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1、實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案說(shuō)明:本實(shí)驗(yàn)由四個(gè)小實(shí)驗(yàn)組成,其中第一個(gè)實(shí)驗(yàn)(酶的專一性)必做,其他三個(gè)小實(shí)驗(yàn)選做(至少做一個(gè))寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告時(shí), 可以只寫(xiě)需要做的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容!實(shí)驗(yàn)四酶的特性實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿甘巧锎呋瘎?,生物體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)基本上都是在酶的催化下進(jìn)行的。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)了解酶催化的特異性、溫度對(duì)酶活力的影響、 PH 對(duì)酶活力的影響、激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響,對(duì)于進(jìn)一步掌握代謝反應(yīng)及其調(diào)控機(jī)理具有十分重要的意義。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容本實(shí)驗(yàn)由酶的專一性實(shí)驗(yàn)、溫度對(duì)酶活力的影響、PH 對(duì)酶活力的影響、激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響4 個(gè)小實(shí)驗(yàn)組成。(一)酶的專一性1、實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用為例,來(lái)說(shuō)明
2、酶的專一性。淀粉和蔗糖無(wú)還原性, 唾液淀粉酶水解淀粉生成有還原性二糖的麥芽糖, 但不能催化蔗糖的水解。用班氏試劑檢查糖的還原性。 班氏試劑為堿性硫酸銅, 能氧化具還原性的糖, 生成磚紅色沉淀氧化亞銅。2、材料、儀器與試劑(1) 材料:新鮮配制的唾液及其稀釋液(2) 儀器:恒溫水??;沸水??;試管及試管架;(3) 試劑: 2%蔗糖溶液; 溶于 0.3% NaCl 的 0.5%淀粉溶液; 班氏試劑。3、實(shí)驗(yàn)操作( 1)稀釋唾液的制備唾液的獲取用一次性杯取一定量的飲用水,漱口以清潔口腔,然后在嘴中含10-20ml 飲用水, 輕漱2min 左右時(shí)間,即可獲得唾液的原液,內(nèi)含唾液淀粉酶。不同稀釋度唾液的制
3、備(用大試管)本實(shí)驗(yàn)需制備1: 1、 1:5、 1: 20、 1: 50、1: 200 等五個(gè)不同濃度的稀釋唾液。精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案舉例說(shuō)明: 1:5 指的是稀釋了5 倍的唾液,制備方法為1 份原液 +4 份蒸餾水。1: 20 指的是稀釋了20 倍的唾液,制備方法為1 份 1: 5 的稀釋液 +3 分蒸餾水。(2)唾液淀粉酶最佳稀釋度的確定(嚴(yán)格按表1 添加順序做實(shí)驗(yàn),用小試管做實(shí)驗(yàn))表 1唾液淀粉酶稀釋度的確定管號(hào)1( 1: 1)2( 1: 5)3( 1: 20)4( 1: 50)5( 1:200)0.5%淀粉溶液(滴)44444稀釋唾液( ml)1111137恒溫水浴中保溫5 分鐘班氏試
4、劑( ml)11111沸水浴 2 3 分鐘實(shí)驗(yàn)結(jié)果(2)淀粉酶的專一性表 2淀粉酶專一性實(shí)驗(yàn)管號(hào)1234560.5% 淀粉溶液 (滴)4442%蔗糖溶液(滴)444最佳稀釋度唾液( ml)11煮沸過(guò)的最佳稀釋度唾液( ml)11蒸餾水( ml )1137恒溫水浴中保溫5 分鐘班氏試劑( ml)111111沸水浴 2 3 分鐘實(shí)驗(yàn)結(jié)果(二)溫度對(duì)酶活力的影響1、實(shí)驗(yàn)原理酶的催化作用受溫度的影響。 在最適溫度下, 酶的反應(yīng)速度最高。 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍(lán)色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色或紅色。最簡(jiǎn)單的糊精遇碘不呈顏色, 麥芽糖遇碘也不呈色,在不同溫度下, 淀粉被唾液淀粉酶水的
