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1、1 血細(xì)胞比容血細(xì)胞比容( (HctHct或或PCVPCV) ),以前稱為紅細(xì)胞,以前稱為紅細(xì)胞壓積,是指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的壓積,是指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。紅細(xì)胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。 HCTHCT的高低與紅細(xì)胞數(shù)量及平均體積、血漿量有關(guān)的高低與紅細(xì)胞數(shù)量及平均體積、血漿量有關(guān) 12 1.常量法常量法(Wintrobe法法)和微量法和微量法(microhematocrit) 將抗凝血液標(biāo)本置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或毛細(xì)玻璃管中,將抗凝血液標(biāo)本置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或毛細(xì)玻璃管中,以一定轉(zhuǎn)速離心一定時(shí)間后,計(jì)算紅細(xì)胞層占全血的體積比。以一定轉(zhuǎn)速離
2、心一定時(shí)間后,計(jì)算紅細(xì)胞層占全血的體積比。 5層:血漿層、血小板層、白細(xì)胞和有核紅細(xì)胞層、還原層:血漿層、血小板層、白細(xì)胞和有核紅細(xì)胞層、還原紅細(xì)胞層和氧合紅細(xì)胞層。紅細(xì)胞層和氧合紅細(xì)胞層。2.血液分析儀法血液分析儀法 由紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)兩項(xiàng)指標(biāo)后導(dǎo)出,由紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)兩項(xiàng)指標(biāo)后導(dǎo)出,Hct紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞平均體積。紅細(xì)胞平均體積。 檢測(cè)原理檢測(cè)原理34方法方法優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)缺點(diǎn)溫氏法溫氏法無需特殊儀器,廣泛無需特殊儀器,廣泛應(yīng)用應(yīng)用不能完全排除殘留血漿,且不能完全排除殘留血漿,且單獨(dú)采血,用血量大單獨(dú)采血,用血量大微量法微量法快速快速(5min)標(biāo)本用量標(biāo)本用
3、量小、結(jié)果準(zhǔn)確、小、結(jié)果準(zhǔn)確、 重復(fù)重復(fù)性好。性好。WHO推薦的首推薦的首選參考方法選參考方法有殘留血漿,但較溫氏法少有殘留血漿,但較溫氏法少電阻抗法電阻抗法簡便快速簡便快速(5-15s) 白細(xì)胞、血小板增多可引白細(xì)胞、血小板增多可引起血液導(dǎo)電異常,使結(jié)果不起血液導(dǎo)電異常,使結(jié)果不可靠可靠血細(xì)胞分析儀法血細(xì)胞分析儀法簡便快速、精密度高,簡便快速、精密度高,無需單獨(dú)采血無需單獨(dú)采血準(zhǔn)確性稍低,結(jié)果僅供參考準(zhǔn)確性稍低,結(jié)果僅供參考45 1.操作規(guī)范化操作規(guī)范化 避免操作誤差,如抗凝量不準(zhǔn),混勻不充分,離心避免操作誤差,如抗凝量不準(zhǔn),混勻不充分,離心速度不均等。速度不均等。 2注意干擾因素注意干擾因
4、素 假性增高:紅細(xì)胞形態(tài)異常和紅細(xì)胞增多時(shí)應(yīng)注明,假性增高:紅細(xì)胞形態(tài)異常和紅細(xì)胞增多時(shí)應(yīng)注明, (細(xì)胞變形性減低和數(shù)量增多細(xì)胞變形性減低和數(shù)量增多 血漿殘留量增加血漿殘留量增加); 高網(wǎng)織紅細(xì)胞或高白細(xì)胞等高網(wǎng)織紅細(xì)胞或高白細(xì)胞等 假性降低:體外溶血、自身凝集等。假性降低:體外溶血、自身凝集等。質(zhì)量保證質(zhì)量保證6參考值參考值男性:男性:0.3800.508;女性:女性:0.3350.450 7臨床意義臨床意義HCT的臨床意義與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似。的臨床意義與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似。HCT減低是診斷貧血的指標(biāo),減低是診斷貧血的指標(biāo), HCT的高低與紅細(xì)胞的高低與紅細(xì)胞數(shù)量及平均體積、血漿量有關(guān)數(shù)量及平均體
5、積、血漿量有關(guān)主要用于貧血、真性紅細(xì)胞增多癥和紅細(xì)胞增多的主要用于貧血、真性紅細(xì)胞增多癥和紅細(xì)胞增多的診斷、血液稀釋和血液濃縮變化的測(cè)定、計(jì)算紅細(xì)胞診斷、血液稀釋和血液濃縮變化的測(cè)定、計(jì)算紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度等。平均體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度等。8臨床意義臨床意義 1臨床補(bǔ)液量的參考臨床補(bǔ)液量的參考 各種原因?qū)е旅撍畷r(shí),各種原因?qū)е旅撍畷r(shí),HCT都會(huì)增高,補(bǔ)液時(shí)可都會(huì)增高,補(bǔ)液時(shí)可監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)HCT,HCT恢復(fù)正常表示血容量得到糾正?;謴?fù)正常表示血容量得到糾正。 2真性紅細(xì)胞增多癥診斷指標(biāo)真性紅細(xì)胞增多癥診斷指標(biāo) 當(dāng)當(dāng)HCT大于大于0.7,RBC為為(7-10)X1012L,
