實驗室生物安全標準操作規(guī)程

1、word可編輯實驗室生物平安標準操作規(guī)程HYEY-PGC-2022第三版 目 錄HYEY-PGC01-2022實驗室人員進出實驗室HYEY-PGC02-2022實驗室檢測樣品采集HYEY-PGC03-2022實驗室檢測樣品包裝和運送HYEY-PGC04-2022實驗室檢測樣品接收HYEY-PGC05-2022樣品檢測操作規(guī)程HYEY-PGC06-2022電氣設(shè)備操作規(guī)程HYEY-PGC07-2022實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程HYEY-PGC08-2022無菌間使用標準操作規(guī)程HYEY-PGC09-2022實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程HYEY-PGC10-2022實驗室消毒標準操作程序HYEY

2、-PGC11-2022實驗室意外事故處理實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC01-2022檢驗科實驗室人員進出實驗室第 1 頁 共 1 頁第3版 第 0 次 修訂201年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的制定檢驗科實驗室人員進出的標準操作程序，保障實驗室生物平安。2 適用圍適用于檢驗科實驗室人員進出程序。3 職責實驗室工作人員執(zhí)行本程序的規(guī)定。實驗室負責人負責監(jiān)督執(zhí)行。4 規(guī)程要求4.1進入程序?qū)嶒炇胰藛T需將外衣掛入防止將外衣與工作服混放，穿上工作服，按要求戴手套、口罩等防護用品方可進入實驗室。4.2 退出程序工作結(jié)束后，實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定

3、容器。先用0.5%新潔爾滅對手進行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定區(qū)域脫下工作服，必要時進行紫外消毒。實驗室人員退出實驗室后，必須將實驗室入口門關(guān)好，方可離開實驗室。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC02-2022實驗室檢測樣品采集第 1 頁 共 4 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的為保障檢測實驗的順利進行，規(guī)采樣程序，防止病原微生物在實驗室采樣過程中產(chǎn)生污染。2 適用圍適用于實驗室采集、處理動物樣品。3 職責3.1 采集檢測樣品的工作人員在采集過程中應當防止病原擴散，并對樣本的來源、采集過程和處理方法等作詳細記錄。3.2 檢驗人員必須

4、嚴格按照本操作規(guī)程操作，不可擅自做出超出本規(guī)程的操作，所有實驗人員對所從事的工作負相應的責任。4 過程要求4.1 工作條件4.1.1 具有采集、處理樣品所需要的生物平安防護設(shè)備；4.1.2 具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員；4.1.3 具有有效的防止病原擴散的措施；4.1.4 具有保證檢測樣品質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。4.2實驗材料準備滅菌的解剖器械剪刀、鑷子、手術(shù)刀、大刀、斧頭等、滅菌試管、平皿或自封袋、載玻片、棉簽、營養(yǎng)肉湯、30%、50%甘油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS病毒保存液、50甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP管、記號筆、簽字筆、防護服、無

5、粉乳膠手套、防護口罩、鉛筆、空白標簽紙、膠布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。4.3 活畜樣品的采集4.3.1 血清樣品的采集實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC03-2022實驗室檢測樣品采集第 2 頁 共 4 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施4.3.1.1 采血方法對采血部位的皮膚先剃拔毛，碘酊消毒， 75%的酒精消毒，待枯燥后采血。采血方法推行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血，采血過程嚴格無菌。4.3.1.2 采血數(shù)量單一病種抗體監(jiān)測的每頭只采集23mL全血，多病種抗體檢測的每頭只采集51

6、0mL全血。4.3.1.3 全血保存采集好的全血轉(zhuǎn)入盛血試管，斜面存放，室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱，送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超過10h。4.3.1.4 血清別離 凝固全血在室溫24h后，有血清析出時，用無菌針剝離血凝塊，然后放入4冰箱48h后，待大量血清析出時，吸出血清。必要時經(jīng)離心機3000rpm 、30min離心，吸出血清。別離的血清，一般不加防腐劑。血清假設(shè)在12周即可檢驗，可放在4冰箱保存；如果保存時間較長，應放在-20-80冰箱保存。運送血清時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運送。4.3.2 全血樣品的采集 全血采集后應直接注入盛有抗凝劑的試管中，立即搖動，充分混

