視黃醇結(jié)合蛋白的臨床意義

1、241視黃醇結(jié)合蛋白的臨床意義第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長征醫(yī)院實(shí)驗(yàn)科研 范列英 沈新義視黃醇結(jié)合蛋白（Retinol Binding Protcin,RBP）為血液中視黃醇（維生素A）的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。1961年Berggard在免疫電泳中發(fā)現(xiàn)在2-球蛋白區(qū)域能形成一條長沉淀線的蛋白質(zhì)，曾稱為長2-球蛋白1。在以后幾十年中，人們對這種蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)、生物學(xué)特性等進(jìn)行了全面研究，發(fā)現(xiàn)這種蛋白質(zhì)廣泛地分布于正常人體液中，屬1-球蛋白，具有從肝細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)視黃醇至周圍組織的功能2?，F(xiàn)認(rèn)為血液中RBP主要以視黃醇、前白蛋白結(jié)合的復(fù)合物形式存在，當(dāng)復(fù)合物中視黃醇與靶細(xì)胞結(jié)合后，RBP便與前白蛋白分離，自腎小球?yàn)V出，由

2、近端腎小管上皮細(xì)胞吸收、降解3。近年來的深入研究表明RBP含量改變能夠敏感地反映近端腎小管功能、肝功能損害程度，是反映腎臟、肝臟及營養(yǎng)性疾病發(fā)展、轉(zhuǎn)歸的敏感指標(biāo)47。本文就近年來對RBP理化特性、代謝以及RBP含量改變及其臨床意義作一綜述。一、RBP的理化特性及生理功能RBP分子由一條多肽鏈及小部分碳水化合物組成，不含中性糖和氨基已糖，分子量為21，000，沉降系數(shù)S020W 2.3S ，等電點(diǎn)pH 4.44.8，半衰期312小時。RBP經(jīng)硫酸乙基葡聚糖層析（Slfoethy Sephadex Chromatography）得到A、B兩個峰，二乙氨基乙醇葡聚糖（DEAE-Sephad

3、ex）層析A、B兩部分后可獲得A1、A2與B1、B2四組分。免疫擴(kuò)散法顯示RBP的四個組分抗原性是一致的8。RBP主要由肝細(xì)胞合成，廣泛分布于人體血清、腦脊液、尿液及其他體液中。在血液中，RBP與視黃醇、前白蛋白以1:1:1（mol）的復(fù)合物形式存在，轉(zhuǎn)運(yùn)體內(nèi)90%的視黃醇至機(jī)體組織，當(dāng)RBP與細(xì)胞表面的RBP受體結(jié)合時，視黃醇進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，復(fù)合物解體，游離的RBP從腎小球?yàn)V出，其中絕大部分被近端腎小管上皮細(xì)胞重吸收，并被分解，供組織利用，僅有少量從尿中排出9。當(dāng)體內(nèi)鋅、鐵缺乏及嚴(yán)重感染等疾病能降低RBP的生物合成10，11。RBP的提純方法主要有普通提純法、親和層析法和快速蛋白液相層析法（Fa

4、st Protein Liquid Chromatography,FPLC）三類12，13。測定血、尿中的RBP方法較多，有放射免疫擴(kuò)散、免疫濁度、免疫電泳、酶聯(lián)免疫吸附和放射免疫分析，但其中靈敏度高、實(shí)用性強(qiáng)的僅為放射免疫分析法（RLA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）14，15。二、臨床意義1、與肝病的關(guān)系：Smith等用放免法檢測109例正常人和71例肝病患者血清中RBP的水平。31例肝硬化（經(jīng)組織學(xué)診斷有24例Laenners肝硬化、6例壞死后肝硬化和1例膽汁性肝硬化）及急、慢性肝炎的血清RBP水平均顯著低于正常對照組，并發(fā)現(xiàn)急性病毒性肝炎病程早期血清RBP含量降低較晚期更明顯。作者對3

5、5例急性病毒性肝炎血清RBP水平與血清膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶及堿性磷酸酶活力作相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)RBP與血清膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶活力均顯著負(fù)相關(guān)，提示血清RBP水平能準(zhǔn)確、靈敏地反映肝功能變化5。Bosin等用ELISA法測定了20例肝硬化、5例肝腎綜合征的血、尿RBP水平（20例腎功能正常的肝硬化均為酒精性肝硬化），發(fā)現(xiàn)20例肝硬化患者血清RBP水平均顯著低于正常對照組，尿RBP水平與正常組相同；5例肝腎綜合征血清RBP顯著低于正常，而尿RBP顯著高于正常，此結(jié)果表明檢測血、尿RBP水平有助于單純性肝硬化與肝腎綜合征的鑒別診斷16。Bankson等用免疫濁度法測定血清RBP得出了相似的結(jié)果

