàn)動物的劑量為最大非致死量，以首次出現(xiàn)動物死亡的死亡的劑量為最小致死劑量，求算最大耐受量（劑量為最小致死劑量，求算最大耐受量（MTDMTD）。）。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法60可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法 Traina法法 Homburger法法 選擇一個劑量給雌雄各選擇一個劑量給雌雄各5 5只大鼠，連續(xù)服藥只大鼠，連續(xù)服藥2 2周。周。 如果如果無動物死亡無動物死亡，再成倍增加劑量，直至出現(xiàn)，再成倍增加劑量，直至出現(xiàn)死亡死亡； 如果第一個劑量就出現(xiàn)如果第一個劑量就

36、出現(xiàn)動物死亡動物死亡，再成倍減少劑量，直至，再成倍減少劑量，直至無死亡無死亡出現(xiàn)。出現(xiàn)。 以以無動物死亡無動物死亡的劑量為最大非致死量，以首次出現(xiàn)動物的劑量為最大非致死量，以首次出現(xiàn)動物死亡的死亡的劑量為最小致死劑量，求算最大耐受量（劑量為最小致死劑量，求算最大耐受量（MTDMTD）。）。 MTD = lg MTD = lg-1-1(lg(lg最小致死劑量最小致死劑量+lg+lg最大非致死劑量最大非致死劑量)/2)/22022-1-31長期毒性作用及其試驗方法61可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量法（）半數(shù)致死量法（LD50法）法）（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法

37、 Traina法法 Homburger法法 Weil法法 取初斷乳大鼠取初斷乳大鼠3030或或4040只，隨機分為只，隨機分為34組，每組雌雄各組，每組雌雄各5 5只。連只。連續(xù)給藥續(xù)給藥7 7天。天。 觀察死亡率、體重、肝腎指數(shù)和進食量的改變。找出觀察死亡率、體重、肝腎指數(shù)和進食量的改變。找出7 7天藥物天藥物最小有效量（最小有效量（MIEMIE）。）。 MIE 90 MIE 90天天 = MIE 7= MIE 7天天/6.2/6.22022-1-31長期毒性作用及其試驗方法62可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期

38、蓄積試驗過渡法（3）藥代動力學（）藥代動力學（MBS）法）法 根據(jù)藥代動力學最大有效安全濃度（根據(jù)藥代動力學最大有效安全濃度（MCDMCD）大鼠大鼠3個月長期毒性試驗時，低、中、高三個劑量可分別個月長期毒性試驗時，低、中、高三個劑量可分別 采用大鼠的采用大鼠的1.0 、3.36.6 和和1020 MCD;狗狗一般可采用大鼠一般可采用大鼠1/21/3的劑量。的劑量。注意：國內應用不多。注意：國內應用不多。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法63可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量法（）半數(shù)致死量法（LD50法）法）（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法（3）藥代動力學

39、（）藥代動力學（MBS）法）法根據(jù)大鼠急性毒性試驗的最大耐受量根據(jù)大鼠急性毒性試驗的最大耐受量(MTD)(MTD) ( (最大無癥狀劑量最大無癥狀劑量) )大鼠大鼠長期毒性試驗的三個劑量分別為長期毒性試驗的三個劑量分別為1、1/3及及1/10 MTD；狗和猴狗和猴可采用大鼠可采用大鼠1/21/3的劑量。的劑量。（4）最大耐受量（）最大耐受量（MTD）法）法注意：蓄積性大的藥物參考價值小。注意：蓄積性大的藥物參考價值小。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法64可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量（）半數(shù)致死量（LD50）法）法（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法（3

40、）藥代動力學（）藥代動力學（MBS）法）法根據(jù)臨床擬用劑量根據(jù)臨床擬用劑量（3個月長期毒性試驗）個月長期毒性試驗） 大鼠大鼠低、中、高三個劑量可分別采用低、中、高三個劑量可分別采用50100倍、倍、2550倍和倍和 1020倍臨床擬用劑量倍臨床擬用劑量狗狗可分別采用可分別采用3050倍、倍、1525倍和倍和510倍臨床擬用劑量倍臨床擬用劑量猴猴可采用與狗相近的劑量或略低于狗的劑量進行試驗可采用與狗相近的劑量或略低于狗的劑量進行試驗（4）最大耐受量（）最大耐受量（MTD）法）法（5）臨床擬用劑量（）臨床擬用劑量（ACD）法）法2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法65可供參考的具體方法可供參

