實(shí)驗(yàn)一普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌三形觀察

1、一、目的要求一、目的要求了解顯微鏡的構(gòu)造和各部分的作用，掌握了解顯微鏡的構(gòu)造和各部分的作用，掌握顯微鏡的使用方法顯微鏡的使用方法學(xué)習(xí)并掌握油鏡的原理和使用方法學(xué)習(xí)并掌握油鏡的原理和使用方法了解細(xì)菌的三種基本形態(tài)了解細(xì)菌的三種基本形態(tài)u 普通光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造可分為兩部分：一為機(jī)械裝置，二為光學(xué)系統(tǒng) 。機(jī)械裝置由鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、推動(dòng)器、粗動(dòng)螺旋臺(tái)、推動(dòng)器、粗動(dòng)螺旋和微動(dòng)螺旋微動(dòng)螺旋等部件組成。光學(xué)系統(tǒng)由目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾光片、虹彩光圈光片、虹彩光圈等組成 普通光學(xué)顯微鏡基本構(gòu)造u 油鏡的工作原

2、理油鏡的工作原理 滴加鏡油的作用滴加鏡油的作用 （1） 增加照明亮度增加照明亮度 （2） 增加顯微鏡的分辨率增加顯微鏡的分辨率 分辨率（最小可分辨距離）分辨率（最小可分辨距離）=/2NA 式中式中=光波波長(zhǎng)光波波長(zhǎng) ； NA=物鏡的數(shù)值孔徑值物鏡的數(shù)值孔徑值 NA= nsin(/2 ) n:n: 物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率 ：鏡口角（即入射角）鏡口角（即入射角） 油鏡，即油浸接物鏡。油鏡，即油浸接物鏡。當(dāng)光線(xiàn)通過(guò)玻片與鏡當(dāng)光線(xiàn)通過(guò)玻片與鏡頭之間的空氣時(shí)，由頭之間的空氣時(shí)，由于空氣與玻片的密度于空氣與玻片的密度不同，使光線(xiàn)受到曲不同，使光線(xiàn)受到曲折，發(fā)生散射，降低折

3、，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的其折射率與玻片的相近相近），則幾乎不發(fā)），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野生折射，增加了視野的進(jìn)光量，從而使物的進(jìn)光量，從而使物象更加清晰。象更加清晰。三、實(shí)驗(yàn)器材 顯微鏡、擦鏡紙、雙層瓶（香柏油、二甲顯微鏡、擦鏡紙、雙層瓶（香柏油、二甲苯）等。苯）等。 細(xì)菌三型標(biāo)本片（球菌、桿菌、螺旋菌）細(xì)菌三型標(biāo)本片（球菌、桿菌、螺旋菌）四、操作步驟四、操作步驟 （一）觀察前的準(zhǔn)備（一）觀察前的準(zhǔn)備1.1.取鏡和安放取鏡和安放 置顯微鏡于平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊沿約為置顯微鏡于平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座距

4、實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊沿約為34cm。鏡。鏡檢者姿勢(shì)要端正。檢者姿勢(shì)要端正。2.2.光源調(diào)節(jié)光源調(diào)節(jié) 安裝在鏡座內(nèi)的光源燈可通過(guò)調(diào)節(jié)電流或電壓來(lái)獲得適當(dāng)?shù)恼彰靼惭b在鏡座內(nèi)的光源燈可通過(guò)調(diào)節(jié)電流或電壓來(lái)獲得適當(dāng)?shù)恼彰髁炼龋挂曇皟?nèi)的光線(xiàn)均勻，亮度適宜。亮度，使視野內(nèi)的光線(xiàn)均勻，亮度適宜。3.3.根據(jù)使用者個(gè)人情況，調(diào)節(jié)雙目顯微鏡的目鏡根據(jù)使用者個(gè)人情況，調(diào)節(jié)雙目顯微鏡的目鏡 雙目顯微鏡的目鏡間距可以適當(dāng)調(diào)節(jié)，使其與觀察者兩個(gè)眼睛瞳雙目顯微鏡的目鏡間距可以適當(dāng)調(diào)節(jié)，使其與觀察者兩個(gè)眼睛瞳孔的距離相符?？椎木嚯x相符。 （二）顯微觀察（二）顯微觀察1.1.低倍鏡觀察低倍鏡觀察將標(biāo)本片放在載物臺(tái)上，用標(biāo)本夾夾住，調(diào)節(jié)

