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文檔簡(jiǎn)介
1、北京雷根生物技術(shù)有限公司SDS-PAGE凝膠配制試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介:聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,簡(jiǎn)稱SDS-PAGE),其作用原理在于聚丙烯酰胺凝膠為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),具有分子篩效應(yīng)。它有兩種形式:非變性聚丙烯酰胺凝膠及SDS-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE);非變性聚丙烯酰胺凝膠,在電泳的過(guò)程中,蛋白質(zhì)能夠保持完整狀態(tài),并依據(jù)蛋白質(zhì)的分子量大小、蛋白質(zhì)的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開(kāi),主要用于分離蛋白質(zhì)和寡核苷酸。Leagene SDS-PAGE凝膠配制試劑盒不僅可用于配制SDS-PAG
2、E凝膠,也可用于配制非變性(native)PAGE凝膠,30T試劑盒一般可以配制3040塊,60T試劑盒一般可以配制6080塊,具體配制的量應(yīng)根據(jù)器具大小決定。產(chǎn)品組成:主要成分:主要由30% Acr-Bis(29:1)、1.5M Tris-HCl(pH8.8)、10% SDS、AP、TEMED、1M Tris-HCl(pH6.8)組成。自備材料:1、 制膠器具 2、 蒸餾水 3、 微量移液器操作步驟(僅供參考):1、 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE北京雷根生物技術(shù)有限公司的分離膠(下層膠):不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍:SD
3、S-PAGE分離膠濃度6%膠 8%膠 10%膠 12%膠 15%膠成分6%膠 蒸餾水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%過(guò)硫酸銨 TEMED最佳分離范圍 50-150kD 30-90kD 20-80kD 12-60kD 10-40kD配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(ml)成分8%膠 蒸餾水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%過(guò)硫酸銨 TEMED配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(ml)成分10%膠 蒸餾水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,p
4、H8.8 10%SDS 10%過(guò)硫酸銨 TEMED配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(ml)成分15%膠 蒸餾水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%過(guò)硫酸銨 TEMED配制不同體積SDS-PAGE分離膠所需各成分的體積(ml)注:如果配制非變性膠,參考上述配方,不加10%SDS即可配制成非變性PAGE膠。2、 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱堆積膠、積層膠或上層膠)成分5%膠 蒸餾水 1M Tris,pH8.8 10%SDS 10%過(guò)硫酸銨 TEMED配制不同體積SDS-PAGE濃縮膠所需各成分的體積(ml)注意事項(xiàng):1、 過(guò)硫酸銨配制成10%溶液后,應(yīng)當(dāng)-20保存。同時(shí)應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,以防失效。有效避免失效的方法是分成呈小份,-20保存,用23次,剩余的棄用。 2、 TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guān)系密切,可通過(guò)適當(dāng)調(diào)節(jié)TEMED的用量,控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度。 3、 配制聚丙烯凝膠的過(guò)程中,如果室溫較低,可以置于37放置,加速凝固。 4、 30%Acr-Bis(29:1)有輕微神經(jīng)毒性,請(qǐng)小心操作。北京雷根生物技術(shù)有限公司 5、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。有
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