18學(xué)時(shí)藥理實(shí)驗(yàn)

1、18學(xué)時(shí)藥理實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一 不同給藥途徑對(duì)藥物作用的影響【目的】1 觀察給藥途徑不同對(duì)藥物作用的影響.2練習(xí)小鼠的捉拿方法及腹腔注射法、灌胃注射法、皮下注射法?！驹怼课彀捅韧租c為鎮(zhèn)靜催眠藥，依據(jù)不同劑量及吸收情況的不同依次會(huì)出現(xiàn)：鎮(zhèn)靜-催眠-抗驚厥抗癲癇-麻醉-麻痹-死亡作用。用相同劑量，不同給藥途徑的藥物，從而觀察其差異?！緦?shí)驗(yàn)材料】1、動(dòng)物：小鼠2、藥品：0.4%戊巴比妥鈉溶液3、器材：電子秤1臺(tái)、1ml注射器2支、灌胃器1支、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】1、取小鼠6只，雌雄各半，稱重.編號(hào)，分成3組。2、甲組-腹腔注射一乙組-皮下注射卜 0.4%戊巴比妥鈉溶液0.10ml/10g丁

2、組-灌胃'3、立即記錄時(shí)間，觀察每只動(dòng)物翻正反射消失時(shí)間及翻正反射恢復(fù)時(shí)間【結(jié)果與處理】組別鼠號(hào)途徑0.4%戊 巴體重翻正反射消失（t）翻正反射恢復(fù)（t）給藥劑量時(shí)間（m）平均值時(shí)間（m平均值1甲2ip1乙2iH1丙2ig【注意事項(xiàng)】1、注意給藥途徑的正確操作。2、注意小鼠翻正反射消失時(shí)間判定1min。實(shí)驗(yàn)二藥物的抗炎作用（足腫脹法）【目的】熟悉致炎物質(zhì)致大鼠后肢足跖炎癥性腫脹模型制作方法。了解糖皮質(zhì)激素的抗炎作用?！驹怼旷r蛋清等致炎物質(zhì)被注入大鼠后肢足跖后，可引起局部血管擴(kuò)張，通透性增強(qiáng)，組織 水腫等炎癥反應(yīng)，最后致足跖體積變大。糖皮質(zhì)激素通過抑制炎癥產(chǎn)生的多個(gè)環(huán)節(jié)，從而 避免致炎

3、物質(zhì)的致炎作用?！緦?shí)驗(yàn)材料】1. 動(dòng)物：$大鼠2只。2. 藥品：10%鮮蛋清、0.5%氫化可的松溶液、生理鹽水、。3. 器材：大鼠固定器1臺(tái)，1ml注射器3支，PV-200足趾容積測(cè)量儀，苦味酸、棉簽1根、 手套1只?！痉椒ㄅc步驟】1. 取大鼠2只，稱重，做好標(biāo)記。一只大鼠腹腔注射生理鹽水0.3mL/ 100g，另一只腹腔注射0.5%氫化可的松溶液0.3mL/ 100g。2. 在鼠足某處用記號(hào)筆畫線作為測(cè)量標(biāo)線，將鼠足緩緩放如測(cè)量筒內(nèi)，當(dāng)水平面與鼠足上的 測(cè)量標(biāo)線重疊時(shí)，踏動(dòng)腳踏開關(guān)，記錄足趾容積，為正常值。3. 待二鼠注射藥物30min后，從右后足掌心向踝關(guān)節(jié)方向皮下注射 10%鮮蛋清0.l

