過(guò)敏性紫癜患兒血清ＩＬ－８ＩＬ－１２及ＴＮＦ－α表達(dá)的意義

1、過(guò)敏性紫癜患兒血清、及表達(dá)的意義 【摘要】 目的探討血清白細(xì)胞介素-8(IL-8)、白細(xì)胞介素-12(IL-12)及腫瘤壞死因子-(TNF-)在過(guò)敏性紫癜(HSP)患兒中表達(dá)及其臨床意義。方法 對(duì)本研究采用ELISA方法檢測(cè)了48例過(guò)敏性紫癜患兒(其中22例合并腎臟損害)以及30例正常健康兒童的血清IL-8、IL-12及TNF-水平，分別比較急性期和緩解期以及有無(wú)合并腎損害的過(guò)敏性紫癜患兒的細(xì)胞因子水平；分析IL-8、IL-12與TNF-是否存在相關(guān)關(guān)系。結(jié)果 HSP患兒血清IL-8、IL-12與TNF-水平高于健康對(duì)照組(P<001)；無(wú)腎損害HSP與紫癜性腎炎(HSPN)組血

2、清IL-8、IL-12水平均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；HSPN組腫瘤壞死因子-水平高于無(wú)腎損害HSP組； HSP血清TNF-水平與IL-8正相關(guān)(r=0524 P<001)。HSP患兒血清TNF-水平與IL-12正相關(guān)(r=0670，P<001)。結(jié)論 細(xì)胞因子IL-8、IL-12及TNF-可能參與HSPHSPN發(fā)病過(guò)程。 【關(guān)鍵詞】過(guò)敏性紫癜；白細(xì)胞介素-8；白細(xì)胞介素-12；腫瘤壞死因子- 【Abstract】 Objective To investigate the of serum levels of interleukin 8(IL-8)，interleukin 12

3、(IL-12) and tumor necrosis factor-(TNF-)，and probe their clinical significance in children with Henoch-Schonlein purpura(HSP)Henoch-Sehonlein purpura nephritis(HSPN).MethodsTo examine the serum levels of IL-8、IL-12 and TNF-of children with HSPHSPN by ELISA，and analyze the changes and the correlation

4、 between the aforementioned cytokines in children with HSPHSPN. ResultsSerum levels of IL-8，IL-12 and TNF-of children with HSP were higher than those of control group(P< 001). No significant difference was found between non-renal involvement HSP and HSPN group on serum levels of IL-8 and IL-1

5、2.But the serum level of TNF-of HSPN was higher than that of non-renal involvement HSP. The serum level of TNF-was was positively correlated to the serum levels of IL-8，IL-12 of patients with HSP(r=072, P< 001；r=078, P< 001)Conclusion The cytokines of IL-8 and IL-12 may play role in th

6、e pathogeny of HSP，and the TNF- cause resulting in the HSPN. 【Key words】Henoch-schonlein purpura ； Interleukin 8; Interleukin 12; Tumor necrosis factor- 過(guò)敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura，HSP)是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的一種血管性疾病，發(fā)病率高，且易反復(fù)發(fā)作，常繼發(fā)腎臟損害即過(guò)敏性紫癜性腎炎（henoch-schonlein purpura nephritis，HSPN)，嚴(yán)重影響了患兒的身心健康，并給社會(huì)和家庭帶來(lái)嚴(yán)重的

7、經(jīng)濟(jì)和精神上的危害。其病因、發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。本文通過(guò)對(duì)HSP患兒白細(xì)胞介素-8(IL-8)、白細(xì)胞介素-12(IL-12)及腫瘤壞死因子-(TNF-)的檢測(cè)旨在探討它們?cè)贖SP和HSPN發(fā)病機(jī)制中的作用及其相互關(guān)系，期望在HSP的治療方面提供一些新的理論依據(jù)。 1 資料與方法 11 一般資料 病例組(HSP組)48例為2005年12月至2007年12月在本院兒科住院初次確診為HSP且未接受治療患兒； HSP的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考1990年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)公布的診斷標(biāo)準(zhǔn)。病例組根據(jù)患兒是否存在腎臟損害分為HSPN和無(wú)腎損害組。HSPN組22例為HSP患兒病程中出現(xiàn)腎臟損害表現(xiàn)，如血尿、蛋白尿、 腎功

