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1、血清血清G+GMG+GM試驗(yàn)試驗(yàn)肺泡灌洗液肺泡灌洗液GMGM試驗(yàn)試驗(yàn)一、血清G試驗(yàn)二、血清GM試驗(yàn)三、肺泡灌洗液GM試驗(yàn)主主 要要 內(nèi)內(nèi) 容容1.血清G試驗(yàn)原理2.血清G試驗(yàn)的臨床價(jià)值3.血清G試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況4.血清G試驗(yàn)假陰性的情況5.血清G試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限一、血清一、血清G G試驗(yàn)試驗(yàn)1.1 1.1 血清血清G G試驗(yàn)原理試驗(yàn)原理 G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分-1,3-D-葡聚糖(BG),經(jīng)吞噬細(xì)胞處理釋放入血或體液。 定植時(shí)BG很少釋放入血,因此可有助于鑒別真菌侵襲與定植。 -(1,3)-D-葡聚糖細(xì)胞核 早期診斷診斷侵襲性真菌感染(如侵襲性念珠菌病、侵襲性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)
2、的方法之一。 適用于除隱球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感染的,但不能確定菌種。1.2 1.2 血清血清G G試驗(yàn)的臨床價(jià)值試驗(yàn)的臨床價(jià)值 使用纖維素膜進(jìn)行血透,標(biāo)本接觸過(guò)紗布或其他含有葡聚糖的材料; 靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品; 標(biāo)本中存在脂多糖或處理標(biāo)本時(shí)存在污染; 使用多糖類抗癌藥物(含葡聚糖類似物); 放化療造成粘膜損傷致食物中葡聚糖或定植念珠菌經(jīng)胃腸道入血; 真菌為原料制成的抗生素:多粘菌素、厄他培能、頭孢噻肟/吡肟、磺胺等。 某些細(xì)菌感染:大腸桿菌、銅綠假單胞、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯、陰溝腸桿菌、科氏G球菌、伯克霍爾德(細(xì)菌濃度過(guò)高交叉反應(yīng))1.3 1.
3、3 血清血清G G試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況 隱球菌具有厚壁包膜,生長(zhǎng)緩慢,導(dǎo)致假陰性; 局灶性曲菌病,BG很少釋放入血; 抗真菌藥物的使用(卡泊芬凈:非競(jìng)爭(zhēng)抑制BG合成)。1.4 1.4 血清血清G G試驗(yàn)假陰性的情況試驗(yàn)假陰性的情況 優(yōu)勢(shì): 鑒別侵襲性感染與定植; 不受機(jī)體免疫狀態(tài)影響,早于臨床診斷平均4天。 局限: 不能區(qū)分真菌的種類。1.5 1.5 血清血清G G試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限1.血清GM試驗(yàn)原理2.血清GM試驗(yàn)的臨床價(jià)值3.血清GM試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況4.血清GM試驗(yàn)假陰性的情況5.血清GM試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限二、血清二、血清GMGM試驗(yàn)試驗(yàn) 檢測(cè)半乳甘露聚糖(gla
4、ctomannan,GM),主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷; 半乳甘露聚糖廣泛存在于曲霉和青霉細(xì)胞壁,細(xì)胞壁表面菌絲生長(zhǎng)時(shí),半乳甘露聚糖是最早釋放的抗原; 檢測(cè)法是一種微孔板雙抗體夾心法。2.1 2.1 血清血清GMGM試驗(yàn)的原理試驗(yàn)的原理 曲菌定植時(shí)極少釋放,鑒別侵襲與定植; GM釋放量與菌量成正比,可以反映感染程度; 連續(xù)檢測(cè)GM可作為治療療效的監(jiān)測(cè)(半衰期短); 在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高;2.2 2.2 血清血清GMGM試驗(yàn)的臨床價(jià)值試驗(yàn)的臨床價(jià)值 使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦; 新生兒和兒童 血液透析; 自身免疫性肝炎等; 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物
5、。 造血干細(xì)胞移植者預(yù)處理階段2周中; 放化療損傷腸粘膜屏障食物種GM入血; 巨細(xì)胞病毒、銅綠感染;2.3 2.3 血清血清GMGM試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況阿莫西林阿莫西林/ /頭孢哌酮;頭孢哌酮;不僅血液,灌洗液亦可出現(xiàn)假陽(yáng)性不僅血液,灌洗液亦可出現(xiàn)假陽(yáng)性雙歧桿菌定植、雙歧桿菌定植、食用乳制品食用乳制品 釋放入血循環(huán)中的曲霉GM并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除; 以前使用了抗真菌藥物; 病情不嚴(yán)重; 非粒細(xì)胞缺乏的患者。 2.4 GM2.4 GM試驗(yàn)假陰性的情況試驗(yàn)假陰性的情況 優(yōu)勢(shì): 鑒別曲霉菌侵襲性感染與定植; 早于臨床癥狀和影像學(xué)異常1周; GM診斷侵襲性曲霉感染的敏感度高于G試驗(yàn);
6、 血清中存在時(shí)間較短,可作為療效監(jiān)測(cè)。 局限: 不能區(qū)分曲霉菌的種類。2.5 2.5 血清血清GMGM試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)和局限G G試驗(yàn)和試驗(yàn)和GMGM試驗(yàn)的聯(lián)合使用試驗(yàn)的聯(lián)合使用種屬G試驗(yàn)GM試驗(yàn)?zāi)钪榫鷮夔牭毒鷮匐[球菌屬曲霉菌屬青霉/擬青霉接合菌綱同時(shí)測(cè)定同時(shí)測(cè)定G G試驗(yàn)和試驗(yàn)和GMGM試驗(yàn)有助于早期診斷侵襲性真菌感染試驗(yàn)有助于早期診斷侵襲性真菌感染 侵襲性肺部真菌感染重要的檢測(cè)方法; 比血清GM試驗(yàn)具有更高的敏感性; 結(jié)果的判定尚無(wú)定論。 三、肺泡灌洗液(三、肺泡灌洗液(BALBAL)的)的GMGM試驗(yàn)試驗(yàn)(BALF GM 1.0為陽(yáng)性閾值時(shí)敏感度97 特異度93 ,陽(yáng)性預(yù)計(jì)值68 ,陰性預(yù)計(jì)值99)1.未使用抗生素、未行抗菌治療;2.在活檢、刷檢前灌洗;3.纖支鏡需嵌入到(懷疑)致病肺段或亞段支氣管。4.灌洗總量50-150ml,每次25-50ml;5.負(fù)壓小于100mmHg(吸引時(shí)支氣管腔不塌陷為宜)6.每次回收量應(yīng)不低于灌入量的5(回收率以30為宜,40-60%最佳)。7.取首
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