4、mL/只。4. 在注射致炎物后的15min、30min、45min分別測(cè)量足趾容積。5. 計(jì)算：足跖腫脹度及腫脹率。腫脹度=致炎后的足趾容積一致炎前足趾容積 腫脹率=（致炎后的足趾容積一致炎前足趾容積） 十致炎前足趾容積x 100%【結(jié)果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表內(nèi)并加以比較得出結(jié)論。表1氫化可的松對(duì)大鼠足跖腫脹的影響體正常右致炎后足跖腫脹度致炎后足跖腫脹率鼠號(hào)重藥物藥量(mL)后足跖(mL)(%)(g)容積15mi n 30mi n 45min15mi n 30mi n 45min甲乙【注意事項(xiàng)】1抗炎實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物性別的選擇：雄性2測(cè)定大鼠足體積時(shí)，選定統(tǒng)一測(cè)量位置（大鼠足外踝關(guān)節(jié)突起）3. 1

5、0%鮮雞蛋清溶液需在臨用前配制。4. 體重120150g的$大鼠對(duì)致炎劑最敏感，腫脹度高，差異性小。5. 測(cè)量時(shí)，應(yīng)固定1人完成所有測(cè)量任務(wù)。6. 注射致炎劑時(shí)注意藥液勿外漏。實(shí)驗(yàn)三藥物的抗炎作用（耳片法）【目的】熟悉二甲苯致大鼠耳廓炎癥性腫脹模型制作方法。了解糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。【原理】化學(xué)刺激物可致動(dòng)物急性炎癥；毛細(xì)血管擴(kuò)張，滲出增加，出現(xiàn)局部腫脹，重量改變。 比較給予藥物前后動(dòng)物局部腫脹程度的變化從而觀察到藥物的抗炎作用?！緦?shí)驗(yàn)材料】1. 動(dòng)物：$小鼠4只。2. 藥品：0.1%地塞米松、二甲苯、生理鹽水。3. 器材：分析天平1臺(tái)、稱量紙1張、打孔器1支、眼科鑷1把、打孔墊1個(gè)、手術(shù)剪1

6、 把、1mL注射器3支、苦味酸1瓶、棉簽1根?！痉椒ㄅc步驟】1. 取$小鼠4只，稱重，做好標(biāo)記，分成2組。2. 一組腹腔注射0.1%地塞米松0.1ml/10g體重，另一組腹腔注射生理鹽水 0.1ml/10g體重。3. 給藥30min后，用二甲苯0.05ml均勻涂抹每只鼠的右耳內(nèi)外兩面。4. 涂抹45min后，小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。5. 計(jì)算：腫脹度二右耳重量-左耳重量腫脹率=（右耳重量-左耳重量）-左耳重量x 100%【結(jié)果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表內(nèi)并加以比較得出結(jié)論。地塞米松對(duì)小鼠耳片腫脹重量的影響耳片重量各組腫組別鼠號(hào)體重（g）藥物劑量-脹率平右左腫脹

7、度腫脹率均值甲12生理鹽水乙12地 塞 米 松【注意事項(xiàng)】1、小鼠耳廓滴加二甲苯時(shí)，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內(nèi)2、小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。實(shí)驗(yàn)四 傳出神經(jīng)藥物對(duì)離體腸肌的作用【目的】 觀察乙酰膽堿、阿托品、氯化鋇對(duì)胃腸平滑肌的作用，了解阿托品的作用機(jī)制。 掌握離體器官的測(cè)定方法?！緦?shí)驗(yàn)材料】1、動(dòng)物：家兔。2、藥品： 001氯化乙酰膽堿溶液、 0 05硫酸阿托品溶液、 1%氯化鋇溶液、 臺(tái)氏液。3、器材：離體平滑肌槽1臺(tái)、420E型生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)1套、肌張力換能器1支、 電腦 1 臺(tái)、雙凹夾 1 個(gè)、手術(shù)剪 1 把、注射器 3支、燒杯 1 個(gè)、縫線 2根?！痉椒ㄅc步驟】