8、能異常等。男12例，女10例；年齡(75±23)歲。無(wú)腎損害組26例為HSP患兒無(wú)腎臟損害表現(xiàn),其中男14例，女12例；年齡(79±29)歲。正常對(duì)照組：2006年6月至2007年12月來(lái)本院門診體檢的健康兒童，其中男18例，女12例，年齡(72±26)歲。各組兒童性別、年齡比較差異無(wú)顯著性。 12 檢測(cè)方法 121 標(biāo)本采集 治療前清晨空腹無(wú)菌采靜脈血2 ml，3 000 轉(zhuǎn)/min 離心10 min，分離收集血清，置于-20冰箱保存待測(cè)。 122 血清IL-8、IL-12及TNF-水平的檢測(cè)采用雙抗體夾心酶免疫吸附法(ELISA)，試劑盒購(gòu)自深圳晶美有限公司，

9、檢測(cè)儀器為Hyperion MR III型酶標(biāo)儀，在410 nm處讀出吸光度(A)值，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。 13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 120軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料用x±s表示，比較用t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用直線相關(guān)分析，P< 005為有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2 結(jié)果 21 HSP與正常對(duì)照組兒童血清IL-8、IL-12及TNF-水平比較 HSP患兒血清IL-8、IL-12與TNF-水平高于正常對(duì)照組兒童(P< 005),見(jiàn)表1。 22 HSPN與無(wú)腎損害組血清IL-8、IL-12及TNF-水平比較 HSP患兒血清IL-8、IL-12與TNF-水平高于正常對(duì)照

10、組兒童(P< 001),見(jiàn)表1。 23 HSP患兒血清IL-8、IL-12與TNF-相關(guān)分析 HSP患兒血清IL-8 與TNF-水平呈正相關(guān)(r=072,P< 001)。HSP患兒血清IL-12 與TNF-水平呈正相關(guān)(r=078, P< 001)。 3 討論 HSP的確切病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確，其發(fā)病率有逐年上升趨勢(shì)1。HSPN是兒科最常見(jiàn)繼發(fā)性腎小球疾病，其嚴(yán)重程度直接影響HSP預(yù)后。近年來(lái)越來(lái)越多的研究表明，過(guò)敏性紫癜患兒存在細(xì)胞及體液免疫功能的紊亂，炎性介質(zhì)分泌增加，多克隆B細(xì)胞活化及免疫球蛋白的分泌增加2。 IL-8是由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生

11、， 是可趨化和激活中性粒細(xì)胞蛋白質(zhì)多肽。HSP患兒免疫復(fù)合物的形成可誘導(dǎo)單核-巨嗜細(xì)胞合成并分泌IL-8。在IL-8刺激下，中性粒細(xì)胞胞漿Ca 增多，出現(xiàn)脫顆粒和呼吸爆發(fā)反應(yīng)，導(dǎo)致溶酶體酶釋放和過(guò)氧化氫類物質(zhì)產(chǎn)生。IL-8降低認(rèn)為與免疫復(fù)合物在毛細(xì)血管壁沉積，促使IL-8到毛細(xì)血管等微循環(huán)中有關(guān)。HSP急性期特征性表現(xiàn)是外周血白細(xì)胞增多及血管周圍多形核白細(xì)胞浸潤(rùn)，可激活內(nèi)皮細(xì)胞釋放大量IL-8，而IL-8增加有助于HSP患兒血管周圍聚集和白細(xì)胞增多,因此IL-8又可以通過(guò)趨化中性粒細(xì)胞釋放溶酶體酶，導(dǎo)致毛細(xì)血管破壞3。本組血清IL-8水平明顯高于健康對(duì)照組，提示IL-8參與HSP發(fā)病。IL-8

