生化上冊作業(yè)

1、一、問答題1. 食用油長時間放置后,為什么會有異味?不飽和脂肪酸被氧化或水解的過程和現(xiàn)象，酸敗的食物具有難聞氣味和難吃味道。油脂長時間暴露于溫?zé)岷统睗竦沫h(huán)境中，會產(chǎn)生所謂的臭油味。這些臭油味就是由于脂肪被氧化或水解而產(chǎn)生的：水解酸敗從脂肪里的脂肪酸鏈中把甘油結(jié)構(gòu)分解出來，并繼續(xù)被水解或氧化。2. 為什么有的抑制劑雖不與底物結(jié)合部位結(jié)合,但仍表現(xiàn)出競爭性抑制?1.反競爭性抑制：抑制劑不能與游離酶結(jié)合，但可與ES復(fù)合物結(jié)合并阻止產(chǎn)物生成，使酶的催化活性降低，稱酶的反競爭性抑制。其特點(diǎn)為：a.抑制劑與底物可同時與酶的不同部位結(jié)合；b.必須有底物存在，抑制劑才能對酶產(chǎn)生抑制作用；c.動力學(xué)參數(shù)：Km減

2、小，Vm降低。2. 非競爭性抑制：抑制劑既可以與游離酶結(jié)合，也可以與ES復(fù)合物結(jié)合，使酶的催化活性降低，稱為非競爭性抑制。其特點(diǎn)為：a.底物和抑制劑分別獨(dú)立地與酶的不同部位相結(jié)合；b.抑制劑對酶與底物的結(jié)合無影響，故底物濃度的改變對抑制程度無影響；c.動力學(xué)參數(shù)：Km值不變，Vm值降低。3. 肌紅蛋白與血紅蛋白的疏水側(cè)鏈的比例有何不同?4. DNA在純水中為何易變性?磷酸脊骨在中性pH 下，會帶有許多負(fù)電荷，導(dǎo)致兩股 DNA 相互排斥分離而變性，要加入鎂離子穩(wěn)定之，因此DNA 不能溶在純水中。真核細(xì)胞核中含帶有強(qiáng)正電性的組織蛋白(histone)，與DNA 結(jié)合成復(fù)雜結(jié)構(gòu)，并中和掉核酸的負(fù)電荷

3、。5. 蛋白質(zhì)的酸水解通常只能檢測到17種氨基酸,為什么?因?yàn)橛行┌被嵩谒嵝詶l件下不能穩(wěn)定存在，比如天冬酰胺，谷氨酰胺6. 磷脂可作為細(xì)胞膜成分的分子特征是什么?7. 用哪兩種簡易的方法可以區(qū)別酶的可逆抑制和不可逆抑制?透析和增加底物量8. 利用SDS電泳和分子篩層析測得的血紅蛋白的分子量是不同的,為什么?（一個變性，另一個未變性）血紅蛋白分子是四聚體，如果SDS電泳加了還原劑測出來的分子量（1617KDa）就是一個多肽亞基的分子量，是血紅蛋白分子量的四分之一。9. 從營養(yǎng)學(xué)的角度看,奇數(shù)碳原子的脂肪酸比偶數(shù)碳原子的脂肪酸營養(yǎng)價值高,為什么?10. 一位生物化學(xué)家在對某酶分離純化過程中得到以

4、下實(shí)驗(yàn)結(jié)果.分離步驟總蛋白含量(mg)活力單位數(shù)1.2.3.4.5.6.粗分離鹽析等電點(diǎn)分離離子交換親和層析分子篩層析20,0005,0004,00020050454,000,0003,000,0001,000,000900,000750,000675,000回答下列問題:(1).在這六步分離純化過程中,哪一步分離效果最好?哪一步最差?第四步最好，第三步最差(2).該酶是否已經(jīng)純化?還可以用什么方法確定其是否純化?已經(jīng)純化，因?yàn)樽詈笠徊矫富盍Φ臏p少與總蛋白的減少是等比例的。 電泳，測N或C端的氨基酸11. 在陽離子交換層析中,下列各組氨基酸,用pH=7.0的緩沖液洗脫.哪一個氨基酸先洗脫下來?