5、程度可由水解混合精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案物遇碘呈現(xiàn)的顏色來(lái)判斷。2、材料、儀器與試劑( 1)材料:新鮮配制的唾液及其稀釋液( 2)儀器:試管及試管架;恒溫水浴;冰浴;沸水浴;( 3)試劑: 溶于 0.3% NaCl 的 0.5%淀粉溶液; KI I2 碘溶液;3、實(shí)驗(yàn)操作取 4 支干燥的試管,編號(hào)后按下表加入試劑:表 3 溫度對(duì)酶活力影響實(shí)驗(yàn)加樣順序管號(hào)1230.5% 淀粉溶液( ml )1.51.51.5最佳稀釋度唾液(ml )11煮沸過(guò)的稀釋唾液(ml)1實(shí)驗(yàn)結(jié)果搖勻后,將1、3 號(hào)試管放入37恒溫水浴中,2 號(hào)試管放入冰水中。10 分鐘后 1、 2、3 管均取出(將2 號(hào)內(nèi)液體分兩半) ,用
6、 KI I2 溶液來(lái)檢驗(yàn)1、 2、 3 號(hào)管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋結(jié)果。將2 號(hào)管剩下的一半溶液放入37水浴中繼續(xù)保溫10 分鐘后,再用KI I2 液實(shí)驗(yàn),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(三) PH對(duì)酶活力的影響1、實(shí)驗(yàn)原理酶的活力受環(huán)境PH 值的影響極為顯著。不同酶的最適PH 不同。本實(shí)驗(yàn)觀察PH 對(duì)唾液淀粉酶活性的影響。唾液淀粉酶的最適PH 約為 6.8。2、材料、儀器與試劑( 1)材料:新配制的 溶于 0.3%NaCl 的 0.5%淀粉溶液( 2)儀器:試管及試管架;吸管;滴管;恒溫水?。?3)試劑: PH 為 5.0、 5.8、 6.8、 8.0 的緩沖溶液; KI I2 碘溶液;
7、PH 試紙3、實(shí)驗(yàn)操作表 4PH 對(duì)酶活性的影響實(shí)驗(yàn)PH55 8688.0精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案緩沖液( ml)33330.5%淀粉溶液( ml )1111向第一個(gè)試管加入稀釋唾液后,置于37的恒溫水??;等待1min 后向第二個(gè)試管加入稀釋唾液,置于37的恒溫水浴;依次類推!最佳稀釋度的唾液(ml)1111待向第四只試管加入唾液2min 后,每隔1 分鐘從第 3 管中取出1 滴反應(yīng)液于白瓷板上,加碘液檢查反應(yīng)進(jìn)行情況,直至反應(yīng)液變?yōu)榈貦z查淀粉水解程度黃色 (顏色有點(diǎn)淡即可) 。即可從第一只試管依次添加碘液,時(shí)間間隔也為 1min。碘液 (滴)11112現(xiàn)象為了更好的理解表格內(nèi)容,下面對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程
8、進(jìn)行說(shuō)明:各取緩沖液3ml ,分別注入4 支帶有號(hào)碼的試管,隨后于各個(gè)試管中添加0.5%淀粉溶液 1ml 和最佳稀釋度的唾液1ml 。向各試管中加入稀釋唾液的時(shí)間間隔為1 分鐘。將各試管中物質(zhì)混勻,并依次置于37恒溫水浴中保溫。待向第 4 管加入唾液2ml 后,每隔1 分鐘由第3 管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加 1 小滴 KI I2 溶液。添加KI I 2 溶液,檢驗(yàn)淀粉的水解程度。待混合變?yōu)榈攸S色(顏色有點(diǎn)淡即可)后,向所有試管依次添加1-2 滴 KI I 2 溶液。添加滴KI I2 溶液的時(shí)間間隔,從第 1 管起,亦均為1 分鐘。觀察各試管中物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色,分析pH 對(duì)唾液淀粉酶活性
9、的影響。(四)唾液淀粉酶的活化及抑制1、實(shí)驗(yàn)原理酶的活性受活化劑或抑制劑的影響, 氯離子為唾液淀粉酶的活化劑, 銅離子為其抑制劑。2、材料、儀器與試劑( 1)材料: 0.5%淀粉溶液;最佳稀釋度的唾液( 2)儀器:試管及試管架;恒溫水浴( 3)試劑: 1% NaCl 溶液; 1% CuSO4 溶液; KI I 2 碘溶液; 1%Na2SO4 溶液3、實(shí)驗(yàn)操作 (注意本實(shí)驗(yàn)的淀粉溶液為無(wú)NaCl 的淀粉溶液)表 4唾液淀粉酶活化及抑制實(shí)驗(yàn)精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案管號(hào)12340.5%淀粉溶液( ml)1.51.51.51.5最佳稀釋度唾液( ml)0.50.50.50.51% NaCl 溶液( ml )0.51% CuSO4 溶液( ml )0.51% Na 2SO4 溶液( ml )0.5蒸餾水( ml )0.537恒溫水浴中保溫10 分鐘KI I2 溶液(滴)2 32 3
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