7、合。也可將全血液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中，立即連續(xù)振蕩脫纖維蛋白。4.4 活禽樣品的采集咽喉拭子的采集：將棉簽插入喉頭口及上顎裂處來回刮35次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的采集：將棉簽插入取泄殖腔轉(zhuǎn)23圈并沾取少量糞便，再將咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有0.81.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加蓋，編號。4.5 病死屠宰畜禽樣品的采集4.5.1 解剖前檢查實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC03-2022實驗室檢測樣品采集第 3 頁 共 4 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物，解剖之前應作臨床檢查，疑似炭疽病的應采

8、血、鏡檢，排除炭疽病時，方可解剖。動物死亡后應在6h進行剖檢。解剖人員要做好自我防護工作。4.5.2 肝、脾、腎、淋巴結(jié)、肺和牛、馬心臟樣品的采集 在肝、脾、腎、淋巴結(jié)、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取23cm3的小方塊，分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟，置于自封袋中。細菌別離樣品的采集可用燒紅的刀片燙烙臟器外表，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的鉑金耳伸入孔，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養(yǎng)基上。4.5.3 腦、脊髓樣品的采集取腦、脊髓23cm3浸入50%甘油鹽水中或?qū)⒄麄€頭部豬、牛、馬除外割下，用消毒紗布包裹，置于不漏水的容器中。4.5.4 腸、腸容物及糞便樣品

9、的采集腸樣品的采集：選擇病變最嚴重的局部，將其中的容物棄去，用滅菌的生理鹽水輕輕沖洗后，置于試管中。腸容物樣品的采集：燒烙腸壁外表，用吸管扎穿腸壁，從腸腔吸取腸容物，放入盛有30%甘油鹽水中或者直接將帶有糞便的腸管兩端結(jié)扎，從兩端剪斷。糞便樣品的采集：用棉簽插到直腸黏膜外表采集糞便，然后將拭子放入盛有30%甘油鹽水中。液體病料樣品的采集采集膽汁、膿、粘液、關(guān)節(jié)液、水泡液等樣品時，用藥物或燙烙法消毒采樣部位，用滅菌吸管毛細吸管、注射器經(jīng)消毒部位插入，吸取部液體，然后將病料注入滅菌試管中，加蓋。也可用接種環(huán)經(jīng)消毒部位插入，提取病料直接接種在培養(yǎng)基上。4.5.6 胎兒樣品的采集取流產(chǎn)后的整個胎兒，裝

10、入自封袋或不透水塑料薄膜中。4.5.7 皮膚樣品的采集 用清水清洗病變皮膚后，取病變皮膚35g放入滅菌小瓶中，加適量50甘油磷實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC03-2022實驗室檢測樣品采集第 4 頁 共 4 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施酸鹽緩沖液(pH7.4)，加蓋密封。4.5.8 死屠宰禽樣品的采集死屠宰禽樣品的采集除按上述方法采集，也可將整個死禽裝入不透水塑料薄膜袋或自封袋中或其他容器。4.6 組織樣品采集完后的無害化處理活畜禽、病死畜禽組織樣品采集完后，應做好樣品外包裝和環(huán)境消毒以及病死畜禽及其產(chǎn)品的無害化處理。4.7 樣品編號

11、、抽樣單填寫4.7.1 樣品編號每頭動物的不同部位的組織樣品應單獨包裝。包裝好后，在樣品袋或平皿外貼上標簽，標簽注明樣品名、樣品編號、采樣日期等。采集好不同部位的樣品后，同一動物的樣品集中包裝。4.7.2 采樣單填寫可根據(jù)具體要求填寫。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC03-2022實驗室檢測樣品包裝和運送第 1 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的維護檢測樣品的質(zhì)量，防止病原的泄漏和擴散，保障樣品檢測的順利開展。2 適用圍適用于檢測樣品的包裝和運送。3 職責3.1 操作者必須嚴格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，