5、（陽離子交換層析：帶正電的脫去）(1).Asp-Lys. (2).Arg-Met. (3).Glu-Val. (4).Gly-Leu. (5).Ser-Ala.12. 測定酶活力的時候?yàn)樯恫捎贸跛俣龋克俣仍跁r間足夠長以后會變慢，導(dǎo)致測速誤差13. 蛋白質(zhì)，核酸發(fā)生變性的共同特點(diǎn)是什么？共同：高級結(jié)構(gòu)的破壞14. 試解釋酶為什么具有立體特異性。立體特異性：對底物要求不同 活性中心的形狀15. 蛋白質(zhì)因變性發(fā)生沉淀作用和鹽析發(fā)生沉淀作用，兩者本質(zhì)上有何差別？如何區(qū)分？變性：破壞蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)， 鹽析：破壞蛋白質(zhì)表面，蛋白質(zhì)并未變性16. 在給定的pH下，下述蛋白質(zhì)在電場中向哪個方向移動，即向正極

6、、負(fù)極還是不動？蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（1） 卵清蛋白（pI=4.6），在pH5.8；帶負(fù)電，往正極（2）-乳球蛋白（pI=5.2），在pH4.6和pH7.1；9帶正電，往負(fù)極（3）胰凝乳蛋白酶原（pI=9.1），在pH5.6和pH9.1和pH11。不動17. 有二個DNA樣品，分別來自兩種未確認(rèn)的細(xì)菌，兩種DNA樣品中的腺嘌呤堿基含量分別占它們DNA總堿基的32和17。這兩個DNA樣品的腺嘌呤，鳥嘌呤，胞嘧啶和胸腺嘧啶的相對比例是多少？（A=T、C=G)其中哪一種DNA是取自溫泉（64）環(huán)境下的細(xì)菌，哪一種DNA是取自嗜熱菌？答案的依據(jù)是什么？C、G含量高的菌，因?yàn)闅滏I多18. 下列變化對肌紅蛋白和

7、血紅蛋白的氧親和性有什么影響？（1）血液中的pH由7.4下降到7.2。氧親和性減少（2）肺部CO2分壓由6kPa（屏息）減少到2kPa（正常）。增加（3）BPG水平由5mM（平原）增加到8mM（高原）。下降19. 假設(shè)某蛋白質(zhì)含有10個羧基和10個氨基(平均羧基PK值為2.5,氨基PK值為8.5),并假設(shè)在一定條件下氨基和羧基間都有可能生成鹽鍵.請按下表所示不同PH條件下,填上可能生成鹽鍵的數(shù)目. 溶液的PH值 1.0 2.5 5.5 8.5 10.0生成鹽鍵的數(shù)目020. 畫寫具有米氏行為酶的下列各動力學(xué)曲線示意圖.A.反應(yīng)速度(v)對底物濃度s作圖.B.當(dāng)sE時,反應(yīng)速度(v)對酶濃度E作

8、圖.C.反應(yīng)速度(v)對溫度(T)作圖.D.1/v對1/s作圖.E.產(chǎn)物濃度p對時間(t)作圖.21. 100毫升，pH1.72，0.1M的甘氨酸溶液用2M NaOH滴定。記錄pH并繪制滴定曲線如下圖。滴定曲線上有到五個重要的點(diǎn)。為下面的每段話從中選擇一個合適的點(diǎn)。并加以說明。（1） 甘氨酸主要以H3N-CH2-COOH的形式存在。（2） 甘氨酸的凈電荷是+½。（3） 一半的氨基是離子化的。（4） 此時的pH等于羧基的pKa值。（5） 此時的pH等于氨基的pKa值。（6） 甘氨酸具有最大的緩沖能力。（7） 甘氨酸的凈電荷是零。（8） 羧基完全被滴定。（9） 甘氨酸完全被滴定。（10）

9、 甘氨酸主要以H3N+-CH2-COO-的形式存在。（11） 甘氨酸的凈電荷是+1。（12） 甘氨酸以50：50比例的H3N+-CH2-COOH和H3N+-CH2-COO-形式存在。（13） 等電點(diǎn)。（14） 最差的pH緩沖點(diǎn)。（15） 滴定的終點(diǎn)。22. 在純化的酶的過程中，研究者意外地發(fā)現(xiàn)，在進(jìn)行完某一步純化步驟后，酶的總活力單位比酶的粗提取物還高。請解釋酶的總活力單位怎么可能會增加？23. 過氧甲酸裂解胱氨酸二硫鍵，巰基氧化為磺酸基團(tuán)，然后不能再形成二硫鍵。分析以下實(shí)驗(yàn)：懷疑一個包含三個半胱氨酸殘基的蛋白質(zhì)中有一個單一的二硫鍵。用胰蛋白酶降解樣品，水解的混合物進(jìn)行單向電泳。采用過氧甲酸處