12、是HSP發(fā)病機(jī)制中重要的炎性反應(yīng)性細(xì)胞因子之一，對(duì)判斷HSP患者病情及預(yù)后有顯著意義。 IL-12主要由B細(xì)胞產(chǎn)生，是誘導(dǎo)組織特異性自身免疫的關(guān)鍵細(xì)胞因子，對(duì)自身免疫疾病的發(fā)病及病理性T細(xì)胞產(chǎn)生極重要作用。有人認(rèn)為，IL-12可能是抗原遞呈細(xì)胞(APC)產(chǎn)生的最重要的細(xì)胞因子，亦參與抗體介導(dǎo)的自身免疫性疾病，IL-12的主要生理功能是促進(jìn)ThO細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化、發(fā)展的重要因子，它能抑制ThO細(xì)胞向Th2細(xì)胞的分化4。在本文中發(fā)現(xiàn)，HSP患兒及有腎臟損害的患兒血清中IL-12均升高，與正常對(duì)照組比較有顯著差異，說(shuō)明IL-12參與HSP的發(fā)生與發(fā)展。 TNF- 是一種由單核一巨嗜細(xì)胞分泌的具有

13、多種生物活性的多肽調(diào)節(jié)因子，既參與機(jī)體的免疫防御功能，又作為機(jī)體的炎性反應(yīng)、損傷、甚至休克發(fā)病中的重要介質(zhì)，亦可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)等黏附分子 ，黏附分子在炎性反應(yīng)時(shí)對(duì)白細(xì)胞的移動(dòng)起重要作用，促進(jìn)白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮致血管內(nèi)皮損傷。適量TNF-參與機(jī)體正常免疫調(diào)節(jié)，是機(jī)體免疫防護(hù)重要介質(zhì)，分泌過(guò)多則參與機(jī)體免疫病理?yè)p傷，導(dǎo)致某些疾病。HSP患者可通過(guò)I、型變態(tài)反應(yīng)，損傷毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，使TNF-分泌增加，提示TNF-參與HSP的發(fā)生、發(fā)展。當(dāng)TNF- 與其受體結(jié)合時(shí)可引起細(xì)胞溶解破壞。同時(shí)TNF-亦能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變，并抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，高水平TNF

14、-還可使血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡增加，從而引起腎小球血管壁損傷5。本文HSPN患兒血清TNF-明顯高于健康對(duì)照及無(wú)腎損害HSP組，提示TNF-水平增高與HSPN發(fā)病有密切關(guān)系。 總之，HSP的發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，但免疫系統(tǒng)的異常是主要原因，其中存在多種免疫細(xì)胞活化及眾多細(xì)胞因子參與，IL-8、IL-12與TNF-作為HSP重要炎性反應(yīng)性因子，參與HSPHSPN病理生理過(guò)程。細(xì)胞因子測(cè)定為研究HSPHSPN發(fā)病機(jī)制提供免疫學(xué)依據(jù)，而且可為使用免疫調(diào)節(jié)劑治療提供依據(jù)，還可作為預(yù)測(cè)HSPHSPN預(yù)后的參考指標(biāo)。 參考文獻(xiàn) 1 Gardner-Medwin JM ，Dolezalova P，Cummins C，

15、et al.Incidence of Henoch-Schonlein purpura，Kawasaki disease，and rare vasculitides inchildren of different ethnic origins.Lancet,2002,360：1197-1205. 2 陳譜，何韶衡，陳穗.過(guò)敏性紫癜患兒血漿白細(xì)胞介素分泌譜及意義.中華兒科雜志，2005，43(4)：312-313. 3 Yang YH，Lai HJ，Huang CM，et al.Sera from children with active Henoch-Schenlein purpura can enhance the production of interleukin -8 by human umbilical venous endothel