紫外分光光度法測定維生素B1片含量以及方法驗證-2

1、0845051089藥學一班陳秋娟紫外分光光度法測定維生素B片含量以及方法證驗紫外分光光度法測定維生素B片含量以及方法驗證班級：08級藥學一班姓名：陳秋娟學號：0845051089摘要目的：采用紫外分光光度法對維生素 B片含量進行測定及此方法的驗證方法：運用紫外分光光度法在入=246nm處測定吸光度，并運用百分吸收系數(shù)（E1cm ）法（標示量（% =AX DX W平均 X E1cm - 1 X X W- 1 X 標示量-1 X100% 和對照品比較法進行計算。結(jié)果：該維生素B片維生素B含量：用百分吸收系數(shù)（E；m）法計算標示量 （%為93.05%;對照品比較法計算標示量（%為94.33%;用標

2、準曲線法計算標示量為102.87%=實驗方法驗證：維生素 B1片含量為7.5 /ml 17.5仙g/ml 時，維生素B濃度與吸光度成良好的線性關(guān)系；平均回收率（）為103.53%; RSD（%） 為 1.17%。結(jié)論：紫外分光光度法對本實驗測定專屬性好，并且方法簡單易操作。該維 生素B1片維生素B1含量為93.05%,符合本品含維生素 B （G2H7ClN4OS.HCD應(yīng) 為標示量的90.0% 110.0%的規(guī)定為合格。維生素B 紫外分光光度法含量測定實驗內(nèi)容（一）1、儀器與試藥電子天平（XX司，編號：XX , XXK外分光光度計（編號：XX,廠家：XX）。 維生素B1 （批號：XX,生產(chǎn)廠家

3、：XX&司），維生素B1對照品（精制原料，由中 國藥品生物制品檢定所提供，批號：xx）, 輔料空白（根據(jù)維生素B1片處方工 藝配制），鹽酸溶液（9 1000）,純化水。2、處方分析：組成處方量（g）比例（%）維生素Bi1016.39淀粉2032.78糊精3049.18硬脂酸鎂1.01.639生產(chǎn)1000 片根據(jù)處方量分析，維生素 B含16.39%,輔料含83.61%。平均片重約61mg取相當于25mg隹生素B的片粉約0.15g3、收波長的選擇 維生素B1在PH=7時的吸收光譜上有兩個吸收峰：232233nm 266 nm；在PH= 2時為吸收峰為246nm 維生素B 1在 246 nm

4、的吸收峰干擾因素少，吸收又最強，中國藥典（ 百分吸收系數(shù)（421）為計算含量依據(jù)2010年版）規(guī)定以246 nm處吸收峰的維生素B1片輔料紫外掃描圖維生素B1片紫外掃描圖維生素B1對照品紫外掃描圖維生素B1對照品、片劑和輔料紫外掃描圖（二）、測定方法：取供試品20片，精密稱定，研細，稱取片粉適量（約相當于維生素B25mg, 置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9 1000）約70ml,振搖15min使維生素B1溶解, 再加鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾 液5ml,置另一 100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度，搖勻，照 分光光度法，在246n

5、m勺波長處測定吸收度，按G2H7ClN4OS.HCl的吸收系數(shù)（E；m ） 為421計算，即得。（三）、方法驗證1 .線性和范圍精密稱取維生素B對照品約25mg置100 ml量瓶中，加鹽酸溶液（9 1000） 溶解并稀釋至刻度，制備成含維生素B 250仙g/ml的對照溶液。分別精密量取OO7/1OOOOOOOO,<J光吸標準曲線 系列1線性（系列1）該溶液3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度， 搖勻，即得系列濃度的對照品溶液，照分光光度法，在 246nm的波長處測定吸收 度，以吸收度（A）對濃度（C）回歸處理，得標準曲線和回歸方程。標準曲線測定數(shù)

6、據(jù)12345濃度7.51012.51517.5吸收度0.2720.3710.4840.5740.677y = 0.0405x - 0.0309 R2 = 0.9991Illi5101520對照品溶液濃度( n g/ml)2 .回收試驗（準確度試驗）對照品溶液的制備：對照品溶液的制備，同 2.1項下供試品溶液的制備：精密稱取維生素B精制原料約0.25g,置50ml量瓶中， 加入鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度，搖勻，制成 5.0mg/m維生素B溶液儲備 液；分別精密量取該溶液4、5、6ml置已加入比例量輔料（0.15g , 1/100天平） 的100ml量瓶中（一式三份），加鹽酸溶液（9 10

7、00）約70ml,振搖使之溶解， 再加鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml,置另一 100ml量瓶中，搖勻，得高、中、低三種濃度的試驗溶液，照分光光度法，在246nm的波長處測定吸收度，用對照品比較法計算含量吸收加入濃度測定濃 回收率均值RSD(%)三組總度(A)(a g/ml)度(N g/ml)(%)(%)RSD(%)0.3941010.49104.9%低0.3941010.49104.9%104.9%0%0.3941010.49104.9%0.48812.512.81102.48%中0.49012.512.86102.88%102.61%0.278%1.17%0.

8、49012.512.48102.88%0.5961515.48103.2%高0.5951515.45103%103.07%0.112%0.5951515.45103%3、精密度試驗取供試品20片，精密稱定，研細，稱取片粉適量（約相當于維生素B25mg, 一式5份，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9 1000）適量，振搖15min,再加 鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml,置另一100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9 1000）稀釋至刻度，搖勻，即得約含維生素 B112.5mg/ml的供試品溶液。另取維生素 B對照品適量，用鹽酸溶液（9 1000）稀釋制成12.5 p

9、g/ml 的對照品溶液。照分光光度法（ChP200口部附錄IVA）在246nm處分別測定供 試品溶液和對照品溶液的吸光度，用百分吸光度和對照品比較法分別進行計算， 即得。編號12345對照品質(zhì)量（g）0.17160.17140.17150.17170.171712.5 n g/ml吸光度（A）0.4900.4870.4870.4900.4900.519百分吸收系數(shù)編號12345測定含量（%）93.25%92.78%92.73%93.34%93.34%平均含量（%）93.05%RSD(%)0.274%對照品比較法編號12345測定含量()94.55%94.08%94.03%94.49%94.49

10、%平均含量(%)94.33%RSD(%)0.266%標準曲線法編號12345測定含量(%)103.04%102.57%102.51%102.97%102.97%平均含量(%)102.81%RSD(%)0.244%(四)實驗討論1、精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)過多次取樣測定所 得結(jié)果之間的接近程度，一般用偏差d、標準偏差SR相對標準偏差RSDfE表示。 2、精密度驗證內(nèi)容包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性。重現(xiàn)性：在較短時間問 隔內(nèi)1、內(nèi)外標法的異同：相同點：內(nèi)、外標法皆采用峰面積法來測定供試品中主成分的含量；內(nèi)標法在配制對照品溶液和供試品溶液時加入了內(nèi)標物，其可以避免樣品進樣前處理或進樣體積誤差對測定結(jié)果的影響；外標法沒有加入內(nèi)標物，則應(yīng)要求進樣量的準確控制，當用外標法定量測定時，以定量環(huán)會自動進樣器進樣為好。2、參考文獻：劉文英. 藥物