《臨床免疫學與檢驗》課程教學大綱

1、臨床免疫學與檢驗課程教學大綱課程編號：課程名稱：臨床免疫學與檢驗英文名稱：Clinical Immunology Laboratory課程類型：專業(yè)課 必修考試總 學 時：62 學分：3.5 理論課學時：30 實驗課學時：32一、課程性質和地位臨床免疫學與檢驗是研究人體免疫系統(tǒng)在正常生理代謝的調節(jié)及對外來病原菌的防御功能，當免疫反應調節(jié)異常或缺陷時，將導致疾病的發(fā)生。與免疫疾病有關的活性物質的檢測與分析，是醫(yī)學檢驗專業(yè)學習的主要目的和任務(供五年制本科臨床檢驗專業(yè))。為適應現代化醫(yī)學的迅速發(fā)展，使我國的檢驗醫(yī)學教育不斷完善，遵循五年制檢驗醫(yī)學專業(yè)培養(yǎng)目標，突出學生三基(基礎理論、基礎知識、基本

2、技能)，五性(思想性、科學性、先進性、啟發(fā)性、適用性)的原則，力求培養(yǎng)學生具有較扎實的基礎理論和臨床實踐技能，能適應經濟建設、科技進步和社會發(fā)展的需要。二、教學環(huán)節(jié)及教學方法和手段臨床免疫學與檢驗的教學環(huán)節(jié)包括課堂講授、實驗、考試等。其中課堂講授是通過教師對指定教材的大部分章節(jié)的講解，結合多媒體課件及啟發(fā)式、實例等教學法的應用，達到學生能掌握基本知識和基礎理論的目的。實驗課是通過具體的實驗讓學生早期接觸臨床免疫學檢驗，將學到的理論運用到實踐中，建立正確的邏輯思維，使知識融會貫通，從而提高學生分析問題、解決問題的能力，以達到培養(yǎng)高層次應用型醫(yī)學人才的目的。三、教學內容第一章 概論【掌握】免疫應答

3、各個階段，T淋巴細胞、B淋巴細胞與NK細胞的主要功能，免疫學檢驗包含內容?！臼煜ぁ恐袠忻庖咂鞴賹γ庖呒毎陌l(fā)育作用，外周免疫器官組成及在免疫應答中發(fā)揮的作用，補體系統(tǒng)的主要激活途徑?！玖私狻棵庖咻o助細胞在特異性免疫應答中發(fā)揮作用，臨床免疫學主要的研究方向，臨床免疫學及免疫檢驗在移植免疫、腫瘤免疫中的意義，現代免疫學技術包括方法。思考題：1、免疫應答主要分為哪幾個階段？2、T淋巴細胞、B淋巴細胞與NK細胞的主要功能分別是什么？3、免疫學檢驗可分為幾個部分？第二章 抗原抗體反應【掌握】抗原抗體反應概念、原理是什么，抗原抗體的結合力，抗原抗體反應特點，抗原抗體反應影響因素?！臼煜ぁ靠乖贵w反應的特異

4、性和交叉反應，抗原抗體反應的可逆性及其應用，抗原抗體反應的免疫學檢測技術。【了解】抗原抗體反應體系中抗原抗體的最適比例，標記免疫技術及其類型。思考題：1、什么是抗原抗體反應？抗原抗體反應的原理是什么？2、抗原抗體的結合力有哪些？3、抗原抗體反應有哪些特點？4、抗原抗體反應有哪些影響因素？第三章 免疫原和抗血清的制備【掌握】制備可溶性抗原，免疫佐劑和它的種類、作用機制，制備抗血清。【熟悉】免疫原，常用的細胞破碎方法，連接半抗原的載體種類，制備半抗原性免疫原的方法，純化抗原的鑒定。【了解】抗血清，多克隆抗體，動物采血方法，抗血清的鑒定。思考題：1、如何制備可溶性抗原？2、什么是免疫佐劑？免疫佐劑有

5、哪些種類？免疫佐劑的作用機制有哪些？3、如何制備抗血清？第四章 單克隆抗體與基因工程抗體的制備【自學】本章內容第五章 凝集反應【掌握】直接凝集反應、間接凝集反應、它們之間異同點，彩色膠乳凝集試驗的特點，直接coombs試驗、間接coombs試驗、它們之間的區(qū)別，抗球蛋白試驗的臨床應用?！臼煜ぁ磕磻奶攸c，間接血凝試驗原理，不完全抗體，凝集反應的優(yōu)缺點?！玖私狻靠骨虻鞍自囼灥念愋图捌湓恚磻陌l(fā)展趨勢。思考題：1、什么叫直接凝集反應，什么叫間接凝集反應？它們之間有何異同？2、彩色膠乳凝集試驗的特點是什么？3、什么是直接coombs試驗？什么是間接coombs試驗？它們之間有何區(qū)別？4、