41、考的具體方法（1）半數(shù)致死量法（）半數(shù)致死量法（LD50法）法）（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法（3）藥代動力學法（）藥代動力學法（MBS法）法） 根據(jù)人和動物的等效劑量比值，再按一定倍數(shù)擴大。根據(jù)人和動物的等效劑量比值，再按一定倍數(shù)擴大。（4）最大耐受量法（）最大耐受量法（MTD法）法）（5）臨床擬用劑量法（）臨床擬用劑量法（ACD法）法）（6）等效劑量法）等效劑量法2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法66不同動物的劑量折算系數(shù)不同動物的劑量折算系數(shù) 動物種屬動物種屬 小鼠小鼠 大鼠大鼠 豚鼠豚鼠 兔兔 貓貓 猴猴 狗狗 人人標準標準 K(K(劑量折算系數(shù)劑量折算系數(shù)) )

42、 1 1 7 7 12.312.3 27.527.5 29.729.7 64 64 124124 388388體重體重 K(kgK(kg體重劑量折算系數(shù)體重劑量折算系數(shù)) ) 1 1 0.710.71 0.62 0.62 0.37 0.37 0.30 0.30 0.320.32 0.210.21 0.110.11任何任何 R(R(動物體型系數(shù)動物體型系數(shù)) ) 0.0590.059 0.090.09 0.099 0.099 0.0930.093 0.0820.082 0.1110.111 0.104 0.104 0.10.1體重體重 W(W(標準體重標準體重kg)kg) 0.020.02 0.

43、20.2 0.40.4 1.51.5 2 2 4 4 1212 7070注：有些資料記載的動物體型系數(shù)（注：有些資料記載的動物體型系數(shù)（R R）為此表中）為此表中R R 值的值的1000 1000 倍，如小鼠倍，如小鼠R R 為為5959，大鼠，大鼠R R 為為9090，這不影響藥物劑量的折算。這不影響藥物劑量的折算。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法67對于標準體重的動物：對于標準體重的動物： 每只用量（每只用量（mg/mg/只）只）D DB B D DA A K KB BK KA A千克體重劑量（千克體重劑量（mg/kgmg/kg）d dB B d dB B K KB BK KA

44、AK KA A，K KB B，R RA A，R RB B 值由上表查找值由上表查找2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法68對于任何體重的動物：對于任何體重的動物： 每只用量（每只用量（mg/mg/只）只）D DB B D DA A R RB B( (W WB B) )2/32/3R RA AW WA A千克體重劑量（千克體重劑量（mg/kgmg/kg）d dB B d dA AR RB B( (W WB B) )2/32/3R RA AW WA A式中式中D DB B、d dB B 分別是欲計算的分別是欲計算的B B 種動物的每只劑量及公斤體種動物的每只劑量及公斤體重劑量，重劑量，D D

45、A A、d dA A 分別是已知分別是已知A A 種動物的每只劑量及公斤體種動物的每只劑量及公斤體重劑量，重劑量，W WA A、W WB B 是已知動物體重，是已知動物體重，R RA A、R RB B 是體型系數(shù)，可是體型系數(shù)，可由上表查得由上表查得。 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法69可供參考的具體方法可供參考的具體方法（1）半數(shù)致死量法（）半數(shù)致死量法（LD50法）法）（2）短期蓄積試驗過渡法）短期蓄積試驗過渡法（3）藥代動力學法（）藥代動力學法（MBS法）法）（4）最大耐受量法（）最大耐受量法（MTD法）法）（5）臨床擬用劑量法（）臨床擬用劑量法（ACD法）法）（6）等效劑量

