傳遞窗驗證方案

1、傳遞窗驗證方案Validation protocol of the delivery windows 編號Code： 版本Version： 編寫Prepared by:日期Date:審 核 人 日 期Reviewed by Data批準Approved by:日期Date:變更記錄Change Log版本號Version變更描敘Description變更細節(jié)Section changed批準日期Release Date目 錄Contents1 簡介 42 實施計劃 43 驗證小組成員 44 儀器及用具 45 菌株和培養(yǎng)基 56 安裝確認 57 運行確認 58 性能確認 69 再驗證 810 修

2、改事項 811 相關(guān)SOP 812 附件 81 簡介 傳遞窗是一種潔凈室的輔助設備，主要用于潔凈區(qū)與潔凈區(qū)之間，潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間小件物品的傳遞，以減少潔凈室的開門次數(shù)，使?jié)崈羰业奈廴窘档偷阶畹统潭?。傳遞窗內(nèi)安裝有紫外燈，物品經(jīng)紫外線照射消毒后進入潔凈區(qū)。紫外線是一種電磁輻射，波長190350nm，其中以253.7nm的殺菌力最強，可使DNA鏈上相鄰嘧啶堿基之間形成二聚體，抑制DNA的復制，導致突變或死亡。紫外線的殺菌力與紫外線強度、照射時間、溫度和濕度等因素有關(guān)。本方案包括該設備的安裝確認、運行確認和性能確認等內(nèi)容。在確認過程中出現(xiàn)任何偏差，必須及時解決偏差之后再進行下一步的確認。實施內(nèi)容

3、時間安排安裝確認運行確認性能確認2 實施計 劃 3 驗證小組 成員 部門姓名職 責QA負責驗證方案、驗證報告的批準負責驗證方案、驗證報告的審核QC負責驗證方案、驗證報告的審核，指導和監(jiān)督方案的實施負責驗證方案、驗證報告的起草，參加方案的實施負責驗證方案、驗證報告的審核，協(xié)助方案的實施4 儀器 及用具 名稱型號或規(guī)格校驗單位校驗編號有效期細菌培養(yǎng)箱GNP-9270型廣州市計量所霉菌培養(yǎng)箱SHP-150型廣州市計量所數(shù)顯式溫濕度計DWS508D廣州市計量所紫外線強度測定儀TN-2254廣州市計量所凈化工作臺HS-1300-V型電動混勻器G560E移液器0.510ul移液器1001000ul5 菌株

4、和培養(yǎng)基 名稱批號生產(chǎn)廠家營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基金黃色葡萄球 CMCC（B）26003枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501大腸桿菌CMCC（B）44102白色念珠菌CMCC（F）980016 安裝確認 由供應商技術(shù)人員作為主要安裝人員，工程部人員協(xié)助安裝。安裝過程中對裝置及其工作狀態(tài)進行檢查。若確認過程中發(fā)現(xiàn)因為紫外燈管不符合要求而造成偏差，工程部人員負責紫外燈管的申購與更換。將安裝確認結(jié)果記錄于附件1和附件2。確認項目描 敘工作環(huán)境確認傳遞窗應安裝在非潔凈區(qū)（培養(yǎng)室）與潔凈區(qū)（潔凈走廊）之間。非潔凈區(qū)溫度應為1827；相對濕度應為40%80%。電源確認設

5、備的電源應正確連接，工作電源：AC （220±22）V。裝置確認確認紫外燈管功率。紫外燈管應正常，無損壞，匹配，緊密連接。傳遞窗側(cè)門墊圈應配套、密合、完好。傳遞窗內(nèi)部與紫外燈管表面應清潔，表面無塵土。傳遞窗內(nèi)表面材質(zhì)應為不銹鋼，平整光潔耐磨。備件確認是否有相同型號規(guī)格的紫外燈管備用。7 運行 確認 運行確認在安裝確認之后進行，若安裝確認出現(xiàn)偏差，須在解決偏差之后進行。通過對傳遞窗進行試運行，以證明設備各項技術(shù)參數(shù)和功能能達到本公司設定要求。將運行確認結(jié)果記錄于附件3和附件4。7.1 SOP確認：確認是否有傳遞窗使用的SOP，作為傳遞窗使用操作的技術(shù)支持與指導。驗證全過程必須嚴格按照此

6、SOP對傳遞窗進行操作。7.2 設備操作功能確認：逐項確認各項操作功能，結(jié)果均應符合要求。7.3 互鎖確認: 兩側(cè)門設有互鎖裝置，確保兩側(cè)門不能同時處于開啟狀態(tài)。7.4 輻照強度測定：開啟紫外燈5min后，用中心波長為253.7nm的紫外線強度測定儀在燈管下方垂直中心操作面處測量其輻照度值（uW/cm2）。普通型或低臭氧型直管紫外燈，新燈管的輻照度值應為：功率10W，65 uW/cm2 ；功率15W，145 uW/cm2 。使用中的燈管其輻照度值：功率10W，45 uW/cm2 ；功率15W，100 uW/cm2 ，低于此值者應予以更換。7.5 紫外強度分布：開啟紫外燈5min后，在傳遞窗底部