6、敘述抗球蛋白試驗的臨床應用？第六章 沉淀反應【掌握】沉淀反應，免疫濁度測定法的原理方法與分類，免疫固定電泳的原理及臨床應用價值?！臼煜ぁ砍恋矸磻奶攸c，mancini曲線、Fahey曲線，影響免疫比濁測定的因素。【了解】單擴試驗的原理和應用，雙向擴散試驗進行抗原性質分析，自動化免疫比濁法的發(fā)展趨勢和應用前景。思考題：1、什么是沉淀反應？2、免疫濁度測定法的原理方法與分類？3、免疫固定電泳的原理及臨床應用價值？第七章 放射免疫技術【自學】本章內容第八章 熒光免疫技術【掌握】常用的熒光物質，熒光抗體及其制備、純化和鑒定熒光抗體，熒光抗體染色的方法、各自的反應原理，熒光免疫測定的基本原理、方法類型，

7、熒光酶免疫測定的原理、方法類型?！臼煜ぁ繜晒饷庖呒夹g類型，基本原理，時間分辨熒光免疫測定的原理，熒光偏振免疫測定的原理。【了解】熒光、熒光效率、熒光壽命和熒光淬本的概念，評價各種類型的熒光免疫測定，熒光免疫測定的應用思考題：1、常用的熒光物質有哪些？2、什么是熒光抗體？如何進行制備、純化和鑒定熒光抗體？3、熒光抗體染色有哪些方法？各自的反應原理是什么？4、熒光免疫測定的基本原理是什么？有哪些方法類型？5、熒光酶免疫測定的原理是什么？有哪些方法類型？第九章 酶免疫技術【掌握】常用酶的特點，常用的底物的種類和特點，包被與封閉作用，酶聯免疫吸附試驗（ELISA）的原理，競爭法在酶聯免疫檢測應用中的原

8、理和應用?！臼煜ぁ棵该庖呒夹g的要點，ELISA的非特異性干擾及其機制?！玖私狻繕擞浀拿敢?，固相載體的要求，固相酶免疫測定應用的原理及影響因素，酶免疫技術的應用評價。思考題：1、常用的酶有哪幾類？特點是什么？2、常用的底物有哪些？特點是什么？第十章 化學發(fā)光免疫分析技術【掌握】常用的化學發(fā)光劑和化學發(fā)光免疫分析的臨床應用【熟悉】化學發(fā)光的原理和化學發(fā)光的類型思考題：化學發(fā)光免疫分析的類型。第十一章 生物素-親和素放大技術【掌握】生物素親和素系統(tǒng)的特點和應用【熟悉】免疫熒光組織化學技術和酶免疫組織化學技術、免疫組織化學技術應用。【了解】親和組織化學染色、免疫標記電鏡技術思考題：1、生物素-親合素

9、系統(tǒng)基本類型及原理？2、生物素的分子結構特點是什么？第十二章 固相膜免疫測定【自學】本章內容第十三章 免疫組織化學技術【掌握】免疫組織化學的基本過程【熟悉】常用固相模和特點思考題：免疫組織化學技術有幾個主要步驟？第十四章 免疫細胞的分離及其表面標志檢測技術【自學】本章內容第十五章 免疫細胞功能檢測技術【自學】本章內容第十六章 細胞因子與細胞黏附因子的測定【自學】本章內容第十七章 流式細胞儀分析技術及應用【掌握】流式細胞儀的分析原理思考題：流式細胞儀的分析檢測原理是什么？第十八章 體液免疫球蛋白測定【掌握】免疫球蛋白的分類及各種免疫球蛋白的特點、血清IgG、IgM、IgA免疫比濁法測定原理及其臨

10、床意義?！臼煜ぁ縈蛋白、輕鏈、冷球蛋白檢測的意義。思考題：免疫球蛋白測定的臨床意義？第十九章 補體檢測及應用【掌握】三種補體活化途徑和補體測定的臨床應用?！臼煜ぁ垦a體成分的組成。思考題：1、補體的活化途徑有哪些？2、補體測定的臨床意義是什么？第二十章 免疫檢驗自動化儀器分析【了解】自動化免疫濁度分析儀器、自動化發(fā)光免疫分析儀器、自動化酶聯免疫分析系統(tǒng)儀器。思考題1、什么是免疫檢驗自動化，應用哪些技術？2、免疫濁度分析的原理是什么，有哪些臨床應用？第二十一章 臨床免疫檢驗的質量保證【掌握】免疫檢驗的質量控制原則和常用免疫檢驗的質量控制?！臼煜ぁ颗c質量保證相關的定義。思考題：免疫檢驗的質量控制原則

