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文檔簡介
1、一、生防菌的基因工程改良一、生防菌的基因工程改良二、二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響三、寄主植物對生防菌制劑的影響三、寄主植物對生防菌制劑的影響 利用基因操作技術(shù)對微生物進行遺傳改造或引入外來的具有防病、殺蟲等作用的基因;或切除原有的、具有不良作用的部分基因;或插入一段DNA以改變原來基因的調(diào)控與表達,從而促使微生物生防作用的加強或防治范圍的擴大,為高效微生物農(nóng)藥的研制開辟新的途徑?;蚬こ谈牧荚砘蚬こ叹甑臉?gòu)建一、一、生防菌的基因工程改良生防菌的基因工程改良1.1.基因工程改良原理基因工程改良原理 原生質(zhì)體融合方法 將兩個親株的細胞壁通過酶解作用加以去除,
2、然后將兩個親株的原生質(zhì)體在高滲條件下混合,在外力作用下(如采用PEG或電壓)助融,使它們相互凝集進行細胞質(zhì)融合,接著發(fā)生兩套或多套基因組之間的接觸、交換和重組,在再生細胞中獲得異核體或重組體。 轉(zhuǎn)基因 以質(zhì)粒載體為媒介的基因轉(zhuǎn)移:以PEG、限制酶、根癌農(nóng)桿菌等介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化。 DNA直接轉(zhuǎn)移: 利用真菌細胞的生物學(xué)特性,通過物理化學(xué)方法將外源基因轉(zhuǎn)入真菌受體細胞的技術(shù)。包括電激法、基因槍法、顯微注射法、激光微束穿孔法等一、一、生防菌的基因工程改良生防菌的基因工程改良2.2.基因工程菌株的構(gòu)建基因工程菌株的構(gòu)建 利用誘變手段篩選出突變株再將特殊基因轉(zhuǎn)入構(gòu)建工程菌株,加強其殺菌、殺蟲能力等。 周洪
3、友等利用Tn5轉(zhuǎn)座子攜帶2,4-DAPG(2,4-二乙?;g苯三酚)合成基因簇分別整合到野生熒光假單胞菌P32(2,4-DAPG-),CPF-10和2P24的染色體上,結(jié)果表明 2,4-DAPG(抗生素)產(chǎn)量提高,對防治病害具有增效作用。一、一、生防菌的基因工程改良生防菌的基因工程改良 生防菌劑大部分為活菌或抗生素類,田間噴灑前后的溫度、濕度、PH、礦物質(zhì)、生長因子及其他微生物等都會嚴重影響生防菌的定殖、存活及有效性。1.1.溫度溫度 一般菌劑在25-30條件下防治效果比10-15高l-2倍,所以施用時間最好在上午十點以前或下午四點以后,或者在陰天施藥。陽光照射后紫外線會殺死有益菌,所以不宜在
4、午間或陽光充足的時候施藥。二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響 2.2.濕度(大氣濕度、土壤濕度)濕度(大氣濕度、土壤濕度) 我國地域廣闊,地區(qū)差異性較大,南方潮濕多雨,北方和西部地區(qū)干旱少雨。生防菌劑只有在滿足其生活所需的最佳條件時,才能發(fā)揮最大作用。 一方面在干旱地區(qū)要加大噴藥用水量,造成一種高濕環(huán)境,易于微生物孢子的存活和繁殖;另一方面可增加菌劑濕度(加入一些特定的高分子物質(zhì)和增加溶液黏度的物質(zhì),如淀粉、動物骨膠、草木灰、浸出液等),避免快速干燥的發(fā)生,提高使用效果。二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響3.土壤因素土壤因素
5、土壤pH、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類等含量對生防菌有很大影響 pH對生防菌的影響 生防菌周圍環(huán)境的酸堿度對其生長所需的各種離子濃度有重要影響。很多生防菌在中性或弱堿性條件下生長良好,放線菌在7.0-7.2的中性偏堿條件和有機質(zhì)含量較多的土壤中容易存活熒光假單胞菌2-79菌株在小麥根部定殖,PH6.0-6.5比pH 7.0以上好;偏酸性條件下有利于木霉菌生長。二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響礦物質(zhì)對生防菌的影響 生防菌劑在土壤中施用后,除必須有適宜的溫度、濕度、酸堿度條件外,還必須有適量的必須的生命物質(zhì),其中Fe、Mg、K、N、P等主要元素尤為重要。這些物質(zhì)不僅能直
