用反相高效液相色譜法測(cè)定香蘭素含量

1、205分析檢驗(yàn)食品科學(xué)2006, Vol. 27, No. 043.1采用氧彈燃燒灰化技術(shù)結(jié)合分光光度法可以測(cè)定動(dòng)物臟體中的微量硒。本法所使用儀器設(shè)備并不復(fù)雜,操作簡(jiǎn)便,具有較高的靈敏度和精密度,回收率測(cè)試試驗(yàn)符合分析測(cè)試要求。方法不僅能適用動(dòng)物臟體中微量硒的測(cè)定,還可以適用于能在氧彈中燃燒的動(dòng)植物樣品中硒的測(cè)定。3.2經(jīng)試驗(yàn)測(cè)定,對(duì)同一種動(dòng)物的臟體來說,心臟中硒的含量較高,其次是肝臟的含量,在肺中硒的含量相對(duì)較少。參考文獻(xiàn):1陳俐娟,李暉.碘化鉀-結(jié)晶紫-聚乙烯醇吸光光度法測(cè)定海豚肝臟中微量硒J.理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè),2000,36(5:195.2賈進(jìn)鐸.氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測(cè)定鎳基高溫合

2、金中痕量硒和碲J.理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè),2001,37(3:104.3葉毓瓊,黃榮,錢廣生.巰基棉富集-分光光度法測(cè)定食品及藥物中的痕量硒J.食品與發(fā)酵工業(yè),1994,(4:16.4張明英,袁蘭珍,田菊華.單縫石英管火焰原子吸收法測(cè)定蒜頭、茶葉、大米中的微量硒J.光譜學(xué)與光譜分析,1994,14(8:101.5單偉光,陳正曉.催化光度法測(cè)定痕量硒的研究J.化學(xué)工程師,2001,83(2:38.6魯?shù)?張文娟.原子吸收氫化物法直接測(cè)定加硒碘鹽中硒J.理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè),1999,35(3:135.7郭漢城,鐘梅芳.焙燒富集分離-硒化氫發(fā)生原子熒光光譜法測(cè)定純銻中微量硒J.理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè),200

3、2,38(12.8許卉,賀萍.催化動(dòng)力學(xué)光度法測(cè)定海產(chǎn)品中的痕量硒J.分析化學(xué),1997,27(5:540.收稿日期:2005-05-24作者簡(jiǎn)介:景麗潔(1954-,女,教授,研究方向?yàn)楣I(yè)分析與環(huán)境化學(xué)。用反相高效液相色譜法測(cè)定香蘭素含量景麗潔1,韓偉2,閆光烈2(1.吉林化工學(xué)院環(huán)境科學(xué)與工程系,吉林吉林132022;2.吉林化工學(xué)院化學(xué)工程系,吉林吉林132022摘要:研究采用反相高效液相色譜法測(cè)定香蘭素含量,色譜柱為C 18柱,乙腈/水(85/15,V/V為流動(dòng)相,等濃度洗脫,測(cè)定波長(zhǎng)為279nm,內(nèi)標(biāo)法定量。方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.46%,加標(biāo)回收率為98.17%99.50%。適用

4、于香蘭素成品的分析,也可用于中間產(chǎn)品的控制分析。關(guān)鍵詞:香蘭素;高效液相色譜法;測(cè)定AssayofVanillinbyReversedPhase-HighPressureLiquidChromatographyJINGLi-jie 1,HANWei 2,YANGuang-lie 2(1.DepartmentofEnvironmentalScienceandEngineering,JilinInstituteofChemicalTechnology,Jilin132022,China ;2.DepartmentofChemicalEngineering,JilinInstituteofChemi

5、calTechnology,Jilin132022,ChinaAbstract :Asimple,rapid,accuratemethodisstudiedforassayofvanillinbyReversedPhase-HighPressureLiquid Chromatography.ThechromatographiccolumnisC 18withacetonitrile/water(85/15,V/Vastheelutingphase,andelutein isoconcentration.Thedetectedwavelengthis279nm.TheRSDis0.46%andt

6、herecovery98.17%99.50%.Themethodis satisfactoryf ora ssayingt hef inishedv anillinp roduct,a nda lsof ora nalyzingt hes emifinishedp roduct.Keywords :vanillin ;HighPressureLiquidChromatography(HPLC;determination中圖分類號(hào):O658文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1002-6630(200604-0205-03香蘭素學(xué)名3-甲氧基-4-羥基苯甲醛,是世界上產(chǎn)量最大的合成香料。中國(guó)是香蘭素出口大國(guó)

7、,已有50多年的香蘭素生產(chǎn)歷史,香蘭素出口量年均增長(zhǎng)率為12%,在北美、歐洲、東南亞等地市場(chǎng)享有良好的信2006, Vol. 27, No. 04食品科學(xué)分析檢驗(yàn)206譽(yù)。在中國(guó)香蘭素主要用于食品添加劑,此外也廣泛用于化妝、煙用等香精的配方中。近幾年在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用不斷拓寬,已成為香蘭素應(yīng)用最有潛力的領(lǐng)域。香蘭素在國(guó)外應(yīng)用更加廣泛,大量用于生產(chǎn)醫(yī)藥中間體,也用于植物生長(zhǎng)促進(jìn)劑、殺菌劑、潤(rùn)滑油消泡劑、電鍍光亮劑等。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)香蘭素的分析方法研究已有所報(bào)道16,多采用液相色譜法,但大都側(cè)重研究香蘭素與其它成分的分離,然而作為成品香蘭素分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度并不十分令人滿意。另外國(guó)內(nèi)高效液相色

