2019年抗生素微生物檢定法

1、uj iduj*5 5 匕0 p, c o m 好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)抗生素微生物檢定法一、目的：闡述抗生素微生物的檢定法。二、適用范圍：適用于抗生素微生物檢定法。三、責(zé)任者：品控部。四、正 文：1簡(jiǎn)述抗生素微生物檢定法，依試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理不同，可分為稀釋法、比濁法和瓊脂擴(kuò)散法。后 二者被列為抗生素微生物檢定的國(guó)際通用方法。中國(guó)獸藥典采用管碟瓊脂擴(kuò)散法?？股毓艿鷻z定法是利用抗生素在攤布特定試驗(yàn)菌的固體培養(yǎng)基內(nèi)球面形擴(kuò)散，形成含一定濃度抗生素球形區(qū)，抑制了試驗(yàn)菌的繁殖而呈現(xiàn)出透明的抑菌圈。此法系根據(jù)抗生素在 一定濃度范圍內(nèi)，對(duì)數(shù)劑量與抑菌圈直徑(面積)呈線性關(guān)系，通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品產(chǎn) 生

2、抑菌圈的大小，計(jì)算出供試品的效價(jià)。抗生素效價(jià)以"單位(u)”或“微克(ug)”表示。2儀器與用具2.1 操作室 光線明亮，操作室應(yīng)分為兩部分，彼此分開；一部分為一般操作問(wèn)，一 部分為半無(wú)菌操作間。半無(wú)菌操作間，設(shè)有紫外線燈達(dá)到空氣消毒。應(yīng)裝有空調(diào)設(shè)備，控制 室溫在20-25 C o操作臺(tái)可用穩(wěn)固的水泥臺(tái)，臺(tái)面用玻璃板墊平，用水平儀校準(zhǔn)，保持水平。 室內(nèi)注意抗生素的污染。2.2 雙碟 為硬質(zhì)玻璃或塑料培養(yǎng)平皿，內(nèi)徑約90mm高16-17mm碟底厚薄土§勻水平, 無(wú)氣泡.碟底平度檢查，可將雙碟放在水平臺(tái)上，下墊一張白紙，碟內(nèi)加2-3ml,再滴加藍(lán)墨水， 觀察藍(lán)色深汪是否一致.用

3、過(guò)的雙碟經(jīng)高壓滅菌倒出培養(yǎng)基后 ，置玻璃儀器專用洗液或其他 清洗液中浸泡過(guò)夜，沖洗，瀝干，置150-160C干熱滅菌2小時(shí)或高壓121c蒸氣滅菌30分鐘, 備用。2.3 陶瓦蓋 內(nèi)徑約為103mm外徑108 mm平坦，吸水性強(qiáng)，應(yīng)定期干燥、清洗。2.4 鋼管 內(nèi)徑(6.0 ±0.1 ) mm高(10.0 ±0.1) mm 外徑(8.0 ±0.1 )或(7.8 ±0.1 ) mm每套鋼管重量差異不超過(guò)土 0.05g,內(nèi)外壁及兩端面光潔平坦，管壁厚薄一致。每次使 用后應(yīng)置1: 1000新潔爾滅溶液內(nèi)，浸泡2小時(shí)以上，進(jìn)行滅菌后再行洗滌，先用水洗滌，更多免費(fèi)資

4、料下載請(qǐng)進(jìn)： http:好好學(xué)習(xí)社區(qū)uj iduj*5 5 匕0 p, c o m好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)淋干，再用蒸儲(chǔ)水沖洗3超聲波超聲30分鐘或用沾有去污粉的紗布條擦內(nèi)外壁， 用水沖洗, 次后，置帶蓋的溶器內(nèi)，在150-160 C干熱滅菌2小時(shí)備用2.5 鋼管放置器置于半無(wú)菌操作間內(nèi)，有6孔和4孔兩種，鋼管下落時(shí)應(yīng)垂直平穩(wěn)、位置正確，雙碟升降平穩(wěn)。應(yīng)保持清潔，防止抗生素污染?？啥ㄆ谟?5叱醇棉擦試，并用乙醇棉炎焰燒小孔。置鋼管的玻璃管定期干烤滅菌。2.6 恒溫培養(yǎng)箱 隔水式為宜，35-37 C及24-26 C,隔板上可備有帶孔的玻璃板并墊 平。2.7 滅菌刻度吸管吸取菌液及培養(yǎng)基用。試

