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1、實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五 菜花中核酸的分離菜花中核酸的分離 和鑒定和鑒定一、核酸的分離一、核酸的分離 1. 稱取稱取10g菜花菜花剪碎剪碎加入加入10ml 95的乙醇的乙醇注意分三次添加)注意分三次添加)研磨研磨倒入離心管倒入離心管v=10000,離心離心6min 2. 棄去上清液棄去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml丙酮丙酮振蕩均振蕩均勻勻離心離心6min,v=10000 3. 棄去上清液棄去上清液沉淀在冰鹽浴中加入沉淀在冰鹽浴中加入10ml 5%的的HClO4 振蕩均勻振蕩均勻離心離心6min,v=10000 4. 棄去上清液棄去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml95%的乙醇的乙醇振蕩均勻振蕩均勻離心
2、離心6min,v=10000 5. 5. 棄去上清液棄去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml10ml丙酮丙酮振蕩均勻振蕩均勻離心離心6min,v=10000.6min,v=10000. 6.6.棄去上清液棄去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml10%10ml10%的的NaClNaCl溶液溶液振蕩均勻振蕩均勻在沸水浴中加熱在沸水浴中加熱15min15min冷卻冷卻離心離心5min,v=60005min,v=6000 7.7.將上清液倒入試管為提取物一將上清液倒入試管為提取物一沉淀中沉淀中加入加入5ml 0.5 mol/L 5ml 0.5 mol/L 的的HClO4 HClO4 在在7070水浴中加熱
3、水浴中加熱20min20min冷卻離心冷卻離心5min,v=60005min,v=6000 8.8.將上清液倒入試管為提取物二將上清液倒入試管為提取物二提取物提取物一二做好標(biāo)記一二做好標(biāo)記二、核酸的定性鑒定二、核酸的定性鑒定 1. 1.二苯胺反應(yīng)二苯胺反應(yīng)試管號(hào)試管號(hào)12345DW (ml)1DNA溶液溶液(ml)1RNA溶液溶液(ml)1提取物一提取物一(ml)1提取物二提取物二(ml)1二苯胺試劑二苯胺試劑(ml)22222沸水中加熱沸水中加熱10min的現(xiàn)象的現(xiàn)象 2. 2. 苔黑酚反應(yīng)苔黑酚反應(yīng)試管號(hào)試管號(hào)678910DW(ml)1DNA溶液(溶液(ml)1RNA溶液(溶液(ml)1提取物一(提取物一(ml)1提取物二(提取物二(ml)1FeCl3濃濃HCl溶液(溶液(ml)22222苔黑酚乙醇溶液(苔黑酚乙醇溶液(ml)0.20.2 0.20.2 0.2沸水中加熱沸水中加熱10min后的現(xiàn)象后
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