Rh血型鑒定操作規(guī)程

1、對象：全院職工醫(yī)療藥事制度文件名稱：RhRh (D D )血型鑒定編寫日期：2014.12014.1修訂日期：2017.42017.4執(zhí)行日期：2017.42017.4 注：本文件僅供本院人員使用，未經(jīng)同意，不得翻印本文件最終解釋權(quán)歸輸血科Rh ( D )血型鑒定【原理】Rh 血型系統(tǒng)是輸血醫(yī)學(xué)中僅次于ABO 系統(tǒng)的第二大血型系統(tǒng)。Rh 血型系統(tǒng)常見的抗原有D 和 C、c、E、e 五種，分別由 RHD 基因和 RHCE 基因編碼，RhD 和 RhCE 蛋白均是反復(fù)穿膜的蛋白質(zhì)。 使用相應(yīng)的抗 D、抗 C、抗 c、抗 E、抗 e 五種血型試劑可以鑒定這些抗原。臨床上，D 抗原是 Rh 抗原中免疫

2、原性最強的抗原， 也是最具有臨床意義的抗原， 一般只做 D 抗原鑒定，凡帶有 D 抗原者稱為 Rh 陽性, 不帶 D抗原者稱為 Rh 陰性。1.試管法【樣本】抗凝或不抗凝的樣本均可用于Rh 鑒定試驗。紅細胞可懸浮在自身血清、血漿或鹽水中，也可以洗滌后懸浮于鹽水中?！驹噭?1)IgM 抗 D 試劑(2)Rh 對照試劑【操作】(1 )加 1 滴抗 D 到一潔凈試管，并做好標記(2 )加 1 滴 Rh 對照試劑到第二個潔凈試管中，并做好標記(3 )分別加 1 滴 2%5%紅細胞懸液到每支試管中(4 )輕輕混勻，通常(900100)Xg 離心 15 秒(5 )輕輕重懸細胞扣，檢查凝集(6 )評價反應(yīng)

3、強度，記錄試驗管和對照管得試驗結(jié)果【結(jié)果判定】(1 )抗 D 管凝集，對照管不凝集表明紅細胞是RhD 陽性(2 )對照管和抗 D 管均陰性，說明待測紅細胞是RhD 陰性結(jié)果(3 )對照管凝集則試驗無效2.玻片法【樣本】用玻片法進行 RhD 定型時，待檢紅細胞懸液的濃度是40%50%【試劑】適合用于玻片法的低蛋白抗 D 試劑【操作】(1 )加 1 滴抗 D 到一潔凈的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好標記(2 )加 1 滴適合的對照試劑到另一潔凈的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好標記(3 )向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一種試劑中分別加1 滴混勻的 40%50%待檢紅細胞懸液(4 )充分混合抗體試劑和細胞，

4、用攪拌棒將混合物均勻分散(5 )不斷地從一邊到另一邊輕輕傾斜轉(zhuǎn)動玻片或白瓷板，持續(xù)大概2 分鐘(6 )讀取，解釋并記錄所有玻片或白瓷板凹孔中的結(jié)果【結(jié)果判定】(1 )抗 D 試劑與紅細胞反應(yīng)表現(xiàn)凝集，而對照為陰性反應(yīng)，表明待檢紅細胞為RhD 陽性(2 )抗 D 試劑與對照均為陰性反應(yīng)，表明待檢紅細胞為RhD 陰性(3 )對照管凝集則試驗無效【注意事項】 玻片法可能存在感染性標本暴露的風(fēng)險，需要注意防范；玻片法不適用于檢測弱D 表型3.柱凝集法【樣本】同玻片法和試管法【試劑】已加入抗 D 試劑的柱凝集血型卡【操作】(1 )配制好的檢測樣本的紅細胞懸液和試劑紅細胞懸液通常配制為 0.8%1.0%濃度。(2 )在專用微柱凝集卡的 RhD 檢測管中加入樣本紅細胞懸液50ul(3 )在專用血型血清學(xué)用離心機內(nèi)離心(4 )判讀并記錄凝集反應(yīng)結(jié)果【結(jié)果判定】 根據(jù)紅細胞在凝膠柱內(nèi)的