5、驗(yàn)用后應(yīng)立即置5%5炭酸或者0.2%新潔 爾滅溶液中消毒后再按玻璃容器常規(guī)洗滌。吸口處塞入脫棉（應(yīng)松動(dòng)，透氣） ，置適宜容器 中，120 c以上干熱滅菌2小時(shí)或121c蒸氣滅菌30分鐘，烘干備用。2.8 玻璃容器包括滴定管、移液管、刻度吸管、容量瓶等，按“玻璃器皿檢定規(guī)程” 進(jìn)行標(biāo)定，要符合一等品規(guī)定，每次應(yīng)用前用清潔液浸泡，水沖洗、蒸儲(chǔ)水沖洗3次，淋干。好好學(xué)習(xí)社區(qū)更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)：http:uj iduj*5 5 匕0 p, c o m好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)2.9 稱量瓶 具塞，重量在10 g以下。用畢先用水沖洗、淋干，置清潔液浸泡 2小時(shí)以上，水先、蒸儲(chǔ)水沖洗 3次，置潔凈的大

6、平皿中，在120c干熱3小時(shí)，待冷至70-60 C時(shí)，取出置于干燥器中備用。2.10 毛細(xì)滴管 用玻璃管拉制，管口光滑。應(yīng)用前清潔液浸泡、水沖洗、蒸儲(chǔ)水沖洗3次，置適宜容器中，在120c干燥3小時(shí)備用。2.11 天平 分析天平，感量0.1mg。2.12 抑菌圈直徑（面積）測(cè)量?jī)x。2.12.1 可用CHEffi抑菌圈面積測(cè)量?jī)x及適當(dāng)?shù)臏y(cè)試儀。 儀器必須按抑菌圈測(cè)量?jī)x檢驗(yàn) 規(guī)程檢驗(yàn)，符合規(guī)定者方能應(yīng)用2.12.2 游標(biāo)卡尺 精度0.05 mm,長(zhǎng)度125 mm2.13 超凈工作臺(tái)用于菌種的接各或傳代。超凈工作臺(tái)須置潔凈工作室或半無(wú)菌室內(nèi)。3試液3.1 滅菌緩沖液 制備緩沖液的試劑應(yīng)為分析純，配制后

7、的緩沖液應(yīng)澄明，分裝于玻 璃容器內(nèi)，經(jīng)121c蒸氣滅菌30分鐘備用。3.1.1 磷酸鹽緩沖液（PH6.0）取磷酸氫二鉀2g與磷酸二氫鉀8g,加水使成1000ml, 濾過(guò)。3.1.2 磷酸鹽緩沖液（PH7.0）取磷酸氫二鉀 9.39g與磷酸二氫鉀 3.5g,加水使成1000ml,濾過(guò)。3.1.3 磷酸鹽緩沖液（PH7.8）取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g,加水使成 1000ml,濾過(guò)。3.1.4 磷酸鹽緩沖液（PH0.5）取磷酸氫二鉀35g,加氫氧化鉀液（10mol/L） 2ml,加 水使成1000ml,濾過(guò)。4 培養(yǎng)基培養(yǎng)基中原料的質(zhì)量對(duì)抑菌圈邊緣清晰度及試驗(yàn)結(jié)果的精確度影響較大，

8、因此應(yīng)對(duì)原材料進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，挑選適當(dāng)?shù)钠放剖褂?。制成的培養(yǎng)基不應(yīng)有沉淀，如產(chǎn)生沉淀，可在配制培 養(yǎng)基后，置115C, 20分鐘溶化，趁熱用紙漿減壓或適宜方法過(guò)濾，調(diào)整 PH值，分裝滅菌 備用。好好學(xué)習(xí)社區(qū)更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)：uj iduj*5 5 匕0 p, c o m 好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)根據(jù)中國(guó)獸藥典2005年版，抗生素微生物檢定法中選用不同處方的培養(yǎng)基。目前市場(chǎng)已有干燥培養(yǎng)基商品生產(chǎn)、供應(yīng)。臨用時(shí)按照使用說(shuō)明書進(jìn)行配制，但注意培養(yǎng)基的PH應(yīng)符合規(guī)定，否則必須校正后，滅菌備用。5試驗(yàn)用菌種檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌種，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，為冷凍干燥菌種。5.1 菌種的復(fù)蘇與保存在無(wú)菌室