6、，30例肝臟疾病患者血清RBP水平顯著低于正常對照組6。2422、與腎臟病的關(guān)系：Smith等人用放免法檢測了26例慢性腎臟疾病血清RBP水平，慢性腎孟腎炎9例、慢性腎小球腎炎6例、結(jié)石腎1例，糖尿病性腎硬化2例、系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病2例、腎硬化2例及原因不明腎臟病4例，結(jié)果26例患者血清RBP水平顯著高于正常組5。另外，Bosin等人測定了4例急性腎小管壞死、14例慢性腎功能衰竭患者血、尿RBP、肌酐、白蛋白的含量，發(fā)現(xiàn)急性腎小管壞死、慢性腎功能衰竭血、尿RBP、肌酐含量均顯著高于正常，白蛋白含量在血液中降低、尿液內(nèi)增高。作者還分析2例肝腎綜合征發(fā)病前后尿RBP的變化，肝病綜合征發(fā)生前后血肌

7、酐及尿RBP各升高35倍和600倍，表明血、尿RBP的改變與傳統(tǒng)的反映腎功能指標(biāo)相一致16。 尿RBP、2-微球蛋白（2-M）均屬反映近端腎小管功能的小分子蛋白。以往2-M是常規(guī)的指標(biāo)，但近幾年來隨著對小分子蛋白理化特性的深入研究發(fā)現(xiàn)，溫度、pH對2-M的影響較大4，1719。 Bernard等人對比了RBP與2-M作為腎小管功能指標(biāo)的敏感性以及在酸性尿液中的穩(wěn)定性。結(jié)果表明150例正常人尿標(biāo)本中有10%的pH<5.5、32.7% pH<6，當(dāng)pH為5.5時，尿內(nèi)2-M開始快速分解，甚至尿液在膀胱內(nèi)就開始分解了，pH 5.0、37、溫育2小時后80%2-M分解；RBP在pH4.5時

8、仍穩(wěn)定，僅在 pH4.0、37溫育2小時后有40%分解。作者還對68例各種慢性腎臟疾病患者尿RBP與2-M含量作相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)尿pH調(diào)整前后，二者相關(guān)系數(shù)各為0.86和0.94，提示如果不存在pH影響，RBP與2-M反映腎功能的靈敏度、特異性非常相似4。Blumsohn等觀察pH與溫度對正常及病理狀態(tài)下RBP、2-M的影響，報道了相似的結(jié)果，當(dāng)pH等于4、溫度為4和20、48小時后2-M已分解70%和90%，RBP僅分解5%和25%；當(dāng)pH不變、溫度37時，4小時后2-M僅剩5%，而RBP分解55%，表明在室溫或4條件下，正常及異常尿液中RBP穩(wěn)定性好，是一個比2-M更實(shí)用、可靠的腎

9、功能指標(biāo)17。3.與其它疾病關(guān)系：Smith等人還測定了14例甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)和低下者血清RBP水平，結(jié)果前者較正常人低（31.2±3.1g/ml），后者高于正常人（57.2±7.1g/ml）5。Winkler等分析了正在接受營養(yǎng)療法的營養(yǎng)性疾病患者血漿蛋白變化，發(fā)現(xiàn)血漿RBP的變化早于白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白，并與氮平衡的相關(guān)性高于白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白，表明血清RBP水平是反映營養(yǎng)性疾病療效的靈敏、特異性指標(biāo)7。另外，Vaquist等用放免擴(kuò)散法測定了19例正常人和35例消化系統(tǒng)疾病患者血清RBP水平，發(fā)現(xiàn)除9例慢性腹瀉外，其余患者血清RBP水平均顯著低于正常人。作者還分析了血清RBP

10、與維生素A及暗適應(yīng)能力的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)血清RBP與維生素A含量的相關(guān)系數(shù)為0.879，當(dāng)血清RBP低于正常一半時，患者才出現(xiàn)暗適應(yīng)能力降低，提示血清RBP含量能更靈敏地反映維生素A缺乏癥20。 參 考 文 獻(xiàn)1、Berggard I, et al. Stuides on the plasma protein in normal human urine. Clin Chim Acta 1961; 6:413. 2、Kanai M, et al. Retinol-binding protein for vitamin A in human plasma. J Chin Invest 1968; 47:

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