5、標(biāo)將標(biāo)本片放在載物臺(tái)上，用標(biāo)本夾夾住，調(diào)節(jié)標(biāo)本移動(dòng)螺旋，使目的物處于物鏡的正下方。本移動(dòng)螺旋，使目的物處于物鏡的正下方。調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，使物鏡（調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，使物鏡（1010）與標(biāo)本靠近，眼）與標(biāo)本靠近，眼睛在側(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。睛在側(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。張開(kāi)雙眼向物鏡里觀察，如果見(jiàn)到目的物，但不張開(kāi)雙眼向物鏡里觀察，如果見(jiàn)到目的物，但不十分清楚，可用細(xì)調(diào)螺旋，至目的物清晰為止。十分清楚，可用細(xì)調(diào)螺旋，至目的物清晰為止。 2. .高倍鏡觀察高倍鏡觀察使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。目的物后將它移

6、至視野正中處。旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動(dòng)，這說(shuō)明原來(lái)低倍鏡并沒(méi)有片立即停止旋動(dòng)，這說(shuō)明原來(lái)低倍鏡并沒(méi)有調(diào)準(zhǔn)，目的物并沒(méi)有真正找到，必須用低倍調(diào)準(zhǔn)，目的物并沒(méi)有真正找到，必須用低倍鏡重新調(diào)節(jié)。鏡重新調(diào)節(jié)。（物鏡的同焦現(xiàn)象）物鏡的同焦現(xiàn)象）如果高倍鏡下觀察目的物有點(diǎn)模糊，調(diào)節(jié)細(xì)如果高倍鏡下觀察目的物有點(diǎn)模糊，調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)螺旋，直到視野清晰。調(diào)螺旋，直到視野清晰。3.3.油鏡觀察油鏡觀察先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野正中。用粗調(diào)螺旋下降載物臺(tái)。正中。用粗調(diào)螺旋下降載物臺(tái)。在載玻片

7、上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒(méi)在油中，盡量貼近載玻片。節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒(méi)在油中，盡量貼近載玻片。然后再用細(xì)調(diào)螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗調(diào)螺旋）。然后再用細(xì)調(diào)螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗調(diào)螺旋）。油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。（應(yīng)特別注意不要因在下降鏡頭時(shí)用力過(guò)猛，或者調(diào)焦（應(yīng)特別注意不要因在下降鏡頭時(shí)用力過(guò)猛，或者調(diào)焦時(shí)誤將粗調(diào)節(jié)螺旋向反方向轉(zhuǎn)動(dòng)而損壞鏡頭及載玻片）時(shí)誤將粗調(diào)節(jié)

8、螺旋向反方向轉(zhuǎn)動(dòng)而損壞鏡頭及載玻片） 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí) 請(qǐng)確保油鏡頭擦拭干凈！請(qǐng)確保油鏡頭擦拭干凈！1.不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件, ,以免損壞。以免損壞。2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度以保證光潔度3.觀察標(biāo)本時(shí)，必須依次用低、高倍鏡，最后觀察標(biāo)本時(shí)，必須依次用低、高倍鏡，最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時(shí)，特別在使用油鏡用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時(shí)，特別在使用油鏡時(shí)，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或時(shí)，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。損傷鏡面。4.觀察時(shí)，兩眼睜開(kāi)，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察觀察時(shí)，兩眼睜開(kāi)，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習(xí)慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀的習(xí)慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時(shí)，右眼注視繪圖。察時(shí)，右眼注視繪圖。5.拿顯微鏡時(shí)，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡拿顯微鏡時(shí)，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。座，不可單手拿，更不可傾斜拿。顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項(xiàng)顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項(xiàng)五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪圖，記錄所觀察到的細(xì)菌三種繪圖，記錄所觀察到的細(xì)菌三種基本形態(tài)?；拘螒B(tài)。六、問(wèn)題與討論六、問(wèn)題與討論 1 1、使用高倍鏡與油鏡調(diào)焦時(shí)應(yīng)注意什么？、使用高倍鏡與油鏡調(diào)焦時(shí)應(yīng)注意什么？ 2 2、使用油鏡時(shí)，在載