6、Hb大于大于180gL,即可診斷。,即可診斷。9臨床意義臨床意義 3紅細(xì)胞平均指數(shù)計(jì)算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)紅細(xì)胞平均指數(shù)計(jì)算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù) 紅細(xì)胞平均值紅細(xì)胞平均值(MCV、MCHC)可用于貧血的形態(tài)可用于貧血的形態(tài)學(xué)分類。學(xué)分類。 4血液流變學(xué)指標(biāo)血液流變學(xué)指標(biāo) HCT增高表明紅細(xì)胞數(shù)量偏高,增高表明紅細(xì)胞數(shù)量偏高, 全血黏度增加,嚴(yán)重者表現(xiàn)為高黏滯綜合征,全血黏度增加,嚴(yán)重者表現(xiàn)為高黏滯綜合征, 微循環(huán)障礙、組織缺氧。微循環(huán)障礙、組織缺氧。 HCT與其他血液流變學(xué)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用,可對(duì)一些與其他血液流變學(xué)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用,可對(duì)一些血栓前狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。血栓前狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。1010紅細(xì)胞平均容積紅細(xì)胞平均容積(me
7、an corpuscular volume,MCV),指每個(gè),指每個(gè)紅細(xì)胞平均體積的大小,以飛升紅細(xì)胞平均體積的大小,以飛升(f1)為單位;為單位; 紅細(xì)胞血平均紅蛋白含量紅細(xì)胞血平均紅蛋白含量(mean corpuscular he-moglobin,MCH),指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)平均所含血紅蛋白的量,以皮克,指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)平均所含血紅蛋白的量,以皮克(pg)為為單位;單位;紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(mean corpuscular Hemoglobin concentration,MCHC),指平均每升紅細(xì)胞,指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白中所含血紅蛋白濃度濃度(gL)。 1
8、11112 檢測(cè)原理檢測(cè)原理 1手工法手工法 同時(shí)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞,同時(shí)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞,測(cè)定血紅蛋白和血細(xì)胞比容,測(cè)定血紅蛋白和血細(xì)胞比容,計(jì)算出紅細(xì)胞計(jì)算出紅細(xì)胞3個(gè)平均指數(shù)。個(gè)平均指數(shù)。例:例:RBC為為3.50X1012L,Hct為為0.36,Hb為為120g/L Hct 0.36MCV (fl) 103(fl) RBC 3.50X1012L Hb HbMCH (pg),), MCHC( gL ) RBC Hct13檢測(cè)原理檢測(cè)原理2血液分析儀血液分析儀 能直接導(dǎo)出能直接導(dǎo)出MCV的值,再的值,再結(jié)合儀器直接測(cè)定的結(jié)合儀器直接測(cè)定的RBC和和Hb,計(jì)算出,計(jì)算出MCH和和MCHC MCHHbRBC
9、, MCHCHb( (RBCMCV)。 1414參考值參考值15臨床意義臨床意義貧血分類貧血分類 MCVMCHMCHC 貧血貧血 正細(xì)胞貧血正細(xì)胞貧血 正常正常正常正常正常正常再生障礙性貧血、急再生障礙性貧血、急性失血性貧血、某些性失血性貧血、某些溶血性貧血溶血性貧血大細(xì)胞貧血大細(xì)胞貧血 增高增高增高增高正常正常 各種造血物質(zhì)缺乏或各種造血物質(zhì)缺乏或利用不良的貧血利用不良的貧血單純小細(xì)胞貧血單純小細(xì)胞貧血 減低減低減低減低正常正常慢性感染、慢性肝腎慢性感染、慢性肝腎疾病性貧血疾病性貧血小細(xì)胞低色素貧小細(xì)胞低色素貧血血 減低減低減低減低減低減低缺鐵性貧血及鐵利用缺鐵性貧血及鐵利用不良貧血,慢性失
