毛細(xì)管SPME的裝置與操作過(guò)程

1、毛細(xì)管spme的裝置與操作過(guò)程 固相微萃取技術(shù)經(jīng)過(guò)十幾年的進(jìn)展，已經(jīng)非常成熟。特殊是與gc的聯(lián)用，可以用法商品化的自動(dòng)進(jìn)樣器完成萃取和進(jìn)樣等步驟，但對(duì)于液相色譜，卻向來(lái)沒(méi)有適用的自動(dòng)進(jìn)樣設(shè)備，只能用法手動(dòng)進(jìn)樣器與hplc接口完成挺直進(jìn)樣。作為一種樣品前處理技術(shù)，假如不能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化進(jìn)樣，就很難用于常規(guī)分析，因此，pawliszyn又于1997年首次提出毛細(xì)管固相微萃取(in-tube spme)辦法，將涂有固定相的gc毛細(xì)管柱用于樣品萃取，并與商品化hplc自動(dòng)進(jìn)樣器相連，尤需用法特別的接口舉行解析，使固相微萃取與液相色譜的聯(lián)用實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化。同時(shí)還克服了纖維spme的涂層經(jīng)溶劑浸泡洗脫簡(jiǎn)單造成溶

2、脹脫落的問(wèn)題。也有人將此技術(shù)稱(chēng)為涂層毛細(xì)管微萃取(coated capillary microextrac-tion，ccme)。 因?yàn)槿魏蝕c開(kāi)管毛細(xì)管柱都可以用于in-tube spme，也大大拓寬了spme-hplc技術(shù)的應(yīng)用范圍。目前可供用法的gc毛細(xì)管柱多種多樣，強(qiáng)極性的固定相種類(lèi)更遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于商品化的spme纖維，使之更適合于強(qiáng)極性化合物的測(cè)定。 一、毛細(xì)管spme的裝置與操作過(guò)程 將一段gc開(kāi)管毛細(xì)管柱安裝在hplc自動(dòng)進(jìn)樣針和進(jìn)樣管之間，為避開(kāi)計(jì)量泵的污染，進(jìn)樣管應(yīng)向來(lái)置于流路中。毛細(xì)管的銜接用法的是一小段聚醚醚酮(polyether ether ketone，peek)材質(zhì)的微管

3、，再用一不銹鋼箍與流路相連。萃取之前，需用流淌相如甲醇等沖洗毛細(xì)管，并使流淌相停歇在毛細(xì)管中。萃取開(kāi)頭后將六通閥扳到“l(fā)oad”位置，進(jìn)樣針在微機(jī)的控制下，反復(fù)將樣品瓶中的樣品吸入、排出毛細(xì)管若十次。當(dāng)樣品被吸入毛細(xì)管時(shí)，分析物就被富集在管壁的固定相中，而當(dāng)樣品被排出毛細(xì)管，回到樣品瓶中時(shí)，流淌相又再次進(jìn)入毛細(xì)管，固定相卜萃取的分析物就有可能解析下來(lái)，因此流淌相造成的影響需通過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)加以解決。萃取結(jié)束后，進(jìn)樣針會(huì)從溶劑瓶中吸入流淌相或其他溶劑洗脫固定相中富集的分析物，帶入后面的進(jìn)樣管(loop)中，待分析物解吸徹低之后將六通閥搬到“injection”的位置使流淌相將進(jìn)樣管中的分析物帶入液相

4、色譜柱分別測(cè)定。囫圇裝置和操作過(guò)程3-13所示。 圖3-13 in-tube spme操作和裝置暗示圖 應(yīng)用自動(dòng)進(jìn)樣器可以使萃取、解吸和進(jìn)樣過(guò)程不問(wèn)斷舉行，也提高了分析的精確度和精密度多次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于6。當(dāng)樣品中含有分配系數(shù)較高的分析物時(shí)。所需的平衡時(shí)光較長(zhǎng)，但樣品被反復(fù)吸入和排出毛細(xì)管，口丁以起到攪動(dòng)樣品的作用，縮短到達(dá)吸附平衡的時(shí)光。因?yàn)榉治鑫镌诿看瘟魈氏嗯懦雒?xì)管時(shí)都會(huì)有部分解吸，所以in-tube spme不能徹低萃取樣品中的分析物通常萃取的化合物量取決于涂層的極性、樣品被吸入排出毛細(xì)管的次數(shù)和體積，以及樣品的ph值。 毛細(xì)管內(nèi)的涂層挑選與纖維spme辦法相同，也遵循“相像相

5、溶”的原則，針對(duì)極性的化合物，應(yīng)挑選極性的涂層。用于萃取的毛細(xì)管長(zhǎng)度在6060cm范圍內(nèi)是最好的。毛細(xì)管太短，萃取效率較低，毛細(xì)管太長(zhǎng)，萃取的分析物在解析時(shí)過(guò)于簇?fù)恚蜁?huì)浮現(xiàn)峰展寬的現(xiàn)象。樣品總的吸排體積可以用進(jìn)樣針和毛細(xì)管的總體積來(lái)計(jì)算增強(qiáng)吸排的次數(shù)和體積也能提高萃取效率，但常常使色譜峰展寬。樣品吸排的流速會(huì)同時(shí)影響萃取率和辦法的精密度，即較高的吸排速度一方面可以良好地?cái)噭?dòng)樣品，使分析物的質(zhì)量傳遞加快，增強(qiáng)萃取效率；另一方面。又會(huì)使流淌相中產(chǎn)憤怒泡，降低萃取的效率和精密度。因此最優(yōu)的吸排流速范圍是50100ul·min-1。低于此流速范圍，萃取時(shí)問(wèn)較長(zhǎng)，不利于迅速分析的舉行。 平衡

6、時(shí)光對(duì)in-tube spme也非常重要。不同于纖維spme，其萃取時(shí)光的優(yōu)化需要通過(guò)萃取量對(duì)吸排樣品的次數(shù)作優(yōu)化曲線來(lái)舉行挑選：而其他的萃取條件如樣品的ph值、鹽度等調(diào)整方式則與纖維spme辦法相同。 進(jìn)樣的體積就是徹低解吸分析物所需的流淌相體積。gou等用60cm長(zhǎng)的毛細(xì)管萃取分析物之后再用不同體積的流淌相洗脫，按照得到的色譜峰分析，發(fā)覺(jué)洗脫曲線并非線性的開(kāi)頭的20ul，流淌相使62的分析物解吸，接下來(lái)的20ul才又解吸了24的分析物，若使分析物達(dá)到100解吸共需要60ul的流淌相。 比較in-tube spme辦法與纖維 spme法，二者各有各的優(yōu)缺點(diǎn)，但最大的差別就在于萃取的化合物一個(gè)是富集在纖維的表面，另一個(gè)是富集在毛細(xì)管的內(nèi)壁in-tube spme用法細(xì)徑毛細(xì)管，為防止柱和流路的阻塞，必需在萃取前去除樣品中的顆粒物，因此in-tube spme適合潔凈水樣的分析。而纖維spme不用去除樣品中的顆粒物，由于可以用頂空萃取消退干擾。或在挺直萃取后用水沖洗纖維清除其上的顆粒物，但纖維易于折斷，還會(huì)在進(jìn)樣和攪動(dòng)中遭到破壞。 in-tube spme和纖維spme均可與hplc聯(lián)用，但二者的進(jìn)樣方式也存在差別。纖維spme中要將纖維裸露在進(jìn)樣接日中，用流淌相或其他溶劑沖洗纖維，待分析物完個(gè)解吸后，再進(jìn)入色譜柱分別。因?yàn)槟承┓?/p>