8、譜法分析香蘭素采用甲醇和異丙醇作為流動(dòng)相,由于香蘭素分子中含有活潑的醛基,易與醇起加成反應(yīng),產(chǎn)生不易識(shí)別的峰,對(duì)香蘭素的測(cè)定產(chǎn)生干擾,影響香蘭素的準(zhǔn)確定量。本研究采用反相高效液相色譜法,用乙腈和水作流動(dòng)相,在279n m下,測(cè)定香蘭素含量,得到了滿意的結(jié)果。1材料與方法1.1試劑1.2儀器日本島津L C-10A D高效液相色譜儀,配備S P D-10AV型UV-Vis檢測(cè)器和C-R7A型數(shù)據(jù)處理機(jī)。1.3試驗(yàn)條件色譜柱:C18(日本島津公司生產(chǎn),5m,15c m×4.6mm;流動(dòng)相:乙腈/水(含有0.05mol/L醋酸=85/ 15(V/V,等濃度洗脫,流速0.8ml/min;檢測(cè)器

9、波長(zhǎng): 279nm;靈敏度:0.01AUFS;進(jìn)樣量:20l;溫度:室溫。1.4方法稱取香蘭素標(biāo)準(zhǔn)樣品0.1000g,用乙腈-水流動(dòng)相(85/ 15,V/V溶解并定容于100ml容量瓶中,其濃度為1.000g/L,作為標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液。從中吸取5.00ml定容于50ml容量瓶中,濃度為0.1g/L,作為標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。分別吸取香蘭素標(biāo)準(zhǔn)使用溶液4.00、5.00、6.00、7.00、8.00、10.00ml于6個(gè)50ml容量瓶中,各加內(nèi)標(biāo)物間苯二甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00ml(含間苯二甲酸2.4g,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻。由稀到濃依次進(jìn)樣20l,結(jié)果見表1,色譜圖如圖1所示。表1進(jìn)樣量和峰面積比值的關(guān)系

10、Table 1 Re lation between sample size an d ratio of area準(zhǔn)確稱取自制香蘭素產(chǎn)品0.0358g于50ml容量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,從中吸取1.00ml于50ml容量瓶中,加內(nèi)標(biāo)物間苯二甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00ml(含間苯二甲酸2.4g,用流動(dòng)相定容至刻度,進(jìn)樣20l,所得色譜圖如圖2所示。 3.884-0.0-2.0-4.02結(jié)果與討論207分析檢驗(yàn)食品科學(xué)2006, Vol. 27, No. 042.1色譜流動(dòng)相的選擇反相高效液相色譜法所用的流動(dòng)相一般為水、甲醇、乙腈或其中的2種到3種混合溶劑。本研究所測(cè)定的樣品香蘭素含有醛基,如果用甲醇

11、作流動(dòng)相,則用流動(dòng)相配制的香蘭素甲醇溶液會(huì)形成許多無關(guān)的不易識(shí)別的峰,可能是縮醛或半縮醛,對(duì)香蘭素產(chǎn)品的測(cè)定有干擾,因此選用乙腈-水混合溶劑更為適宜。另外乙腈的優(yōu)點(diǎn)是可以在較低的壓力下完成反相色譜分析,對(duì)色譜柱更加有利。經(jīng)試驗(yàn)確定流動(dòng)相乙腈:水(V/V為85:15。2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇實(shí)驗(yàn)表明香蘭素的最大吸收波長(zhǎng)在279n m 和230nm,選擇高波長(zhǎng)是比較好的,因?yàn)樵诟卟ㄩL(zhǎng)處幾乎看不到來自樣品中雜質(zhì)的干擾。另外將測(cè)定波長(zhǎng)選擇在最大吸收波長(zhǎng)還可以減少進(jìn)樣量,減輕色譜柱的負(fù)擔(dān),延長(zhǎng)柱子使用壽命。因此,本法采用檢測(cè)波長(zhǎng)為279nm 。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程與相關(guān)系數(shù)由表1中標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)樣量(m i

12、為橫坐標(biāo),相對(duì)應(yīng)香蘭素與內(nèi)標(biāo)物面積比值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行線性回歸,得到回歸曲線與回歸方程如圖3所示,R 2=0.9998,表明線性關(guān)系良好。方法最小檢測(cè)量為0.016g。2.4方法精密度試驗(yàn)液,在上述操作條件下,進(jìn)樣測(cè)定,其結(jié)果如表2所示。方法精密度較好。2.5方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)測(cè)定值(g平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(g (g RSD(%0.00130.46表2精密度測(cè)定結(jié)果(n=8Table 2 Results of precision test(n=8樣品中香蘭素量(g加標(biāo)量(g 0.378298.17表3準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果Table 3 Results of accuracy

13、test結(jié)論用反相高效液相色譜法C 18色譜柱,在279nm 波長(zhǎng)下,乙腈:水(V/V=85:15為流動(dòng)相,等度洗脫測(cè)定成品香蘭素含量,是一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的分析方法,從進(jìn)樣到完成分析只需5min 時(shí)間,香蘭素含量和峰面積比值之間呈良好的線性關(guān)系,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.46%(n=8,加標(biāo)回收率為98.17%99.50%。本方法適于作為香蘭素成品的分析方法,也可用于中間產(chǎn)品的控制分析。參考文獻(xiàn):1EdwinMWallace.HPLCofvanillinandrelatedphenolsJ.Jchromatogr Sci,1983,21(3:139-143.2耿安利,魏東煒,井欣.香蘭素制備反應(yīng)液的高效液相色譜分析法J.化學(xué)世界,1994,(9:474-476.3范國(guó)梁.用反相高效液相色譜分析香蘭素和鄰香蘭素J.化學(xué)世界,1990,(1:65-68.4黃艷鳳,周慶禮,王昌祿.發(fā)酵液中香蘭素測(cè)定方法的研究J.食品科學(xué),2004,25(6:160-162.5任群翔,孟祥軍,葛