高密度脂蛋白膽固醇HDL

1、實用標準文案高密度脂蛋白膽固醇（ HDL-C ）測定1. 第 1 頁頁首內(nèi)容血清高密度膽固醇（ HDL-C ）測定（直接法）天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗科操作規(guī)程文件號： CZGC/SH/043第四版共 3 頁本規(guī)程每 2 年復審一次復審日期： 2013 年 5 月 1 日復審人：陳玉良（簽名）規(guī)程編寫者：崔樹明審批者：陳玉良批準日期： 2013 年 5 月 6 日實施日期： 2013 年 5 月 10 日文件分發(fā)部門和 / 或個人：檢驗科醫(yī)務科；保管者：王文志（簽名）院長辦公室；保管者：劉會芹（簽名）院檔案室；保管者：劉會芹（簽名）檢驗科；主任：陳玉良（簽名）臨床化學檢驗室：崔樹明（簽名）2.

2、原理精彩文檔實用標準文案本方法是雙試劑測定，第一種試劑包含聚合物和多聚陰離子，它們附著在 LDL，VLDL和乳糜微粒的表面。這些脂蛋白甚至在清潔劑存在的情況下都是穩(wěn)定的，清潔劑是作為第二種試劑的一部分被添加進去的，另外一部分是膽固醇試劑剩下的成分。另一方面，HDL 顆粒在聚合物和多聚陰離子存在的情況下是不穩(wěn)定的，它們被清潔劑溶解。因此，只有 HDL-C 作用于膽固醇測定。膽固醇脂酶高密度脂蛋白膽固醇脂 +H2O-膽固醇 + 脂肪酸膽固醇氧化酶膽固醇 +O2-膽烯酮 + H 2O2過氧化物酶H 2 O2+4- 氨基安替比林 +DSBmT-醌亞胺 +H2O3. 樣本采集與處理3.1 受檢者（體檢對

3、象或病人）的準備：除總膽固醇不一定用空腹血外，測定甘油三酯、脂蛋白與載脂蛋白的病人必須空腹12h ，不飲酒 24h 后采集血樣。對于體檢對象抽血前應有 2 周時間保持平時的飲食習慣，近期內(nèi)體重穩(wěn)定，無急性病、外傷、手術(shù)等意外情況。妊娠后期各項血脂都會增高，應在產(chǎn)后或終哺乳后3 個月檢驗才能反映其基本血脂水平。注意有無應用影響血脂的藥物，如降血脂藥、避孕藥、噻嗪類利尿劑、受體阻斷劑、免役抑制劑、某些降壓藥、降糖藥、胰島素及其他激素制劑等，檢驗以前應根據(jù)所用藥物的特性停止用藥數(shù)天或數(shù)周，否則應記錄用藥情況。對體檢對象應做前瞻性觀察者，還應注意采血的季節(jié)，因為血脂水平有季節(jié)性變動，為了前后比較應在每

4、年同一季精彩文檔實用標準文案節(jié)檢驗。應囑體檢對象在抽血前24h 內(nèi)不做劇烈運動。3.2 靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，因此影響血脂水平。 例如：站立 5min 可使血脂濃度提高5 ，15min提高 16 ，故在采血前至少應靜坐 5min 。一般從肘靜脈采血，使用止血帶的時間不超過1min ，穿刺成功后立即松開止血帶。靜脈阻滯5min 可使甘油三酯增高10 -15 。采血試管采用真空采血管。3.3 樣本類型：采用無溶血的血清。如用血漿，宜采用EDTANa 2（ 1mg/ml）抗凝。抗凝血漿中的總膽固醇和甘油三酯水平比血清中約低3 。EDTA 用量越

5、多，血漿水平偏低越明顯。但肝素抗凝不影響血漿中水平。3.4 樣本處理：血標本應盡快送檢驗室。室溫下放置30-45min后離心分離血清或血漿置樣品杯中待測。若不能及時檢測，置于潔凈試管中加塞后4 保存，可穩(wěn)定4 天。4 試劑4.1 試劑：本室使用日本積水公司生產(chǎn)的液體雙試劑試劑盒，試劑為淺粉紅色透明液體，直接使用。批號為KB573 。4.2 試劑組成：試劑主要成分如下：MES 緩沖液（ PH6.5 ）100 mmol/L膽固醇氧化酶0.2U/mL膽固醇脂酶0.15 U/mL過氧化物酶0.62 U/mLDSBmT0.25mmol/L4 氨基安替比林0.5mmol/L精彩文檔實用標準文案多聚陰離子&