46、法）等效劑量法2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法70五、給藥方法五、給藥方法n長期毒性試驗的給藥途徑一般應盡量與預期臨床使用長期毒性試驗的給藥途徑一般應盡量與預期臨床使用的途徑相一致。的途徑相一致。n臨床用藥途徑為靜脈或肌注時，臨床用藥途徑為靜脈或肌注時，3 3個月及以上的試驗個月及以上的試驗，由于試驗周期長大鼠給藥有困難，可用腹腔或皮下注由于試驗周期長大鼠給藥有困難，可用腹腔或皮下注射代替。射代替。n臨床用藥途徑為口服時，可采用口服、灌胃或片劑、臨床用藥途徑為口服時，可采用口服、灌胃或片劑、膠囊給藥，也可混于飼料中給予。膠囊給藥，也可混于飼料中給予。2022-1-31長期毒性作用及其

47、試驗方法71五、給藥方法五、給藥方法n灌胃灌胃給藥可將供試藥物制成一種溶液或混懸液，但給藥可將供試藥物制成一種溶液或混懸液，但必須注意給藥容量不應超過必須注意給藥容量不應超過 12ml/100g 體重體重/天。天。優(yōu)點：優(yōu)點：給藥劑量精確；給藥劑量精確； 時間易于掌握；時間易于掌握； 從藥動學角度出發(fā)符合臨床給藥的實際情況。從藥動學角度出發(fā)符合臨床給藥的實際情況。缺點：缺點：技術要求高（誤入氣管）；技術要求高（誤入氣管）； 屬外界刺激。屬外界刺激。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法72五、給藥方法五、給藥方法n混于飼料混于飼料給藥則需計算給藥則需計算食耗。食耗。食食 耗：耗：從斷奶至成

48、年期食耗不同。從斷奶至成年期食耗不同。藥物量：藥物量：要求每周或每兩周根據(jù)各組動物的平均體重要求每周或每兩周根據(jù)各組動物的平均體重 進行調整。進行調整。n灌胃灌胃2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法73n預計動物體重（預計動物體重（W W）W W3rd3rd = W = W2nd2nd+ 1/2(W+ 1/2(W2nd2nd- W- W1st1st) )n預計食耗（預計食耗（FCFC）FCFC3rd3rd = FC = FC2nd2nd+ 1/2(FC+ 1/2(FC2nd2nd- FC- FC1st1st) )n預計食耗率（預計食耗率（R R）R R3rd3rd = FC = FC3r

49、d3rd/W/W3rd 3rd =g=g飼料飼料/kg/kg體重體重/ /動物動物/ /天天 n預計藥物濃度（預計藥物濃度（C C）C C3rd3rd = =給藥劑量（給藥劑量（mg/kg體重體重/動物動物/天）天）R3rd （ g飼料飼料/kg體重體重/動物動物/天）天）2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法74注意事項注意事項n藥物在飼料中的含量不應超過藥物在飼料中的含量不應超過5%5%；n藥物的異味藥物的異味n對飼料進行階段性檢查，確保藥物在飼料中的穩(wěn)定性。對飼料進行階段性檢查，確保藥物在飼料中的穩(wěn)定性。飼料抽樣：新鮮配制飼料抽樣：新鮮配制 存放一定時間存放一定時間2022-1-31

50、長期毒性作用及其試驗方法75五、給藥方法五、給藥方法n混于飼料混于飼料稀釋劑：稀釋劑：惰性的，如乳糖、甘露醇、干酪、淀粉、惰性的，如乳糖、甘露醇、干酪、淀粉、 白陶土、碳酸鈣、磷酸鈣。白陶土、碳酸鈣、磷酸鈣。n灌胃灌胃n膠囊或片劑膠囊或片劑給藥，將受試物與稀釋劑混合。給藥，將受試物與稀釋劑混合。明膠膠囊，（賦型劑）片劑明膠膠囊，（賦型劑）片劑2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法76五、給藥方法五、給藥方法n一般情況：長期毒性試驗均強調每天給藥，每周必一般情況：長期毒性試驗均強調每天給藥，每周必須給藥須給藥 7 天。給藥期限長（天。給藥期限長（3個月）的藥物每周至個月）的藥物每周至少應給藥