12、所有實驗人員對所從事的工作負相應的責任。3.2實驗室負責人負有對樣品包裝、運輸?shù)谋O(jiān)督和管理職責，并監(jiān)督檢查相關(guān)工作人員的平安工作程序和行為。4 過程要求擬運輸?shù)臉悠?，要求嚴密包裝，外表加以消毒，編號、登記后，貼上“生物危險標識，并嚴防標識脫落。樣品必須經(jīng)三層包裝。4.1 樣品的包裝4.1.1 包裝4.1.1.1 必須是不透水、防泄漏的主容器，保證完全密封。4.1.1.2 必須是結(jié)實、不透水和防泄漏的輔助包裝。4.1.1.3 必須在主容器和輔助包裝之間填充吸附材料。吸附材料必須充足，能夠吸收所有的裝物。多個主容器裝入一個輔助包裝時，必須將它們分別包裝。4.1.1.4 主容器的外表貼上標簽，注明樣

13、品類別、編號、名稱、數(shù)量等信息。4.1.1.5 相關(guān)文件，例如毒種或樣本數(shù)量表格、危險性聲明、信件、毒種或樣本鑒定資料、發(fā)送者和接收者的信息等應當放入一個防水袋中，并貼在輔助包裝的外面。4.1.2 外包裝4.1.2.1 外包裝的強度應當充分滿足對于其容器、重量及預期使用方式的要求。4.1.2.2 外包裝應當印上生物危險標識。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC03-2022實驗室檢測樣品包裝和運送第 2 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施4.1.3 包裝要求4.1.3.1 液體或者固體樣品在輔助包裝周圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑，

14、或者按照規(guī)定將冷凍劑放在由一個或者多個完整包裝件組成的合成包裝件中，部要有支撐物，干冰或者干冰消耗掉以后，仍可以把輔助包裝固定在原位置上。如果使用冰，包裝必須不透水；如果使用干冰，外包裝必須能排出二氧化碳氣體；如果使用冷凍劑，主容器和輔助包裝必須保持良好的性能，在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運輸中的溫度和壓力。4.1.3.2 凍干樣品主容器必須是火焰封口的玻璃安瓿或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在輔助包裝周圍還必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC04-2022實驗室檢測樣品接收第 1 頁 共 1 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1

15、月20日實施1 目的規(guī)接收檢測樣品，保證生物平安。2 適用圍適用于送檢樣品的交接管理。3 職責 專人負責接收樣品和接樣的生物平安。4 過程要求4.1檢測樣品由專人接收，在接收送檢樣品時應作好樣品登記，填寫 樣品接收登記表 ,并對樣品進行符合性檢查，檢查包括： (1) 樣品包裝、標志及外觀是否完好；(2) 對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數(shù)量、性狀等信息； (3) 樣品是否損壞、污染或已過有效期。 4.2接樣人進行樣品登記、保存后，報告實驗室負責人安排檢測工作。4.3 檢驗后的剩余樣品，由樣品保管人負責留存。 實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC05-2022樣品檢測操作規(guī)程

16、第 1 頁 共 1 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的為規(guī)樣品的檢測，特制定本規(guī)程。2 適用圍適用不同待檢樣品的檢測。3 職責3.1 實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行樣品的檢測。3.2 實驗室負責人負責監(jiān)督實驗室工作人員樣品的檢測工作。4 過程要求樣品的檢測方法應采用 作業(yè)指導書-檢測標準 GTCADC-ZYBZ-2022規(guī)定的方法。5. 相關(guān)文件 作業(yè)指導書-檢測標準 GTCADC-ZYBZ-2022實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC06-2022電氣設(shè)備操作規(guī)程第 1 頁 共 1 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)