9、或超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。5.1.1 菌種的復(fù)蘇 把凍干菌種管、滅菌1 ml毛細(xì)滴管、雙碟、銀子、營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面數(shù)支，移入接種室或超凈工作臺(tái)。 將凍干菌種管外壁用磺酒擦洗消毒、 稍干，用75叱醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內(nèi)，待干。點(diǎn)燃酒精燈，將菌種管的封口一端，使驟冷而炸裂。 取滅菌銀子，在火焰旁，將炸裂的管口打開，放入滅菌雙碟內(nèi)，另取 1支滅 菌毛細(xì)滴管，在火焰旁吸取營(yíng)養(yǎng)肉湯少許，加至菌種管底部，將凍干菌塊攪動(dòng)促使溶解，隨 即吸出管內(nèi)菌液，分別接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面及普通肉湯內(nèi)，并將毛細(xì)滴管及菌種管投入消毒 液內(nèi)，將已接種的營(yíng)養(yǎng)肉湯及營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面置35-37 C培養(yǎng)2

10、2-24小時(shí)。 取出培養(yǎng)物，仔細(xì)觀察菌苔形態(tài)、有無(wú)雜菌、涂片、革蘭氏染色鏡檢，呈典 型菌落后，轉(zhuǎn)種植代即可應(yīng)用。如發(fā)現(xiàn)菌形不典型，可進(jìn)行平板分離單菌落。5.1.2 菌種的接種與保存 準(zhǔn)備需用的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基應(yīng)新鮮制備，如斜面已無(wú)冷凝水者，不宜再使用，標(biāo)簽一注明菌名用接種日期。自冰箱取出的菌種斜面，應(yīng)在室溫放置約30分鐘，待溫度平衡后再移入接種室或超凈工作臺(tái)。 點(diǎn)燃酒精或其他燈，在左手握住菌種斜面，將管口靠近火焰旁，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅30秒種，隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過(guò)3次。右手用無(wú)名指、小指及掌部夾住棉塞，左手將管口在火

11、焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手再輕輕撥開棉塞， 將接種環(huán)伸入管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷卻再移至菌苔上，刮取少量菌苔，隨 即取出接種棒，并將菌種管口移至火焰旁。堵上棉塞，左手將菌種管放下，取營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 1支，照上述操作打開棉塞，將接種環(huán)但入管內(nèi)至瓊脂斜面的底部，由底向上，將接種環(huán)輕 貼斜面的表面曲折移動(dòng)，使細(xì)菌劃在斜面的表面上。 取出接種棒，在火焰旁將培養(yǎng)基管用棉塞堵上，然后將接種過(guò)細(xì)菌的接種棒 在火焰上燒灼滅菌。更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)： 好好學(xué)習(xí)社區(qū)uj iduj*5 5 匕0 p, c o m 好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng) 將已接種畢的細(xì)菌管置35-37 C培養(yǎng)22

12、-24小時(shí)，霉菌管一般置24-25 C霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7日。取出后放入冰箱保存，一般 1-3個(gè)月轉(zhuǎn)種一次。5.2 菌懸液的制備5.2.1 枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis CMCC(B)63501 )懸液取枯草芽桿菌工作用 菌種營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物加滅菌水 1-2ml將菌苔洗下，制成懸液，用吸管將此懸液接種至盛 有營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的扁培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，均勻攤布，在 35-37 C培養(yǎng)7日。取菌苔少許涂片，革蘭 氏染色鏡檢，應(yīng)有芽抱85%Z上，用滅菌水10ml將芽抱洗下，制成芽抱懸液，合并至滅菌大 試管內(nèi)，在70-75 C水浴內(nèi)加熱30分鐘將菌體殺死，待冷后放冰箱貯藏為濃菌液。日常用菌懸液取

