腦膜炎奈瑟氏菌危害性評估報(bào)告

1、腦膜炎雙球菌危害性評估報(bào)告1 危害程度分類 1.1 分類等級 根據(jù)中華人民共和國傳染病防治法 ， 由腦膜炎雙球菌引起的流行性腦脊髓膜炎屬于乙類傳染病。在衛(wèi)生部 2006 年公布的人間傳染病的病原微生物名錄中將腦膜炎雙球菌列為 危害程度第三類病原微生物。運(yùn)輸包裝菌株或活菌培養(yǎng)物為B 類， UN 編號為 UN3373 。1.2 不同實(shí)驗(yàn)室操作生物安全實(shí)驗(yàn)室級別要求 根據(jù)人間傳染病的病原微生物名錄要求： 腦膜炎雙球菌培養(yǎng)屬于大量活菌操作，應(yīng)在符 合n級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL 2）要求實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。樣本檢測應(yīng)在 BSL 2實(shí)驗(yàn)室中進(jìn) 行。2 背景資料2.1 一般生物學(xué)特性腦膜炎雙球菌屬奈瑟氏菌屬，革蘭

2、氏陰性雙球菌、直徑約0.60.8 m,無芽胞、無鞭毛、新分離菌株多有莢膜和菌毛。培養(yǎng)特性： 營養(yǎng)要求高，需在含有血液、 血清等培養(yǎng)基中才能 生長，最適溫度 37C、最適PH7.47.6，專性需氧，5%CO可促進(jìn)生長。2.2 抵抗力 腦膜炎雙球菌對外界環(huán)境和理化因素抵抗力弱。對青霉素、鏈霉素、磺胺藥物等均敏感。2.3 致病因素及致病機(jī)制2.3.1 致病因素：腦膜炎雙球菌主要致病物質(zhì)是莢膜、菌毛和內(nèi)毒素。2.3.2 致病機(jī)制：莢膜有抗吞噬和保護(hù)菌體免受體液中殺菌物質(zhì)的損傷，利于細(xì)菌在體內(nèi)的存活和繁殖。 菌毛與鼻咽部粘膜上皮細(xì)胞表面的菌毛特異性受體結(jié)合， 使其粘附于呼吸道粘 膜上皮細(xì)胞表面，得于細(xì)菌

3、的粘附和侵入，并操作粘膜上皮細(xì)胞。內(nèi)毒素可引起發(fā)熱、 小血管及毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、 局部血管栓塞及出血， 出現(xiàn)出血性皮疹或瘀斑。 可重時(shí)可導(dǎo)致 中毒性休克及 DIC 。2.4 傳播途徑和感染的后果2.4.1 傳播途徑：呼吸道傳播。2.4.2 感染的后果：感染后大多數(shù)表現(xiàn)為鼻咽部帶菌狀態(tài)，少數(shù)成為流腦患者，主要臨床表 現(xiàn)為突發(fā)性高熱，頭痛、嘔吐、皮膚和粘膜出血點(diǎn)或瘀斑及頸項(xiàng)強(qiáng)直等腦膜刺激癥狀。2.5 流腦的預(yù)防、診斷、治療2.5.1預(yù)防：注射A群腦膜炎雙球菌多糖菌苗可有效預(yù)防流腦；目前已有A+ C腦膜炎雙球菌 多糖菌苗。實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)在實(shí)驗(yàn)活動(dòng)前注射流腦疫苗，待產(chǎn)生抗體后，進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。2.

4、5.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)：1）、臨床表現(xiàn)：突發(fā)性高熱，頭痛、嘔吐、皮膚和粘膜出血點(diǎn)或瘀斑及頸項(xiàng)強(qiáng)直等腦膜刺激 癥狀。2）、實(shí)驗(yàn)室診斷： 病人腦脊液或急性期血液分離到腦膜炎雙球菌；從病人腦脊液或急性期血清或尿中檢測到腦膜炎雙球菌群特異性多糖抗原； 檢測病人恢復(fù)期血清抗體效價(jià)較急 性期呈4倍或4倍以上升高；以 PCR檢測到病人急性期血清或腦脊液中腦膜炎雙球菌的 DNA特異片段。臨床表現(xiàn)加實(shí)驗(yàn)室診斷中的任一項(xiàng)就可以確診流腦。2.5.3 治療：根據(jù)臨床對癥治療。3 擬從事實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的危險(xiǎn)性分析及相應(yīng)的預(yù)防措施3.1 標(biāo)本的采集及運(yùn)送3.1.1 可能危害：樣品采集：鼻咽拭采樣，有可能患者打噴嚏或咳嗽而將唾液噴到

5、工作人員 面部； 腦脊液和血液采樣時(shí)，有可能發(fā)生針刺傷工作人員；樣本運(yùn)送過程中，有可能發(fā)生溢 漏和濺出，污染操作人員的手或樣品運(yùn)送箱。3.1.2 預(yù)防和處理措施：3.1.2.1 預(yù)防措施1） 、在樣品采集過程中要有相適應(yīng)的生物安全防護(hù)水平所需要的個(gè)人防護(hù)用品（隔離衣、 帽、 口罩、鞋套、手套、防護(hù)眼鏡） ，防護(hù)材料、器材和防護(hù)措施。2）、具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員。3）、具有有效防止病原微生物擴(kuò)散和感染的措施。4）、樣品運(yùn)送中按 B 類感染性物質(zhì)包裝要求。3.1.2.2 處理措施一旦發(fā)生樣本溢漏和濺出應(yīng)立即用浸有 0.5%的含氯消毒劑多重軟布擦拭標(biāo)本容器和污染到 的表面。樣本管的