17、布/1月20日實施1 目的為規(guī)實驗室電氣設(shè)備的使用和維護，特制定本規(guī)程。2 適用圍適用于電氣設(shè)備的操作和維護。3 職責實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行使用電氣設(shè)備。4 過程要求4.1實驗室工作人員必須熟悉儀器的性能、用途、使用方法，嚴格按照說明書使用，遵守儀器操作規(guī)程。4.2儀器使用過程中發(fā)生故障必須立即停止使用，并報告實驗室負責人，及時查找原因，盡快排除，并登記。4.3使用完畢必須對使用過的儀器設(shè)備按相關(guān)要求去除污染，以減少污染風險。5 相關(guān)文件 作業(yè)指導書-儀器設(shè)備操作規(guī)程 (GTCADC-ZYGC-2022)實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC07-2022實驗室消毒劑配制標

18、準操作規(guī)程第 1 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的規(guī)實驗室消毒劑配制，保證消毒液的有效性和實驗室生物平安。2 適用圍適用于檢驗科實驗室常用消毒劑的配制。3 職責實驗室工作人員負責常用消毒劑的配制。4 過程要求4.1 消毒劑配制4.1.1 配制前，實驗室工作人員應洗凈配制容器及量具，自然晾干。按試劑配制的配方和配質(zhì)量量取所需藥品。按配制要求的先后順序參加藥品，攪拌均勻配制試劑。4.3 配制過程產(chǎn)熱的試劑待自然冷卻后分裝，并將填寫好品名、濃度、配制時間、有效期的標簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及考前須知見下表1。實驗室生物

19、平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC07-2022實驗室消毒劑配制標準操作規(guī)程第 2 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施表1 常用消毒劑種類和配制方法表消毒劑名稱用途配制方法備注0.2%新潔爾滅手消毒，儀器外表消毒等量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器中，參加2400mL純化水攪拌混勻。2%NaOH溶液原位消毒稱取20gNaOH固體，緩慢參加純化水定容到1000mL。強堿pH值大于1375%乙醇手外表消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到1000mL。15%18%過氧乙酸實驗室薰蒸消毒冰醋酸H2O2濃H2SO4按體積比140.060.02

20、.1配制。根據(jù)需要量分別量取所需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制容器中攪拌均勻。使用時可參加催化劑高錳酸鉀或加熱。配制好的過氧乙酸需室溫放置48h后使用。超過20%的過氧乙酸會發(fā)生爆炸。一周用完。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC08-2022無菌間使用標準操作規(guī)程第 1 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的確保無菌室環(huán)境的無菌狀態(tài)。2 適用圍適用于無菌間空氣微生物監(jiān)測。3 職責實驗室工作人員負責實驗室空氣微生物監(jiān)測和實施。4 過程要求4.1實驗室工作人員在進無菌間之前，應先用2%石碳酸或來爾對手進行浸泡消毒。4.2 緩沖

21、間在每次使用前，應先翻開紫外燈，紫外照射30 min；工作人員在進入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。檢驗用的有關(guān)器材待檢品除外，搬入無菌室前必須分別進行滅菌消毒。4.3 將無菌間和生物平安柜的紫外燈翻開照射30min后，才能進行工作。4.4 實驗完畢后，用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物平安柜臺面，翻開生物平安柜紫外燈，照射30min。同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并翻開，照射30min。4.5 工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。4.6 適時應對無菌間進行熏蒸消毒。4.7 每月應對無菌間進行一次無菌檢查記錄4.7.1 營養(yǎng)瓊脂平板的制備按營養(yǎng)瓊脂說明書配制營養(yǎng)瓊

22、脂，12015min高壓滅菌后，冷卻到50左右傾倒于9cm的平板。待瓊脂凝固后，放37 48h 培養(yǎng)，無菌生長，方可以使用。4.7.2 沉降菌數(shù)測定先翻開無菌室紫外燈照射30min后，將備妥的營養(yǎng)瓊脂平板5個。以無菌方式移入操作間，置四個角落和中央各1個，開蓋，暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)48h，取出檢查。分別數(shù)出5個平板的生長菌落數(shù)并得出5個平板的平均菌落數(shù)。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC08-2022無菌間使用標準操作規(guī)程第 2 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施 4.7.3結(jié)果判定無菌室的潔凈級別應到達10