10、理后，旋轉(zhuǎn)90度后進(jìn)行雙向電泳，然后用茚三酮染色。如果樣品中不包含任何二硫鍵，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如何？如果包含一個二硫鍵，實(shí)驗(yàn)結(jié)果又如何？設(shè)計(jì)一個實(shí)驗(yàn)，來確定哪些半胱氨酸殘基形成二硫鍵。24. 在蛋白質(zhì)進(jìn)化中甘氨酸是一個高度保守的氨基酸殘基。為什么？25. 蛋白質(zhì)是相當(dāng)穩(wěn)定的。肽鍵在水溶液的壽命接近1000年。然而，肽鍵的水解自由能卻是負(fù)的，而且相當(dāng)大。你如何解釋雖然肽鍵水解能釋放出很多的能量但是肽鍵卻非常穩(wěn)定？26.磷酸吡哆醛（PLP）是鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶的輔酶。鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶分別從培養(yǎng)基缺乏PLP的細(xì)胞和含有PLP的細(xì)胞中分離純化。將酶都保溫在37，測定酶的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下所示：（1）、為什么酶活力隨保

11、溫時間增加而下降？（2）、為什么沒有PLP的酶活性下降的更快？27下圖表示血紅蛋白的氧解離曲線。假設(shè)曲線3表示PH 7.0時，CO2和2,3BPG的生理濃度下，血紅蛋白的氧飽和曲線。哪一條曲線代表下列條件變化時的曲線？（1）.CO2濃度下降； （2）. 2,3-BPG濃度增加；（3）. PH升高； （4）. 血紅蛋白失去四級結(jié)構(gòu)282,3-二磷酸甘油酸（2,3-BPG）位于血紅蛋白四級結(jié)構(gòu)的中央空穴內(nèi)，穩(wěn)定血紅蛋白的T型結(jié)構(gòu)。如果血紅蛋白發(fā)生突變2,3-BPG結(jié)合在血紅蛋白的表面，將出現(xiàn)什么情況？29. 在多肽晶體的x-射線研究中，鮑林和克里發(fā)現(xiàn)，肽鍵的長度（1.32 Å）介于C-N

12、單鍵（1.49 Å）和C=N雙鍵（1.27Å）之間。他們還發(fā)現(xiàn)，肽鍵具有平面性（所有四個原子連接的C-N小組在同一平面上），而且兩個C處于反式：(1)、根據(jù)肽鍵的鍵長推測肽鍵的鍵能。(2)、依據(jù)鮑林和克里的觀測結(jié)果預(yù)測肽鍵旋轉(zhuǎn)情況。30. 丙氨酸的滴定曲線顯示其有兩個可解離基團(tuán)羧基和氨基，其pKa值分別為2.34和9.69。二聚，三聚和多聚丙氨酸的滴定曲線也顯示它們有兩個可解離基團(tuán)，它們的pKa值如下表所示：(1)寫出Ala-Ala-Ala的結(jié)構(gòu)式，并標(biāo)明其pKa值。(2)解釋為啥pK1的數(shù)值隨著丙氨酸的聚合度的增加而增加？(3) 解釋為啥pK2的數(shù)值隨著丙氨酸的聚合度的增加而下降？二、是非題1.所有單糖都具有還原性。2.具有相同氨基酸正常的蛋白質(zhì)并不一定具有相同的構(gòu)象。3.脂類物質(zhì)是酯類物質(zhì)的通稱。4.天然蛋白質(zhì)和肽類中的所有氨基酸都是L-構(gòu)型。5.疏水蛋白的折疊伴隨著多肽的熵增，因此在溶液中蛋白質(zhì)可自發(fā)折疊。6.蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，核酸不是兩性電解質(zhì)。7.輔基是酶的組成部分，總是參與酶的活性部位。8.天然核苷酸中堿基與糖連接的糖苷鍵既有C-C鍵，又有C-N鍵。9.由于DNA的兩條鏈互補(bǔ)，所以