6、gt;0.02 %清潔劑>0.2 %其中含有保護劑。注意： 1. 此試劑為體外診斷用。2. 不要吸入。吞服有害。4.3試劑的儲存與穩(wěn)定性：未開封的試劑于2-8 保存，穩(wěn)定至有效期。4.4校準血清： BECKMAN 公司提供的多項定標液，產(chǎn)品批號為0115 。為凍干品，未開封者 2-8 保存至有效期。臨用前用 5ml去離子水復溶，放置30min ，混勻待完全溶解后使用。復溶的血清2-8 可穩(wěn)定 4 天。4.5 質(zhì)控品：RONDOX 公司提供，LECEL-2 及 LEVEL-3 ，產(chǎn)品批號為 759UN 及 551ue 。凍干品，未開封者 2-8 保存至有效期。使用前用5ml 去離子水復溶，

7、 30 分鐘后輕輕混勻，待完全溶解后使用。復溶后的血清2-8 可穩(wěn)定 4 天。每天隨樣品一起測定，測定值應在允許范圍內(nèi)。5 儀器奧林巴斯 AU2700 全自動生化分析儀6 操作6.1 AU2700開機6.1.1. 檢查 W1 、 W2 清洗液及稀釋液有足夠量，不足時補充；6.1.2. 打開水機水源的自來水閥門，按水機前面板的（POWER ON ）鍵，開啟水機；6.1.3. 按分析儀前面板的（ POWER ON ）鍵，開啟分析儀主機；6.1.4. 確認打印機為開機并處于聯(lián)機狀態(tài)，開啟中文機；6.1.5. 確認儀器上在線試劑的位置是否正確、數(shù)量（體積）是否充足，不足時添加，并在精彩文檔實用標準文案

8、系統(tǒng)狀態(tài)下的試劑狀態(tài)檢查試劑。6.2.開始分析6.2.1. 將蘭架第一位置放水，黃架相應位置放入校準液；6.2.2. 將蘭架、黃架、白色標本架放入樣品臺上；6.2.3. 用鼠標點擊在屏幕最上方（開始分析）圖標；6.2.4. 點擊屏下方（ EXIT）圖標，退到主屏幕。6.3 分析參數(shù)樣品體積2.3ul溫度37 試劑 1體積132ul方法終點法試劑 2體積25ul單位mmol/L波長520nm定標方式AB讀點0-270-107 計算：無須手工計算，結(jié)果自動以mmol/L打印。報告結(jié)果：異常結(jié)果的處理程序：根據(jù)儀器參數(shù)的參考范圍會打印異常標志，以“H”、“ L”表示，“H ”表示高于正常，“ L”表

9、示低于正常。報告格式：以自動打印的報告單報告8 操作性能8.1 準確度：不準確度 4 。精彩文檔實用標準文案8.2 精密度：批內(nèi)瓶間差CV3 ，批間差 CV4。8.3 線性范圍：本法線性范圍可達3.0mmol/L，如果超出線性范圍，以生理鹽水稀釋再做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8.4 干擾物質(zhì)乳糜乳糜達到 1000mg/dL時影響小于 8%溶血血紅蛋白達到 500mg/dL時影響小于 1%膽紅素膽紅素達到 40mg/dL時影響小于 1%抗壞血酸抗壞血酸達到20mg/dL時影響小于 1%9.參考范圍人群血脂水平主要取決于生活因素，特別是飲食影響，應根據(jù)冠心病流行病學研究及臨床經(jīng)驗統(tǒng)一制定高密度膽固醇劃分標準。參考值：0.6-1.58 mmol/L10. 臨床意義不同的脂蛋白分類在冠心病有非常明顯和不同的效果。在脂類代謝中，HDL 的主要作用是通過一個被稱為從外圍組織到肝臟吸收和運輸膽固醇，低 HDL-C 水平與冠心病的風險增加有關(guān)。因此，血清 HDL-C 的測定對于識別高風險病人是一個有用的工具。HDL-C與冠心病發(fā)病成負相關(guān)， HDL-C 低于 0.9mmol/L是冠心病危險因素， HDL-C 增高（大于 1.55mmol/L ）被認為是冠心病的“負”危險因素。 HDL-C 下降也多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬變等患者。高 TG 血癥往往伴以低 HDL-C 。肥胖者 HDL-C 也