8、1、 將離體平滑肌槽加水，通電加熱，設(shè)定溫度為37± 0.5 C。2、安裝換能器，與420E型生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)第一通道連接。3、離體腸肌的制備：取家兔 1 只，頸椎脫臼處死，立即打開腹腔，找到幽門部，分離十二指腸，以 2cm 左右穿線，分段結(jié)扎，剪取腸段。將腸段一端連結(jié)固定鉤上，置測(cè)定管（麥?zhǔn)显〔郏┲小?另一端連結(jié)張力換能器彈簧片上。上下調(diào)節(jié)雙凹夾，控制張力的大小。打開氣量調(diào)節(jié)旋鈕， 讓氣泡緩慢通入。4、離體腸肌收縮力測(cè)定：打開電腦，點(diǎn)擊桌面中BL-420圖標(biāo)，進(jìn)入主菜單，點(diǎn)擊工具欄上的“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”， 消化道實(shí)驗(yàn)，消化道平滑肌生理特性（ 2）。腸管穩(wěn)定 10分鐘左右，記錄一段正常收縮

9、曲線，然后依次用藥。1加 0.01 氯化乙酰膽堿溶液 0.2ml ，觀察結(jié)果如何。2 當(dāng)腸段收縮明顯時(shí)，立即加入 0. 05%硫酸阿托品溶淡0. 2ml，觀察對(duì)腸段收縮 的影響3當(dāng)描筆下降到基線時(shí)，再次加人 0. 01%氯化乙酰膽堿溶液0. 2ml，觀祭結(jié)果。4更換浴槽中的臺(tái)氏液3次，待腸段恢復(fù)收縮后，加人I %氯化鋇溶液0. 2ml，觀 察腸段有何反應(yīng)。5. 當(dāng)作用出現(xiàn)后，立劇加人 0. 05%硫酸阿托品溶液 0.2ml ，觀察結(jié)果如何。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，暫停記錄，打開反演窗口，尋找所需波形的開始處，壓縮圖形，剪切整 理圖形，保存資料?！窘Y(jié)果】描繪或剪貼腸肌活動(dòng)曲線圖，標(biāo)明所給藥物的名稱和劑量，

10、分折討論所得結(jié)果?！咀⒁馐马?xiàng)】1、沖洗和分離腸管時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，盡量避免牽拉腸管。2、如需換液，臺(tái)氏液液面高度及溫度應(yīng)與以前保持一致。3、加藥時(shí)不要把藥液直接加到標(biāo)本上，以免影響結(jié)果。4、浴溫和腸肌的張力均可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)注意調(diào)節(jié)。實(shí)驗(yàn)五 鎮(zhèn)痛藥實(shí)驗(yàn)（熱板法）【目的】觀察嗎啡的鎮(zhèn)痛作用掌握鎮(zhèn)痛藥實(shí)驗(yàn)（熱板法）操作方法?！驹怼坷靡欢ǖ臏囟却碳?dòng)物軀體的某一部位以產(chǎn)生疼痛反應(yīng)。把小鼠放在事先加熱到55C的金屬盤上，以舔后足為 疼痛”反應(yīng)指標(biāo)，以產(chǎn)生痛反應(yīng)所需的時(shí)間為痛閾值。通過 測(cè)定給藥前后痛閾值的變化而反映藥物的鎮(zhèn)痛作用?！緦?shí)驗(yàn)材料】1、動(dòng)物：小鼠（雌性）2、藥品：0.1%嗎啡溶液、生理鹽水

11、。3、器材：RB-200智能熱板儀1臺(tái)、1mL注射器3支、電子稱1臺(tái)、苦味酸1瓶、棉簽1根?！痉椒ㄅc步驟】將智能熱板儀溫設(shè)定為55E，儀器升溫至設(shè)定值后，取雌性小鼠若干只，逐一將小鼠置 熱板儀上,按下計(jì)時(shí)開關(guān)（T）記錄時(shí)間，觀察小鼠對(duì)熱刺激的反應(yīng)，以小鼠舔后足作為痛覺 指標(biāo)，一旦出現(xiàn)舔后足動(dòng)作，再次按下計(jì)時(shí)開關(guān)停止計(jì)時(shí)，立即將鼠取出。5分鐘后重新測(cè)試,如果兩次痛覺反應(yīng)均發(fā)生在530秒內(nèi)，則為合格。對(duì)痛覺過分敏感或遲鈍及喜跳竄小 鼠，應(yīng)棄去。將合格鼠兩次正常痛覺反應(yīng)時(shí)間的均數(shù)算做給藥前的平均痛覺反應(yīng)時(shí)間（既 痛閾值）。將挑選合格的小鼠4只稱重、標(biāo)號(hào)，分成二組，分別給各小鼠下列藥物：甲組鼠： 腹腔