11、是什么？第二十二章 感染性疾病與感染免疫檢測【掌握】鏈球菌、傷寒沙門菌、結核分支桿菌感染的檢測，肝炎病毒感染的檢測及其臨床意義。思考題：1、乙型肝炎病毒的主要免疫診斷指標是什么？2、化膿性鏈球菌感染后可導致哪幾種最常見的超敏反應性疾??？第二十三章 超敏反應性疾病及其免疫檢測【掌握】四型超敏反應的機制?！臼煜ぁ克男统舴磻约膊∑涿庖邔W檢測。思考題：1、試比較14型超敏反應特點？2、使用青霉素可能引起哪些類型超敏反應，簡述其發(fā)病機制？第二十四章 自身免疫性疾病及其免疫檢測【掌握】自身免疫和自身免疫病概念，了解自身免疫性疾病的分類，熟悉自身免疫性疾病與免疫損傷?？购丝贵w、ENA抗體譜、RF檢測相關

12、的疾病和檢測的臨床應用，了解自身免疫性疾病的相關實驗檢測。思考題：1、區(qū)分自身免疫和自身免疫性疾??？2、抗ENA抗體譜的可檢測自身抗體項目包括哪些，有何臨床意義？第二十五章 免疫增殖性疾病及其免疫檢測【熟悉】常見免疫球蛋白增殖病，免疫球蛋白異常增殖常用的免疫檢測。思考題：常見的免疫球蛋白增殖病有哪些？第二十六章 免疫缺陷性疾病及其免疫檢驗【掌握】免疫缺陷病的概念、熟悉分類和特點，獲得性免疫缺陷綜合征及其檢測?！玖私狻砍Ｒ娫l(fā)性免疫缺陷病。思考題：艾滋病的免疫學特征是什么？HIV感染的臨床特點？第二十七章 腫瘤免疫與免疫學檢驗【掌握】腫瘤免疫和腫瘤免疫學檢驗、常見腫瘤標志物的臨床意義和評價【熟悉

13、】抗腫瘤免疫學效應機制，腫瘤標志物的定義與分類、腫瘤標志物檢測的影響因素和注意事項，【了解】腫瘤抗原的定義和腫瘤抗原的分類思考題：常用腫瘤標志物的臨床應用？第二十八章 移植免疫及其免疫檢測【掌握】排斥反應的免疫監(jiān)測，引起排斥反應的靶抗原，HLA分型?！臼煜ぁ颗懦夥磻姆N類【了解】常見的組織或器官移植，排斥反應的預防和治療。思考題：排斥反應有哪些主要類型，免疫檢測包括哪些方面？四、實驗實驗一：【實驗名稱】間接凝集實驗【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握間接凝集實驗的原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】RPR試劑、USR試劑【實驗要求】要求動手操作、設好陰性、陽性對照，設好標本編號，掌握操作

14、要領，認真觀察凝集試驗的特點，從開始到試驗終止，認真觀察結果?！舅伎碱}】1、直接凝集試驗和間接凝集實驗的區(qū)別？2、RPR和USR的實驗原理的區(qū)別？實驗二：【實驗名稱】間接凝集實驗【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握ASO、RF、CRP間接凝集實驗的原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】類風濕因子膠乳凝集試劑（）、鏈球菌溶血素“”測定（）試劑、反應蛋白膠乳凝集試劑（）【實驗要求】、是臨床實驗室常規(guī)項目，方法學由定性到半定量到定量分析，由膠乳直接凝集到及免疫比濁法，要求掌握膠乳直接凝集法的特點?！舅伎碱}】ASO、RF、CRP檢測的臨床意義。實驗三：【實驗名稱】膠體金試驗【實驗性質】綜合性實驗【

15、實驗目的】掌握免疫滲濾試驗和免疫層析試驗的原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】膠體金早早孕試劑、結核抗體IgM、IgG免疫滲濾試劑【實驗要求】了解二種方法的操作過程，結果的觀察及反應特點有何不同。【思考題】1、免疫滲濾試驗和免疫層析試驗的區(qū)別？2、兩個實驗的臨床意義？實驗四：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗雙抗體夾心法【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）雙抗體夾心法原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】乙型肝炎病毒表面抗原測定（HBsAg）試劑、酶標儀、采血針和生化管【實驗要求】了解什么是，特點是什么，掌握在聚苯乙烯固相載體表面組裝免疫活性物質形成免疫吸附劑，

16、酶標記免疫活性物質，化學顯色進行信號放大，二步溫育反應，二次洗滌過程，靈敏度、特異性相對較高。【思考題】1、ELISA雙抗體夾心法的原理？2、乙肝表面抗原測定的臨床意義？實驗五：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗雙抗原夾心法【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）雙抗原夾心法原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】乙型肝炎病毒表面抗體測定（HBsAb）試劑、酶標儀【實驗要求】掌握基本方法和原理，本試驗是采用雙抗原夾心法，是一種常見方法，應用針對待測抗體的2種抗原分別作為固相抗原和酶標抗原檢測溶液中的抗體?！舅伎碱}】1、雙抗原夾心法的原理？2、表面抗體測定的臨床意義？實驗六