10、血不良貧血,慢性失血性貧血性貧血作為貧血的紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類作為貧血的紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類16(一)檢測(cè)原理紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)反映樣本中紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)程度,即反映紅細(xì)胞大小不等客觀指標(biāo),常用變異系數(shù)(CV)表示,由血液分析儀的紅細(xì)胞體積直方圖導(dǎo)出。(二)方法學(xué)評(píng)價(jià)RDW是對(duì)紅細(xì)胞體積大小的評(píng)價(jià),比血涂片紅細(xì)胞形態(tài)大小的觀察更為客觀和準(zhǔn)確。(三)質(zhì)量控制RDW異常受樣本中紅細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞凝集、雙相性紅細(xì)胞的影響。 (四)臨床意義1.貧血形態(tài)學(xué)分類:根據(jù)紅細(xì)胞形態(tài)大小不同,將貧血分成6類171983年由Bessman提出的新貧血分類法對(duì)貧血病因鑒別診斷具有更大意義。MCV和RDW聯(lián)合檢
11、測(cè)對(duì)貧血形態(tài)學(xué)鑒別診斷靈敏度為86.7%100%,特異度為83.4%100%。 2.作為缺鐵性貧血(IDA):篩選診斷和療效觀察的指標(biāo):RDW增大對(duì)IDA的診斷靈敏度達(dá)95%以上,特異性不強(qiáng),可作為IDA的篩選診斷指標(biāo)。當(dāng)鐵劑治療有效時(shí),RDW開始增大,隨后逐漸降至正。3.鑒別缺鐵性貧血和-珠蛋白生成障礙性貧血:RDW增大對(duì)IDA的診斷靈敏度達(dá)95%以上,特異性不強(qiáng),可作為IDA的篩選診斷指標(biāo)。當(dāng)鐵劑治療有效時(shí),RDW開始增大,隨后逐漸降至正常。 1818網(wǎng)織紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞( (reticulocytereticulocyte,Ret)Ret)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全
12、成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸(RNA)(RNA),經(jīng)煌焦油藍(lán)等活,經(jīng)煌焦油藍(lán)等活體染色后,嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒,連綴成線,體染色后,嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒,連綴成線,線連接成網(wǎng)。線連接成網(wǎng)。屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞( (當(dāng)嗜堿性物質(zhì)消耗殆盡后才當(dāng)嗜堿性物質(zhì)消耗殆盡后才被視為成熟紅細(xì)胞被視為成熟紅細(xì)胞) ),一般為,一般為8 89.5m9.5m。1919202021 檢測(cè)原理檢測(cè)原理 1.普通光學(xué)顯微鏡法普通光學(xué)顯微鏡法 活體染色(新亞甲藍(lán)或煌焦油藍(lán)活體染色(新亞甲藍(lán)或煌焦油藍(lán))的堿性著色基
13、團(tuán)的堿性著色基團(tuán) 網(wǎng)織紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的磷酸基的磷酸基(帶負(fù)電荷帶負(fù)電荷) RNA膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮,膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮, 藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) , 顯微鏡下計(jì)數(shù)顯微鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中所占的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù),以百個(gè)紅細(xì)胞中所占的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù),以百分比或分?jǐn)?shù)數(shù)表示。分比或分?jǐn)?shù)數(shù)表示。 22 檢測(cè)原理檢測(cè)原理 流式細(xì)胞儀法流式細(xì)胞儀法2儀器法儀器法 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 血液分析儀法。血液分析儀法。 熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞中熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA結(jié)合,結(jié)合, 發(fā)出特定顏色的熒光進(jìn)行發(fā)出特定顏色的熒光進(jìn)行RNA定量定量精確