12、注射0.1%嗎啡溶液0.1mL/10g。乙組鼠： 腹腔注射生理鹽水0.1mL/10g作對(duì)照。分別在給藥后15、30、45分鐘各測(cè)痛覺反應(yīng)（痛閾值）一次，如小鼠在60秒內(nèi)不出現(xiàn)痛覺反應(yīng)，則按60秒計(jì)，取出實(shí)驗(yàn)鼠，不再繼續(xù)刺激。【結(jié)果與處理】痛閾值提高百分率用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值x 100%用藥前平均痛閾值嗎啡的鎮(zhèn)痛作用（熱板法）藥前平藥后痛閾值提高百分率組別劑量動(dòng)藥后平均痛閾值（s）物 均痛閾（）數(shù)值（s）15min 30min 45min 15min30min 45min0.1% 嗎啡 0.1ml/10g2生理鹽水 0.1ml/10g2（另外，也可根據(jù)給藥后不同時(shí)間的痛閾提高百分率

13、作圖，橫坐標(biāo)表示時(shí)間，縱坐標(biāo)表示 痛閾提高百分率，觀察嗎啡的鎮(zhèn)痛作用，作用起始時(shí)間及維持時(shí)間。與生理鹽水組的曲線 比較。）【注意事項(xiàng)】1、熱板法小鼠個(gè)體差異較大，應(yīng)選擇痛閾值在530秒之間的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，凡特別喜跳躍 的小鼠應(yīng)淘汰。2、實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇雌性小鼠，因雄性小鼠在遇熱時(shí)睪丸下降，陰囊觸及熱板反應(yīng)過敏，易致跳 躍，影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。3、室溫以1520C為宜。4、作用較弱的鎮(zhèn)痛藥此法不太敏感。實(shí)驗(yàn)六鎮(zhèn)痛藥實(shí)驗(yàn)（小鼠扭體法）許多刺激性化學(xué)物質(zhì)（如醋酸、酒石酸銻鉀、緩激肽、鉀離子等）腹腔注射刺激腹膜， 均能使動(dòng)物產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，可用作疼痛模型，研究疼痛生理及篩選鎮(zhèn)痛藥物。其中小鼠扭 體法最常用。【目的】觀

14、察藥物的鎮(zhèn)痛作用，掌握小鼠扭體法實(shí)驗(yàn)方法?！驹怼啃∈蟾骨蛔⑸湟欢ㄈ莘e和濃度的化學(xué)物質(zhì)，由于刺激腹膜而致小鼠出現(xiàn)腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臂部高舉等行為反應(yīng)，稱為扭體反應(yīng)。鎮(zhèn)痛藥可抑制這種反應(yīng)【實(shí)驗(yàn)材料】1動(dòng)物：小鼠2藥品：0.1%嗎啡溶液、生理鹽水3器材：1mL注射器3支、電子稱1臺(tái)、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】取體重18-22g的健康小白鼠4只，稱重，編號(hào)。分成二組。甲組各鼠；腹腔注射0.1%嗎啡溶液0.1mL/10g。乙組各鼠； 腹腔注射生理鹽水0.1mL/10g，作對(duì)照。給藥后30min，各鼠腹腔注射0.7%冰醋酸溶液（或0.1%酒石酸銻鉀）0.2mL/只記錄小鼠出現(xiàn)疼痛的時(shí)間（潛伏期），給致痛劑后15min內(nèi)產(chǎn)生扭體反應(yīng)（腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