13、上述濃菌液，用滅菌水1: 3稀釋至滅菌試管中，冰箱保存?zhèn)溆谩?.2.2 短小芽抱桿菌Bacillus pumilus aureus CMCC(B)26003懸液取短小芽抱桿菌工作用菌種營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，照上述方法制備芽抱懸液。5.2.3 金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus CMCC(B)26003 懸液取金黃色葡萄球 菌工作用菌種的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，用接種環(huán)取菌苔少許接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜上，在35-37 C 培養(yǎng)20-22小時(shí)，臨用時(shí)，用滅菌水將菌苔洗下，制成懸液。此液在冰箱保存，可使用日。5.2.4 藤黃微球菌Micrococcus luteus CMCC(B)2800

14、1 懸液取藤黃微球菌工作菌種的 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，用1ml培養(yǎng)基田將菌苔洗下，用吸管移至盛有營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的扁培 養(yǎng)瓶中，將菌液布滿培養(yǎng)基表面，將培養(yǎng)瓶反放于培養(yǎng)箱中26-27 C培養(yǎng)24小時(shí)后，取出用 吸管吸取培養(yǎng)基R 5ml,至培養(yǎng)瓶中，將菌苔洗下，合并菌液至滅菌大管中備用。該菌液在 冰箱中保存，可使用1-2月。5.2.5 大腸桿菌Escherichia coli CMCC(B)441033懸液取大腸桿菌工作用菌種的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，照金黃色葡萄球菌懸液制備方法進(jìn)行，此菌液只供當(dāng)天使用。試驗(yàn)菌的菌齡對(duì)抑菌圈邊緣清晰度有一定影響，保持菌種的新鮮，對(duì)易變的菌株如藤黃 微球菌等在制備菌液前進(jìn)

15、行單菌落的分離，選擇典型菌落以保持懸液中菌群的一致性，所得 抑菌圈邊緣清晰、整齊。6操作方法6.1 稱量6.1.1 稱量前，將標(biāo)準(zhǔn)品從冰箱取出，使與室溫平衡；供試品應(yīng)放于干燥器內(nèi)至少30分鐘方可稱取。6.1.2 稱量供試品與標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用同一天平；吸濕性較強(qiáng)的抗生素，在稱量前1-2小時(shí)更換天平內(nèi)干燥劑。 更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)：好好學(xué)習(xí)社區(qū)uj iduj*5 5 匕0 p, c o m好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)6.1.3 標(biāo)準(zhǔn)品與供試品的稱量最好一次取樣稱取，不得將已取出的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品倒 回聽容器內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)品稱量不可少于 20mg取樣后立即將稱量瓶或適宜的容器及被稱物蓋好, 以免吸水。稱樣量的計(jì)算

16、:W=VCP式中 W 為需稱取標(biāo)準(zhǔn)品或供試品的重量（mg；V為溶解標(biāo)準(zhǔn)品或供試品制成濃溶液時(shí)用容量瓶的體積量C為標(biāo)準(zhǔn)品或供試品的濃度（單位 n/ml或©/ml）；P為標(biāo)準(zhǔn)品的純度或供試品的估計(jì)效價(jià)（單位mg或©/mg）6.2 稀釋稀釋操作應(yīng)遵照容量分析的操作規(guī)程。6.2.1 從冰箱中取出的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，必須先在室溫放置，使其溫度達(dá)到室溫后，方可量取。6.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液的稀釋應(yīng)采用容量瓶，每步稀釋，取樣量不得少于2 ml為宜，稀釋步驟一般不超過(guò)3步。舉例：取濃溶液1000仙/ml。第一步：取 5ml （1000仙 /ml） 一 50ml 量瓶中一 100u/ml。第

17、二步：取 5ml （100仙 /ml） 一 50ml 量瓶中一 10u/ml （H）。取 5ml （100仙 /ml） 一 100 ml 量瓶中一 5u/ml （L）6.2.3 每次吸取溶液用密刻度玻璃吸管，量取溶液前要用被量液流洗吸管23次，吸取樣品溶液后，用濾紙將外壁多余液體擦去，從起始刻度開始放溶液。6.2.4 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品與供試品用的緩沖液應(yīng)同一批和同瓶，以免因PH或濃度不同影響測(cè)定結(jié)果。6.2.5 稀釋時(shí)，每次加液至容量瓶近刻度前，稍放置片刻，待瓶壁的液體完全流下， 再準(zhǔn)確補(bǔ)加至刻度。6.2.6 （2.2）法，標(biāo)準(zhǔn)品與供試品高、低溶液濃度之比為 2: 1或4: 1。（3.3）法, 標(biāo)準(zhǔn)