6、接參與微生物的新陳代謝,而且有的還利于其有效定殖和抗生素物質(zhì)的產(chǎn)生。二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響 有機物對生防菌的影響 土壤中有機物質(zhì)的含量和種類直接影響土壤微生物生物量 ,所以對生防菌而言,土壤中有機物含量也對生物防治的效果起到至關(guān)重要的作用。 如李雪玲等報道3株木霉菌的分生孢子在無營養(yǎng)的水中可以萌發(fā),尤以T2 - 4 萌發(fā)率為最高;在加富有可溶性營養(yǎng)成分的馬鈴薯和玉米面浸汁時,THT和T3 - 4 分生孢子萌發(fā)率明顯提高。二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響植物生長因子對生防菌劑的影響 植物內(nèi)生菌系統(tǒng)分布于植物組織內(nèi),
7、具有良好的生存環(huán)境,受到植物的保護,比暴露于惡劣環(huán)境(強烈的日光、紫外光、暴風雨等)的附生菌更有穩(wěn)定的生存環(huán)境,而且與植物長期生活在一起,可以緩減寄主植物的防衛(wèi)反應(yīng)作用,更易于發(fā)揮作用,作用更穩(wěn)定持久。 二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響土壤中其他微生物種群 生防菌劑需要定殖于植株,而植株表面或者土壤中有附生菌、病原菌及其他微生物種群,這就意味著生防菌要有足夠的競爭力才能在原有微生態(tài)系統(tǒng)中占有一席之地,因此生防菌要通過種群間的關(guān)系(如共處、棲生、互生、助生、竟爭、寄生等) 建立新的動態(tài)平衡關(guān)系。 二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的影響二、環(huán)境條件對生防菌制劑活性的
8、影響 生防菌劑在寄主微生態(tài)中定殖才能達到生物防治的目的,最初由于細菌對根泌出物的趨化性而向根部移動,之后附著在根系并隨根的生長而增殖,這一過程中寄主植物對生防菌劑的影響主要包括以下兩方面:植物根系對生防菌劑的影響植物根系對生防菌劑的影響 寄主植物與生防菌劑防效的關(guān)系寄主植物與生防菌劑防效的關(guān)系三、寄主植物對生防菌制劑的影響三、寄主植物對生防菌制劑的影響1.1.植物根系對生防菌劑的影響植物根系對生防菌劑的影響 生防菌成功地長期定殖植物根部,需要占領(lǐng)根際占領(lǐng)根際,這就需要生防菌和植物之間存在根際感應(yīng)性。 根際感應(yīng)特性主要是表面多糖、纖毛、耐滲透性及利用碳水化合物的能力等,細菌表面多糖細菌表面多糖是
9、某些細菌與植物結(jié)合所必需的。植物根際細菌被胞外多糖包圍,這些胞外多糖使菌凝集起來,形成微菌落,從而可以抗干燥,且免受菌抑制劑及捕食性生物的侵襲,還可以濃縮營養(yǎng)和鐵來保護菌本身,有助于生防菌被自然微生物的取代。三、寄主植物對生防菌制劑的影響三、寄主植物對生防菌制劑的影響2.2.寄主植物與生防菌劑防效的關(guān)系寄主植物與生防菌劑防效的關(guān)系 病原:同一種病害發(fā)生在不同屬寄主植物上,其病原物并不一定 只有種,所以同種生防菌劑在不同寄主上防效也不一定相同。 寄主結(jié)構(gòu)、基因型:不同的寄主植物由于基因型差異導(dǎo)致表皮層 結(jié)構(gòu)不同、可侵染位點不同、病原菌分布位點不同、定殖面積 不同等因素,導(dǎo)致了對生防菌劑的敏感程度也存在差異。三、寄主植物對生防菌制劑的影響三、寄主植物對生防菌制劑的影響2.2.寄主植物與生防菌劑防效的關(guān)系寄主植物與生防菌劑防效的關(guān)系 株形:株型直立,葉片上立的株型感染病菌的機會相當
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