23、000級，即在進行沉降菌數(shù)測定時，平均菌落數(shù)應小于或等于 3個90mm，0.5h。如所測得的平均菌落數(shù)小于3個，那么證明該無菌室無菌程度符合要求，否那么該無菌室的無菌程度不符合要求，需要對無菌間進行徹底消毒，直至重復檢查符合要求為止。 實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC09-2022實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程第 1 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的制定實驗室廢棄物平安處理操作規(guī)程，保障實驗室生物平安。2 適用圍適用于實驗室廢棄物的處理。3 職責3.1 實驗室工作人員嚴格遵守本規(guī)程，并對所從事的工作負有生物平安責任。3.2

24、 實驗室負責人負有監(jiān)督和管理責任。4 過程要求4.1 實驗室工作人員做好個人防護。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。4.2 實驗室廢棄物使用防滲專用包裝容器袋或者防銳器穿透密閉容器收集，及時進行無害化處理，并做好實驗室廢棄物處理記錄。4.3 廢棄物分類處理4.3.1 感染性廢棄物處理 培養(yǎng)基、標本和菌毒種保存液、血液、血清、臨床標本等感染性廢棄物須進行壓力蒸汽滅菌。用過的一次性實驗用品包括手套、口罩、帽子等及試管、吸管、移液器吸頭等感染性廢棄物可進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24h。4.3.2 損傷性廢棄物處理針頭、縫合針、解剖刀、手術(shù)刀、備皮刀、手術(shù)鋸，試驗玻片、玻璃試管、玻璃安瓿等能夠刺傷

25、或割傷人體的廢棄的實驗利銳器等損傷性廢棄物需放入符合要求的利器盒里，容器裝滿3/4后封蓋，進行高壓蒸汽滅菌處理。4.3.3 藥物性廢棄物處理過期、淘汰、變質(zhì)或者被污染的診斷試劑可采用壓力蒸汽滅菌處理。4.3.4 病理性廢棄物處理動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器袋包裝好外包裝進行徹底的消毒處理，按要求進行燃燒、深埋或送往無害化處理場處理。做好廢棄物處實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC09-2022實驗室廢棄物處理標準操作規(guī)程第 2 頁 共 2 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施理記錄。 化學品廢棄按組分收集后，倒入專用化學廢棄物收集桶，

26、集中處理。實驗室生物平安標準操作規(guī)程SOPHYEY-PGC10-2022實驗室消毒標準操作規(guī)程第 1 頁 共 1 頁第3版 第 0 次 修訂2022年 1月 11日發(fā)布/1月20日實施1 目的保護實驗室的生物平安，防止病原逃逸。2 適用圍實驗室日常清潔，實驗過程中產(chǎn)生的污染廢棄物、使用過的防護裝備及設(shè)施設(shè)備等的消毒。3 職責實驗室工作人員按照本標準進行日常消毒。4 過程要求 4.1 儀器設(shè)備外表：用0.2%新潔爾或0.1%0.2%有效氯消毒液擦拭，30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。4.2 廢棄的病毒材料和操作過程中使用的一次性耗材先置于2%NaOH溶液浸泡2h，按照廢棄物的處理程序處理。4.3 生物平安柜臺面：用0.5%新潔爾、0.1%0.2%有效氯等消毒液浸濕的無紡抹布擦拭，30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。使用生物平安柜前后，要用紫外線照射消毒30min。4.4 個人防護裝備：工作鞋、橡膠手套可用0.1%0.2%有效氯消毒液浸泡2h，工作衣帽和口罩高溫高壓消毒后清洗。4.5 手消毒：用75%乙醇進行消毒。4.6 地面及墻壁：用0.1%0.2%有效氯消毒