51、少應給藥6天。天。給藥頻率給藥頻率n特殊情況：參考體內代謝速度。特殊情況：參考體內代謝速度。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法77六、觀察及測定指標六、觀察及測定指標 試驗前，嚙齒類動物至少應進行試驗前，嚙齒類動物至少應進行5天的適應性天的適應性觀觀 察，非嚙齒類動物至少應馴養(yǎng)觀察察，非嚙齒類動物至少應馴養(yǎng)觀察12周，應對周，應對 動物進行一般觀察及血液生化學指標的檢測。動物進行一般觀察及血液生化學指標的檢測。 試驗期間，至少應每天或每兩天作一次詳細的試驗期間，至少應每天或每兩天作一次詳細的 觀察。觀察。 試驗結束時，必須留試驗結束時，必須留1/3的動物做恢復期的觀察的動物做恢復期的觀

52、察 試驗，其觀察期時間一般不超過試驗，其觀察期時間一般不超過28天（可逆性）。天（可逆性）。2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法78（一）日常觀察（一）日常觀察 1. 一般觀察內容一般觀察內容 包括對實驗動物被毛、皮膚、眼睛、粘膜、孔道包括對實驗動物被毛、皮膚、眼睛、粘膜、孔道 ( 及其分泌物及其分泌物 ) 、呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、軀體和、呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、軀體和肢體活動情況以及精神行為進行仔細地觀察；對動物糞肢體活動情況以及精神行為進行仔細地觀察；對動物糞便的量、色澤和內含物，散失的食物，飲水瓶中殘余的便的量、色澤和內含物，散失的食物，飲水瓶中殘余的水以及一切可以反映動物生

53、活情況變化的各種跡象，都水以及一切可以反映動物生活情況變化的各種跡象，都必須加以注意。所有出現(xiàn)的癥狀都必須記錄在案。必須加以注意。所有出現(xiàn)的癥狀都必須記錄在案。觀察及測定指標觀察及測定指標2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法791. 一般觀察內容一般觀察內容 如果發(fā)現(xiàn)動物死亡，必須盡可能快地進行尸體剖如果發(fā)現(xiàn)動物死亡，必須盡可能快地進行尸體剖檢，以減少組織檢，以減少組織自溶自溶。將組織置于。將組織置于 10% 的中性福爾的中性福爾馬林或其它適宜的固定液中。如果尸體剖檢不能立即馬林或其它適宜的固定液中。如果尸體剖檢不能立即進行，則必須將動物進行，則必須將動物冷藏冷藏起來以延緩組織自溶起來以

54、延緩組織自溶 。（一）日常觀察（一）日常觀察 觀察及測定指標觀察及測定指標2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法801. 1. 一般觀察內容一般觀察內容 對瀕死的動物也應立即處死作尸體剖檢。對瀕死的動物也應立即處死作尸體剖檢。（一）日常觀察（一）日常觀察 尸體剖檢后行組織病理學檢查、評價。尸體剖檢后行組織病理學檢查、評價。觀察及測定指標觀察及測定指標2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法812. 2. 生長率生長率 （一）日常觀察（一）日常觀察 觀察及測定指標觀察及測定指標n食耗量食耗量n飲水量飲水量體重體重 低毒藥物的毒性表現(xiàn) 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法82（一）日常

55、觀察（一）日常觀察 觀察及測定指標觀察及測定指標3.食耗食耗n食耗常用來評價給藥對食欲及食物利用率的影響食耗常用來評價給藥對食欲及食物利用率的影響食耗的計算食耗的計算 將加入供食器具中飼料的重量減去剩余的飼料重量再除以給食天數(shù) 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法83n將給藥組和對照組的食耗加以比較將給藥組和對照組的食耗加以比較，有助于說明有助于說明藥物是否影響實驗動物的食欲。藥物是否影響實驗動物的食欲。 （吸收、合成代謝）（吸收、合成代謝） （一）日常觀察（一）日常觀察 觀察及測定指標觀察及測定指標3.食耗食耗n食耗常用來評價給藥對食欲及食物利用率的影響食耗常用來評價給藥對食欲及食物利

56、用率的影響食耗的計算食耗的計算 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法84（二）測定指標（二）測定指標 1. 1. 器官重量器官重量 觀察及測定指標觀察及測定指標2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法85年組織編寫年組織編寫 藥物研究技術指導原則藥物研究技術指導原則規(guī)定規(guī)定長期毒性試驗中需長期毒性試驗中需稱重并計算臟器系數(shù)的器官稱重并計算臟器系數(shù)的器官l腦腦l肝臟肝臟l腎上腺腎上腺l脾臟脾臟l附睪附睪l子宮子宮l心臟心臟l腎臟腎臟l胸腺胸腺l睪丸睪丸l卵巢卵巢l肺臟肺臟觀察及測定指標觀察及測定指標目的：確定靶器官甲狀腺、甲狀腺、前列腺前列腺2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法86