14、計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)精確計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(Ret)。將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成高、中、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成高、中、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞 比率比率(HFR 、MFR、 LFR)并計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。并計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。 23血液分析儀法血液分析儀法 提供與網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)的提供與網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)的多個(gè)多個(gè)參數(shù),參數(shù), 網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值、網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值、 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比、 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積、 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度、 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、 網(wǎng)織紅細(xì)胞平
15、均血紅蛋白濃度、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度、 LFR、MFR、HFR、 網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)。網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)。242425【質(zhì)量保證質(zhì)量保證】 以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。 1染料選擇染料選擇 26【質(zhì)量保證質(zhì)量保證】 2正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞 外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為型,凡含有型,凡含有2個(gè)以上個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。網(wǎng)織顆粒的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。 3網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法 (1)Miller窺盤:窺盤: (2)顯微成像系統(tǒng):計(jì)算機(jī)和細(xì)胞形態(tài)分析軟件,顯微成像系統(tǒng):計(jì)算機(jī)和細(xì)胞形態(tài)分析軟件, HFR:粗
16、顆粒堆積成網(wǎng)狀。:粗顆粒堆積成網(wǎng)狀。 MFR:粗顆粒在:粗顆粒在10個(gè)以上,或細(xì)小顆粒超過個(gè)以上,或細(xì)小顆粒超過15個(gè)。個(gè)。 LFR:細(xì)胞內(nèi)含:細(xì)胞內(nèi)含15個(gè)以下細(xì)小顆粒個(gè)以下細(xì)小顆粒 27網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù):網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù): 成人和兒童成人和兒童:0.0050.025 新生兒新生兒: 0.020.06網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù):網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù): 成人和兒童成人和兒童: (2484)X109L參考值參考值28臨床意義臨床意義1評(píng)價(jià)骨髓增生能力,判斷貧血類型評(píng)價(jià)骨髓增生能力,判斷貧血類型。(1)網(wǎng)織紅細(xì)胞增多:表示骨髓造血功能旺盛,網(wǎng)織紅細(xì)胞增多:表示骨髓造血功能旺盛, 各種增生性貧血各種增生性貧血 (2)網(wǎng)織紅細(xì)胞減少:常見于再生障礙性貧血網(wǎng)織紅細(xì)胞減少:常見于再生障礙性貧血 (3)鑒別貧血:鑒別貧血:29303132臨床意義臨床意義2評(píng)價(jià)療效評(píng)價(jià)療效 (1)觀察貧血療效觀察貧血療效:貧血隨訪貧血隨訪缺鐵貧或巨幼貧有效治療后,缺鐵貧或巨幼貧有效治療后,23d后后Ret開始上升,開始上升,710d達(dá)到最高峰達(dá)到最高峰(約約10),2周后漸降至正常。周后漸降至正常。 (2)骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù):骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù):骨髓移植后第骨髓移植后第21天,如天,如Ret大于大于15X109L,常表,常表示無移植并發(fā)癥;示無移植并發(fā)癥;若骨髓開始恢復(fù)造血功能,首先若骨髓開始恢
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