6、外層包裝如能高壓的可以進(jìn)行高壓滅菌處理，不能高壓的材料應(yīng)用0.5%的含氯消毒劑浸泡 30 分鐘后處理。3.2 腦膜炎雙球菌的培養(yǎng)及鑒定3.2.1 可能危害 在腦膜炎雙球菌培養(yǎng)和鑒定過程中， 試管開封、 培養(yǎng)物刮取、 革蘭氏染色涂片時(shí)均易產(chǎn)生氣 溶膠； 培養(yǎng)物制劑濺出造成的嚴(yán)重污染； 可能發(fā)生培養(yǎng)瓶或平皿的破損導(dǎo)致培養(yǎng)物泄漏， 造 成污染；對實(shí)驗(yàn)材料或廢物的處理也可能導(dǎo)致污染；3.2.2 預(yù)防處理措施3.2.2.1 預(yù)防措施1）、腦膜炎雙球菌的從樣品開啟、培養(yǎng)、鑒定等一系列操作必須在BSL2 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行；2）、操作者在實(shí)驗(yàn)全過程中應(yīng)按相應(yīng)的生物安全防護(hù)要求，確保穿戴好一切防護(hù)用品。

7、 操作全過程應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）。3）、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)盡可能減少玻璃器皿的應(yīng)用。玻璃器材有任何的破損和裂痕都不能使用。3.2.2.2 處理措施1） 、菌液污染手部，立即浸于0.5%次氯酸鈉，經(jīng)510分鐘再用肥皂水及水沖洗干凈。2） 、菌液流灑桌面、地面或其他表面，用布或紙巾覆蓋并吸收。向紙巾上傾倒消毒劑（0.5% 次氯酸鈉或 0 . 1 %的過氧乙酸） ，并立即覆蓋周圍區(qū)域，用消毒劑從外向內(nèi)進(jìn)行消毒處理，作用 30 分鐘后，將所處理物質(zhì)清理掉。如果含有碎玻璃或其他銳器，則要使用簸箕或硬的 紙板來收集處理過的物品，并將它們置于可防刺透的容器中以待處理。3）、生物安全柜內(nèi)菌（毒）液

8、的灑溢如果少量的按上述辦法消毒后可繼續(xù)工作。 如果在灑溢量比較大，應(yīng)立即停止工作， 在風(fēng)機(jī)工作狀態(tài)下， 按上述辦法進(jìn)行臺面消毒，然 后將柜內(nèi)全部物品移出， 打開在、 臺面鋼板， 往下層槽中加入消毒液使整個(gè)收集槽被消毒液 覆蓋， 30 分鐘后打開收集槽下面的放水閥門，將消毒液緩慢放出收集到一容器中，擦拭干 凈后再用清水擦洗干凈，蓋好臺面鋼板。再進(jìn)行紫外線照射消毒。4 工作人員素質(zhì)腦膜炎雙球菌實(shí)驗(yàn)室共有技術(shù)人員 2 名，申請進(jìn)入 BSL2 級實(shí)驗(yàn)室 2名。兩名技術(shù)人員均 為中專畢業(yè)， 一名為檢驗(yàn)專業(yè)， 一名為公共衛(wèi)生專業(yè)。 兩名技術(shù)人員均未從事過腦膜炎雙球 菌檢驗(yàn)工作。所有人員均參加過生物安全培訓(xùn)

9、，其中省級 1 名，兩人次，本單位培訓(xùn)兩名 1 人次。 所有技術(shù)人員均學(xué)習(xí)過生物安全手冊并簽署知情同意書，經(jīng)體檢健康狀態(tài)良好。 工作人員素質(zhì)評價(jià)表見附表。5 評估結(jié)論5.1 各種實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的防護(hù)措施1）、在樣品采集和運(yùn)送過程中， 可能發(fā)生空氣污染等。 因此在樣品采集時(shí)必須按要求穿好個(gè) 人防護(hù)用品 （隔離衣、 帽、 口罩、 鞋套、 手套、 防護(hù)眼鏡） 。樣品運(yùn)送包裝要按 B 類包裝（兩 層包裝，主容器必須密封，輔助包裝必須防泄漏） 。2）、所有標(biāo)本都應(yīng)按潛在感染性標(biāo)本進(jìn)行處理，所有操作都要在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，個(gè)人防護(hù)措施要按生物安全二級實(shí)驗(yàn)室防護(hù)級別進(jìn)行個(gè)人防護(hù)。實(shí)驗(yàn)完畢后能高壓的廢棄物在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)121 C高壓處理20分鐘，不能高壓的物品用含有有效氯的次氯酸鈉溶液進(jìn)行浸泡消毒 30分鐘以上。運(yùn)送至焚燒爐。5.2 感染控制和醫(yī)療監(jiān)測5.2.1 禁忌人群：從事腦膜炎雙球菌檢測的實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下才能進(jìn)入 BSL 2 實(shí)驗(yàn)工作。出現(xiàn)下列情況不能進(jìn)入：由于多種原因所致抵抗力下降、腹瀉、 孕婦及哺乳期婦女、或