7、測量中央及四角5個位置的紫外線強度（uW/cm2），確定紫外線強度最弱位置。以紫外線強度最弱位置達到所需照射劑量的時間作為消毒合格時間。潔凈區(qū) 5非潔凈區(qū)8 性能確認 確認紫外燈對細菌及其芽孢和真菌的殺滅效果。性能確認在運行確認之后進行，若運行確認出現(xiàn)偏差，須在偏差解決之后進行。8.1 培養(yǎng)基的制備營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉 31.0g純化水 1000ml 配制：稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉置適宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至7.1±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121×15分鐘。 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基配方：改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉 42.0g

8、純化水 1000ml 配制：稱取改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115×20分鐘。營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 20g純化水 1000ml 配制：稱取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20克，加1000ml純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121×15分鐘。改良馬丁培養(yǎng)基配方：改良馬丁培養(yǎng)基粉 28.0g純化水 1000ml 配制：稱取改良馬丁培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌1

9、15×20分鐘。8.2 菌懸液的制備接種金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,3035培養(yǎng)1824小時；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中,2328培養(yǎng)1824小時。細菌芽孢懸液的制備：取枯草芽孢桿菌增菌液適量至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面，使菌液布滿營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 斜面，3035培養(yǎng)57天。用接種環(huán)取菌樣少許涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在顯微鏡（油鏡）下進行鏡檢。當芽孢形成率達95以上時，即可進行以下處理。否則，應在室溫下放置一定時間，直至達到上述芽孢形成率后再進行以下處理。取適量無菌水于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面，以L棒輕輕推刮下菌苔。吸出第一批洗下 的菌

10、懸液，再取適量無菌水于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面，重復洗菌一遍。將第一和第二批洗下的菌懸液集中于一含玻璃珠的無菌三角燒瓶內(nèi)，振搖5min，打碎菌塊，使成均勻的芽孢懸液。將芽孢液放于80水浴中10min（或60，30min），以殺滅殘余的細菌繁殖體。 待冷至室溫后，保存于4冰箱中備用。有效使用期為半年。8.2 稀釋液1蛋白胨PBS溶液：取磷酸二氫鉀1.36g、磷酸氫二鈉2.83g、蛋白胨10.0g，加水1000ml，微溫溶解，分裝，置高壓滅菌器121×30分鐘滅菌。8.3 菌片的制備試驗中使用的菌片是以菌液滴加于載體上制成（1.0cm×1.0cm的不銹鋼片）。所 用載體染菌前應進行脫

11、脂處理。脫脂方法如下：將載體放在含肥皂的水中煮沸30min；純化水洗凈；純化水煮沸10min；用純化水漂洗至pH呈中性；晾干備用。載體經(jīng)滅菌后使用滴染法染菌。將滅菌載體平放于滅菌平皿內(nèi)，每個載體滴注 10ul菌懸液，用10ul移液器接滅菌塑料吸頭，滴染菌液，并用接種環(huán)涂勻整個載體表面。滴染菌液后，染菌載體可置超凈臺上晾干后使用。每個菌片的染菌量即回收菌量應為1×1055×106 cfu/片。8.4 載體定量消毒試驗取4種菌染菌載片各4個。開啟紫外燈5min后，將16個染菌載片平放于無菌平 皿內(nèi)，水平放于紫外線強度最弱的位置處照射，于4個不同間隔時間（15min、30 min

12、、45 min、60min）各取出1個染菌玻片，分別投入4個盛有10ml稀釋液的試管中，用電動混勻器震蕩20s或振打80次，洗脫載片上的菌體。取洗脫液或其稀釋液1ml，作平板傾注。細菌放3035培養(yǎng)48小時做活菌計 數(shù)，真菌放2328培養(yǎng)72小時做活菌計數(shù)。陽性對照，除不做照射處理外，操作同上。殺滅對數(shù)值計算殺滅對數(shù)值（KL）對照組活菌濃度對數(shù)值-試驗組活菌濃度對數(shù)值在照射強度最弱處，對細菌及其芽孢和真菌的殺滅對數(shù)值3所需的時間即為消毒合格時間。其它傳遞窗，確定最弱照射強度后，根據(jù)所需照射劑量確定消毒合格時間。照射劑量（uW·s/cm2 ）紫外線照射強度（uW/cm2）×時間（s）將性能確認結(jié)果記錄于附件5。8 再驗證 8.4 傳遞窗構(gòu)造或紫外燈管安裝位置發(fā)生改變時，需進行再驗證。8.5 若無任何改變或偏差時，每6個月對該系統(tǒng)進行紫外燈強度確認。9 修改事項 在實施過程中，如果方案需要修改，必須提交書面報告，闡述修改的原因、修改的內(nèi)容，并經(jīng)