17、：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗競爭法【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）競爭法原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】乙型肝炎病毒核心抗體測定（抗）試劑、酶標儀【實驗要求】掌握競爭法的特點，本試驗是用已知抗原包被在固相載體上、同時加入待測抗體和酶標記抗體，二者同時競爭性與固相抗原結合、結果待測抗體與固相抗原結合競爭性的占據了酶標記抗體的結合位點，使酶標記的抗體呈游離狀態(tài)被洗掉，結果無色或略顯淺色，二者呈負相關。（陽性反應）反之呈陰性?！舅伎碱}】1、掌握競爭法的原理？2、臨床檢測核心抗體的臨床意義？實驗七：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗雙抗體夾心法【實驗性質】綜合性

18、實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）雙抗體夾心法原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】乙型肝炎病毒e抗原測定（HBeAg）試劑、酶標儀【實驗要求】掌握操作中應注意哪些事項，實驗的結果受操作影響很大，每個步驟包括加樣、溫育、洗滌、顯色、酶標儀讀數均應認真負責才能充分發(fā)揮的高靈敏、強特異性的優(yōu)點。因此應建立實驗項目的標準操作程序（）?！舅伎碱}】1、雙抗原夾心法測定e抗原的原理？2、臨床檢測乙肝e抗原的意義？實驗八：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗競爭法【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）競爭法原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】乙型肝炎病毒e抗體測定

19、（HBeAb）試劑、酶標儀【實驗要求】在試驗中注意影響實驗結果的因素有哪些，主要有兩大因素：一為內源性干擾因素，如類風濕因子、補體、異嗜性抗體、治療性抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物、小分子、總蛋白濃度等。二為外源性干擾因素、溶血、細菌污染、標本貯存時間過長、凝固不全，反復凍融等?！舅伎碱}】1、競爭法檢測e抗體的原理?2、影響ELISA 檢測的因素有哪些?3、e抗體檢測的臨床意義?實驗九：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗間接法抗體檢測【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）間接法檢測抗體的原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】乙型肝炎病毒表面抗體測定（HCVAb）試

20、劑、酶標儀【實驗要求】了解目前抗試劑盒存在哪些問題1、主要是在低危人群中仍發(fā)現大量的不確定和假陽性結果，再則仍有較長的“窗口期”。2、核心抗原的減少程度把握不好的話，有可能會導致漏檢的發(fā)生。3、由于這些試劑所使用抗原只是病毒的部分重組多蛋白或合成肽抗原，加之固相對這些蛋白或多肽的吸附能力的局限性，使得固相上能捕獲抗體的抗原決定基的數量有限，從而影響測定的敏感性。【思考題】1、間接法側抗體的原理?2、測定丙肝抗體的臨床意義?實驗十：【實驗名稱】酶聯免疫吸附試驗捕獲法【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握酶聯免疫吸附試驗（ELISA）捕獲原理和操作【實驗時數】4學時【實驗教具】甲型肝炎病毒抗體（抗

21、IgM、IgG）試劑、酶標儀【實驗要求】掌握捕獲法的測定原理【思考題】1、捕獲法的原理？2、臨床檢測甲型肝炎病毒抗體的臨床意義？實驗十一：【實驗名稱】單項免疫擴散【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握單項免疫擴散技術的原理和操作【實驗時數】2學時【實驗教具】免疫球蛋白IgG、IgA、IgM試劑【實驗要求】掌握單項免疫擴散技術的原理和操作，并且知道單項免疫擴散技術的影響因素?！舅伎碱}】1、單項免疫擴散的原理？2、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定的臨床意義？實驗十二：【實驗名稱】免疫印記技術【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握免疫印跡技術的原理和操作【實驗時數】4學時【實驗教具】抗抗體譜檢測試劑【實驗要求】掌握免疫印記技術的原理和操作，ENA抗體譜中各種抗體的臨床意義?！舅伎碱}】1、免疫印記技術的原理？2、ENA抗體譜的臨床意義？實驗十三：【實驗名稱】間接免疫熒光技術【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】掌握間接免疫熒光技術的原理和操作【實驗時數】4學時【實驗教具】抗核抗體（）檢測試劑【實驗要求】掌握間接免疫熒光技術的原理和操作，熟悉ANA抗體常見的ANA熒光圖形及臨床意義?！舅伎碱}】1、間接免疫熒光方法的原理？2、常見ANA熒光圖形及臨床意義？實驗十四：【實驗名稱】實驗技術考核【實驗性質】綜合性實驗【實驗目的】HBsAg