57、長期毒性試驗中進行長期毒性試驗中進行病理組織學檢查的組織或器官病理組織學檢查的組織或器官：l腦（大腦、小腦、腦干）腦（大腦、小腦、腦干）l垂體垂體l甲狀腺甲狀腺l食管食管l胃胃l肝臟肝臟l腎臟腎臟l脾臟脾臟l氣管氣管l主動脈主動脈l附睪附睪l卵巢卵巢l前列腺前列腺l坐骨神經(jīng)坐骨神經(jīng)l眼（眼科檢查發(fā)現(xiàn)異常時）眼（眼科檢查發(fā)現(xiàn)異常時）l給藥局部給藥局部l淋巴結淋巴結l脊髓脊髓l胸腺胸腺l甲狀旁腺甲狀旁腺l唾液腺唾液腺l小腸和大腸小腸和大腸l膽囊膽囊l腎上腺腎上腺l胰腺胰腺l肺肺l心臟心臟l睪丸睪丸l子宮子宮l乳腺乳腺l膀胱膀胱l視神經(jīng)視神經(jīng)l骨髓骨髓注：為嚙齒類動物可不進行組織病理學檢查的組織或器

58、官注：為嚙齒類動物可不進行組織病理學檢查的組織或器官2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法87 器官重量降低，表示該器官萎縮或發(fā)育不良；器官重量降低，表示該器官萎縮或發(fā)育不良； 器官重量增加提示可能有充血、水腫、增生、肥大、酶誘導變器官重量增加提示可能有充血、水腫、增生、肥大、酶誘導變 化或新生物等?；蛐律锏?。 將動物處死后取出上述器官，除去附著的組織、除將動物處死后取出上述器官，除去附著的組織、除盡余血后立即稱重（盡余血后立即稱重（）。）。（二）測定指標（二）測定指標 觀察及測定指標觀察及測定指標 1. 1. 器官重量器官重量 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法882. 2.

59、 血液學血液學（二）測定指標（二）測定指標 u常規(guī)的血液學參數(shù)常規(guī)的血液學參數(shù)u骨髓涂片骨髓涂片觀察及測定指標觀察及測定指標 1. 1. 器官重量器官重量 2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法89年組織編寫年組織編寫 藥物研究技術指導原則藥物研究技術指導原則規(guī)定規(guī)定血液學指標血液學指標l紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)l紅細胞容積紅細胞容積l平均紅細胞血紅蛋白平均紅細胞血紅蛋白l網(wǎng)織紅細胞計數(shù)網(wǎng)織紅細胞計數(shù)l血小板計數(shù)血小板計數(shù)l血紅蛋白血紅蛋白l平均紅細胞容積平均紅細胞容積l平均紅細胞血紅蛋白濃度平均紅細胞血紅蛋白濃度l白細胞計數(shù)及分類白細胞計數(shù)及分類l凝血酶原時間凝血酶原時間紅細胞壓積紅細胞壓積

60、觀察及測定指標觀察及測定指標2022-1-31長期毒性作用及其試驗方法90 血液學指標觀察時間血液學指標觀察時間非嚙齒類動物非嚙齒類動物一般于整個試驗周期中每隔一般于整個試驗周期中每隔 1.5 2 個個月采血測定一次各項指標。月采血測定一次各項指標。嚙齒類動物嚙齒類動物試驗周期為試驗周期為 6 個月時，可于試驗中期、試驗末個月時，可于試驗中期、試驗末 期以及恢復期分別剖殺部分動物期以及恢復期分別剖殺部分動物 ( 約約 1/4 、 2/4 、 1/4)，進行各項檢查；進行各項檢查；試驗周期為試驗周期為 3 個月時，可于試驗未期以及恢復個月時，可于試驗未期以及恢復 期分別剖殺部分動物期分別剖殺部分