18、品與供試品高、中、低溶液濃度之比為 1: 0.8。但所選用的濃度必須在劑量反應(yīng)直線范 圍內(nèi)。6.3 雙碾的制備在半無(wú)菌室內(nèi)進(jìn)行，應(yīng)注意微生物及抗生素的污染，培養(yǎng)基應(yīng)在水浴 中或微波爐中融化，避免直火加熱。好好學(xué)習(xí)社區(qū)更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)：uj iduj*5 5 匕0 p, c o m 好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)6.3.1 底層用滅菌大口吸管（20ml）或其它滅菌分裝器，吸取已融化的培養(yǎng)基20ml注 入雙碟內(nèi)，等凝固后更換干燥的陶瓦蓋，放于35-37 C培養(yǎng)箱中保溫，使易于攤布菌層。6.3.2 菌層取出試驗(yàn)用菌懸液，按已試驗(yàn)妥的菌量（2.2）法標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高濃度所致的抑菌圈直徑在18-22mm

19、 （3.3 ）法標(biāo)準(zhǔn)品溶液的中心濃度所致的抑菌直徑在15-18mm,用滅菌吸管吸取菌懸液加入已融化并保溫在水浴中（一般細(xì)菌48-50 C,芽抱可至60 C）的培養(yǎng)基內(nèi)，搖勻作為菌層用。用滅菌大口 10ml吸管或其它分裝器，吸取菌層培養(yǎng)基 5ml,使 均勻攤布在底層培養(yǎng)基上，置水平臺(tái)上，用陶瓦圓蓋覆蓋，放置20-30分鐘，待凝固，備用。6.3.3 放置鋼管用鋼管放置器，將干熱滅菌的銀子或適宜方法將鋼管裝于玻璃管中, 放于鋼管放置器上，將雙碟打開，放入雙碟臺(tái)上，托起雙碟臺(tái)，使鋼管平穩(wěn)落在培養(yǎng)基上，注意使各個(gè)鋼管下落的高度基本一致。鋼管放妥后，應(yīng)使雙碟靜置5-10分鐘，使鋼管在瓊脂內(nèi)稍下沉穩(wěn)定后，再

20、開始滴加抗生素溶液。6.4 滴加抗生素溶液6.4.1 每批供試品取4-10個(gè)雙碟，滴加溶液用毛細(xì)滴管或定量加樣器，在滴加之前須用滴加液洗2-3次。6.4.2 滴加標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液，因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)方法不同而異。（2.2）法，在雙碟的4個(gè)鋼管中分別成對(duì)角滴加標(biāo)準(zhǔn)品（S）及供試品（T）高（H）、低（L）兩種濃度的溶液。（3.3）法的 6個(gè)鋼管中間隔3個(gè)鋼管分別滴加標(biāo)準(zhǔn)品及供試品高、中（刈、低3種濃度溶液，并使相同 濃度成對(duì)角。滴加溶液的順序：（2.2）法SHTHSLTL;（3.3）法SHTHSMhTMHSLTL。 滴加溶液至鋼管口平滿，注意滴加溶液間隔不可過(guò)長(zhǎng)，因溶液的擴(kuò)散時(shí)間不同影響測(cè)定結(jié)果。6.4

