紫外可見分光光度法-實(shí)驗(yàn)技術(shù)（學(xué)習(xí)指南）

1、項(xiàng)目7紫外可見分光光度法7.5 紫外可見分光光度法實(shí)驗(yàn)技術(shù)內(nèi)容提要：（本章的主要內(nèi)容及知識結(jié)構(gòu)）紫外-分光光度計(jì)的的操作步驟1. 開啟電源進(jìn)行初始化開啟主機(jī)電源，分光光度計(jì)將按屏幕所顯示的項(xiàng)目進(jìn)行自檢和初始化，如下圖所示。所有項(xiàng)目檢測完畢，初始化結(jié)束，整個(gè)過程大約需要4min（若使用多池檢測需5min）。每個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行初始化操作時(shí)將被加亮顯示，當(dāng)初始化完成后，該項(xiàng)右邊的星標(biāo)也將加亮顯示。但是，如果檢測到任何異常，初始化過程將立即中止，星標(biāo)也不會加亮顯示。2屏幕顯示和觸摸鍵盤UV-1700的觸摸鍵盤圖可用數(shù)字鍵09和功能鍵F1F4選擇不同屏幕中的模式和設(shè)置。選擇時(shí)，按下相應(yīng)的數(shù)字鍵或功能鍵即可，無

2、START/STOP 鍵一旦參數(shù)設(shè)置完成，可用該鍵開始和停止測量過程。AUTO ZERO 鍵按該鍵，當(dāng)前波長的吸光度自動調(diào)整為0（100%T）。測量前，必須確保在樣品側(cè)和參比側(cè)中都放有盛有空白的比色池。GOTOWL 鍵該鍵可用來改變當(dāng)前的波長。ENTER 鍵輸入數(shù)值后，按該鍵確認(rèn)。Cursor 光標(biāo)鍵（-），）這組鍵可控制液晶顯示屏幕中光標(biāo)的左右移動。輸入數(shù)值時(shí)，左光標(biāo)鍵還可以用來輸入負(fù)值（-）。Function 功能鍵（F1F4）這組鍵的功能與液晶顯示屏幕下方所顯示的功能相對應(yīng)。RETURN 鍵按下該鍵可返回當(dāng)前屏幕的前一屏。MODE 鍵用該鍵可從每種測量模式的參數(shù)設(shè)置屏返回到主模式屏。需按

3、ENTER 鍵確認(rèn)。此外，輸入數(shù)值時(shí)，如波長設(shè)置或顯示模式等，必須按ENTER 鍵確認(rèn)輸入值。下面介紹每個(gè)鍵的基本功能，在不同屏幕下有一些鍵可能被賦予特殊的功能。Print 打印鍵用該鍵可輸出當(dāng)前屏幕顯示的硬拷貝。Numeric 數(shù)字鍵用該鍵可輸入數(shù)值？CE 鍵用該鍵可清除數(shù)值輸入錯(cuò)誤。按該鍵，已輸入的數(shù)值將被清除，可重新輸入正確的數(shù)值。模式選擇和共享操作初始化完成后即顯示模式選擇屏幕。注意事項(xiàng)1、比色皿使用時(shí)注意不要沾污或?qū)⒈壬蟮耐腹饷婺p，應(yīng)手持比色皿的毛面。2、待測液制備好后應(yīng)盡快測量，避免有色物質(zhì)分解，影響測量結(jié)果。3、測得的吸光度A 最好控制在0.20.8之間，超過1.0時(shí)要做適當(dāng)

4、稀釋。4、開關(guān)試樣室蓋時(shí)動作要輕緩。5、不要在儀器上方傾倒測試樣品，以免樣品污染儀器表面，損壞儀器。6、比色皿在盛裝樣品前，應(yīng)用所盛裝樣品沖洗兩次，測量結(jié)束后比色皿應(yīng)用蒸餾水清洗干凈后倒置晾干。若比色皿內(nèi)有顏色掛壁，可用無水乙醇浸泡清洗。7、向比色皿中加樣時(shí)，若樣品流到比色皿外壁時(shí)，應(yīng)以濾紙點(diǎn)干，鏡頭紙擦凈后測量，切忌用濾紙擦拭，以免比色皿出現(xiàn)劃痕。8、測定紫外波長時(shí)，需選用石英比色皿。9、測量過程中不可打開測量室的窗門，否則會影響測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。維護(hù)和保養(yǎng)1、儀器使用一定周期后內(nèi)部會積累一定量的塵埃最好由維修工程師或工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進(jìn)行除塵工作同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新

5、緊固對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔必要時(shí)對光路進(jìn)行校準(zhǔn)對機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑最后恢復(fù)原狀再進(jìn)行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄。2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一因此必須定期清潔保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件防塵。3、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕使金屬鏡面的光潔度下降引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等甚至儀器停止工作從而影響儀器壽命維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正應(yīng)具備四季恒濕的儀器室配置恒溫設(shè)備特別是地

6、處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室。本節(jié)習(xí)題：（不少于5題）1某物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)越大，則表明該物質(zhì)的濃度越大。2在紫外光譜中，同一物質(zhì)，濃度不同，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)相同；同一濃度，不同物質(zhì)，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)一般不同。3有色溶液的透光率隨著溶液濃度的增大而減小，所以透光率與溶液的濃度成反比關(guān)系；有色溶液的吸光度隨著溶液濃度的增大而增大，所以吸光度與溶液的濃度成正比關(guān)系。4朗伯特-比耳定律中，濃度C與吸光度A之間的關(guān)系是通過原點(diǎn)的一條直線。5朗伯特-比耳定律適用于所有均勻非散射的有色溶液。1。吸光系數(shù)是指在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度為1，液層厚度為1cm的吸光度。常用摩爾吸光系數(shù)和

7、百分吸光系數(shù)表示。吸光系數(shù)是吸光物質(zhì)的特性參數(shù)，是吸光物質(zhì)定性的重要參數(shù)，與吸光物質(zhì)的濃度無關(guān)。2。摩爾吸光系數(shù)與吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性、吸收光的波長有關(guān)。同一物質(zhì)，入射光波長不同，摩爾吸光系數(shù)不同。但紫外光譜反映的是分子母體的性質(zhì)，母體相同而取代基不同摩爾吸光系數(shù)可能相同也可能不同。所以同一物質(zhì)，濃度不同，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)相同；同一濃度，不同物質(zhì)，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)一般不同。3。有色溶液的透光率與溶液濃度之間的關(guān)系為： 或 由此可見：有色溶液的吸光度隨著溶液濃度的增大而增大，所以吸光度與溶液的濃度成正比關(guān)系。透光率隨著溶液濃度的增大而減小，有色溶液的透光率與溶液濃度之間成指數(shù)關(guān)系，但不成反比關(guān)系。4。朗伯特-比耳定律表明在一定條件下，當(dāng)一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時(shí)，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。即： 所以，從理論上講符合朗伯特-比耳定律吸光物質(zhì)濃度C與吸