21、.3 每份滴加的溶液為1單位，但雙碟數(shù)每次不超過(guò)5個(gè)，如1份溶液滴加雙碟數(shù) 目多，可分次滴加。每種溶液各用 1支毛細(xì)滴管。6.4.4 滴加完畢，用陶瓦蓋覆蓋雙碟，平穩(wěn)置于雙碟托盤內(nèi)，雙碟疊放不可超過(guò) 3個(gè), 避免受熱不均，影響抑菌圈大小，以水平位置平穩(wěn)移入培養(yǎng)箱中間位置，35-37 C或30-32 C 培養(yǎng)至所需時(shí)間。6.5 抑菌圈測(cè)量6.5.1 將培養(yǎng)妥的雙碟取出，打開陶瓦蓋，將鋼管倒入盛有1: 1000新潔爾滅溶液或其它消毒液內(nèi)，換以玻璃蓋，按樣品號(hào)排妥；測(cè)量抑菌圈前應(yīng)檢查抑菌是否圓整，如有破圈 或圈不圓整應(yīng)將該碟棄之，切忌主觀挑選抑菌圈及雙碟，使結(jié)果造成偏倚。6.5.2 測(cè)量換菌圈可用抑

22、菌圈自動(dòng)測(cè)量分析系統(tǒng)，也可用游標(biāo)卡尺；使用游標(biāo)卡尺測(cè)更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)：好好學(xué)習(xí)社區(qū)uj iduj*5 5 匕0 p, c o m好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)量時(shí)，眼睛視線應(yīng)與讀數(shù)刻度垂直，用游標(biāo)卡尺的尖端與抑菌圈直徑的切點(diǎn)成垂直方向測(cè)量7 記錄與計(jì)算7.1 試驗(yàn)記錄應(yīng)包括抗生素的品種、劑型、標(biāo)示量、生產(chǎn)廠、批號(hào)、檢驗(yàn)?zāi)康摹z驗(yàn) 依據(jù)、檢驗(yàn)日期、溫度、濕度，標(biāo)準(zhǔn)品與供試品的稱量、稀釋步驟與核對(duì)人，抑菌圈測(cè)量結(jié) 果。當(dāng)用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑時(shí)，應(yīng)將測(cè)試數(shù)據(jù)以框圖方式順雙碟數(shù)記錄清。當(dāng)用測(cè)量 儀測(cè)量面積或直徑時(shí)，電腦測(cè)試、計(jì)算、統(tǒng)計(jì)分析的打印紙貼附于上。7.2 計(jì)算7.2.1 劑量法計(jì)算公式T

23、2+T1-S2-S1P=log-1x I X 100%T2+S2-T1-S1式中P為供試品效價(jià)（相當(dāng)于標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)的百分?jǐn)?shù)）；&為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；S為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；T2為供試品高濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；T1為供試品低濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；I為高、低劑量之比的對(duì)數(shù)值，2: 1時(shí)，1=0.301 。4: 1時(shí)，1=0.602舉例乳糖酸紅霉素效價(jià)測(cè)定結(jié)果計(jì)算（見表 1）。估計(jì)效價(jià)（Ar） =6.03u/mg劑距（I） =0.30115532+12528-15491-12472P=log-1義 0.

24、301 X100%=101.12%15491+15532-12472-12528效價(jià)（Pr） =PX Ar=603 u/mg x 101.12%=609.75 u/mg好好學(xué)習(xí)社區(qū)更多免費(fèi)資料下載請(qǐng)進(jìn)：uj iduj*5 5 匕0 p, c o m好好學(xué)習(xí)天天向上德信誠(chéng)培訓(xùn)網(wǎng)表1抑菌圈面積結(jié)果SHSLTHTL115711276158112682148111991523117331523130214971263415181214153312265157312371543126861546121915801224714951260152612408153012371548126391605125615931293101649127216081320154911247215532125288結(jié)果判斷8.1 可靠性測(cè)驗(yàn) 該法的設(shè)計(jì)是根據(jù)量反應(yīng)平行線原理，在實(shí)驗(yàn)所用的劑量范圍內(nèi)， 對(duì)數(shù)劑量和反應(yīng)呈直線關(guān)系，供試品和標(biāo)準(zhǔn)品的直線應(yīng)平行。當(dāng)用卡尺測(cè)量后的結(jié)果，將參 數(shù)輸入電腦，有專用(2.2)法和(3.3)法的軟件程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。用測(cè)量?jī)x測(cè)量抑菌圈時(shí)， 測(cè)量與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理一次完成，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析按藥典生物檢定統(tǒng)計(jì)規(guī)定進(jìn)行 F的顯著性測(cè)驗(yàn)。(2.2) 此法要求直線回歸、劑問(wèn)P< 0.01 ,偏離平行P>0