廣西柑橘潰瘍病原分析與流行研究

1、廣西柑橘潰瘍病原分析與流行研究 廣西柑橘潰瘍病原分析與流行研究 摘 要目前，柑橘潰瘍病作為柑橘生產(chǎn)中的主要病害，成為國內(nèi)外植物檢疫的重要對象。該病害主要侵染蕓香料的枳屬、柑橘屬和金柑屬等，在我國廣西、福建、四川等地出現(xiàn)的潰瘍病菌多為亞洲型菌系，也就是A菌系。本文主要進(jìn)行廣西柑橘潰瘍病原分析與流行研究，以期為柑橘潰瘍病的防治工作提供建議和參考。 關(guān)鍵詞柑橘潰瘍病；病原分析；流行研究；防治 中圖分類號：S436.66 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1009-914X06-0364-01 0 引言 柑橘不僅是我國亞熱帶地區(qū)栽培面積最廣的果樹種類，也是世界上最重要的商品水果。柑橘的種類較多，主要分布在我國

2、廣東、廣西、四川、福建、江西等地區(qū)，不僅具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，也可以作為醫(yī)藥和食品工業(yè)上的原材料。目前，柑橘潰瘍病已經(jīng)成為柑橘生產(chǎn)嚴(yán)重的病害之一。該病害的病菌來源多樣，并受到溫度和濕度的影響。關(guān)于柑橘潰瘍病的流行學(xué)，主要就是根據(jù)該病菌的發(fā)生機(jī)制來預(yù)測病害的開展趨勢和損失，以及病害的管理和防治等問題。 1 柑橘潰瘍病概述 1.1 柑橘潰瘍病的危害性 柑橘潰瘍病的發(fā)生最早可以追溯到1840年，1912年在美國佛羅里達(dá)州發(fā)現(xiàn)。柑橘潰瘍病主要是被黃單胞桿菌的致病病種引發(fā)的，該菌體的長度約為1.52.0m，屬于革蘭氏陰性菌。柑橘潰瘍病具有顯著的病癥，首先是葉片正面隆起并出現(xiàn)黃色病斑，然后病變外表開始破裂，

3、中心凹陷。果實(shí)上會想成與葉片相似的病斑，直徑約為5mm。柑橘潰瘍病可以導(dǎo)致其果實(shí)營養(yǎng)價(jià)值減少，特別是在春夏雨季時(shí)，病害會加重。 1.2 柑橘潰瘍病菌系的多樣性 因?yàn)閷?shí)驗(yàn)方案上還存在局限性，所以還能明確劃定柑橘潰瘍病的病原菌類別。但是，目前已經(jīng)存在A型、B型、C型、D型、E型等多種類型的柑橘潰瘍病菌系。其中，A型也即亞洲型菌株，不僅常見而且危害嚴(yán)重，存在于世界各地。A型菌株適合在培養(yǎng)基中生存，并且可以在CP1和CP2中溶解。最近的研究說明，A、B、C、D、E等各菌株之間相關(guān)性不超過50%。 1.3 柑橘潰瘍病的發(fā)生和外界環(huán)境之間的關(guān)系 柑橘潰瘍病病原菌可以在潮濕環(huán)境下發(fā)生擴(kuò)散，比方在暴風(fēng)雨的條件

4、下，柑橘潰瘍病會傳播更遠(yuǎn)的距離。此外，剪枝也會促進(jìn)該病菌的感染。當(dāng)溫度為20度到30度之間是，柑橘潰瘍病的病斑會在一周后形成。同時(shí)，風(fēng)夾雨一般是柑橘潰瘍病在中短距離上的主要傳播形式，而長距離的傳播主要是因?yàn)槿藶檫\(yùn)輸柑橘所致。 1.4 柑橘潰瘍病的流行模式 由于柑橘潰瘍病主要依賴于飛濺來傳播，所以會造成較多刺激感染點(diǎn)，并且形成無規(guī)那么、大面積的病區(qū)，進(jìn)而使得病情梯度不能簡單描述和量化。發(fā)病嚴(yán)重的柑橘果樹一般會聚集，同一行內(nèi)感染潰瘍病的幾率更大，這說明果樹距離越近就越容易互相感染。在病情開展上，順風(fēng)風(fēng)向要比逆風(fēng)風(fēng)向更嚴(yán)重。同時(shí)，柑橘潰瘍病的發(fā)生率和病害程度和柑橘品種、樹體以及施肥有關(guān)，而且和寄主敏

5、感性之間存在正相關(guān)的關(guān)系。 2 柑橘潰瘍病病原菌分化研究 2.1 柑橘潰瘍病的別離及鑒定 2.1.1材料與方法 樣本材料為廣西農(nóng)墾源頭農(nóng)場的紐荷爾臍橙、冰糖橙、甜橙、紅心臍橙、七九0四臍橙等品種。實(shí)驗(yàn)試劑主要有革蘭氏染色液、番紅復(fù)染劑、細(xì)胞壁染色液、氧化酶檢測試劑以及相應(yīng)的培養(yǎng)基。使用平板劃線別離法對潰瘍病斑菌株進(jìn)行別離，并對菌株的致病性和屬性進(jìn)行鑒定。采用針刺法來實(shí)行溫室鑒定，把個(gè)菌株懸液放置在培養(yǎng)皿中，接種前應(yīng)保濕12個(gè)小時(shí)，接種后那么保濕一天。對于菌株屬性，選擇在30度的環(huán)境下培養(yǎng)兩天，并觀察菌落的生長狀況。 2.1.2 結(jié)果 在別離菌株的制定性上，紐荷爾臍橙、冰糖橙、甜橙、紅心臍橙、七

6、九0四臍橙等品種經(jīng)過溫室接種鑒定后，均說明有典型潰瘍病產(chǎn)生。在菌株屬性上，以上病原菌可以分為四類屬性，分別為假單胞桿菌屬、歐文氏桿菌屬、棒狀桿菌屬、黃單胞桿菌屬。 2.2 桿菌潰瘍病菌系生理生化分化的研究 2.2.1 材料與方法 將以上樣本品種編號為STY、TCS-1、HCS、HXCS、TCS-1、QC-1、HCS-1、HJC、JC-1、BTC等。試驗(yàn)試劑包括細(xì)菌生化微量鑒定管、氧化酶試劑、過氧化氫酶試劑、甲基紅試劑、盧戈氏碘液、二苯胺試劑，以及相應(yīng)的病菌培養(yǎng)基。在試驗(yàn)方法上，對于培養(yǎng)一天后的各菌種，先用1%鹽酸濕潤氨基二甲基苯的濾紙，一旦10sec內(nèi)菌落出現(xiàn)紅色就說明是陽性，反之為陰性。對于

7、潰瘍病原菌株的生化特征，可以在室溫下培養(yǎng)，并觀察菌落周邊是否出現(xiàn)不透明的情況，如果存在暖磷脂酶，就會出現(xiàn)不透明區(qū)域，也即陽性。使用細(xì)菌生化微量鑒定管來檢測明膠的水解，如果其在4度時(shí)為液態(tài)，就是陽性，而陰性那么為4度時(shí)呈現(xiàn)固態(tài)。 2.2.2 結(jié)果 在對以上潰瘍病菌株進(jìn)行30項(xiàng)生理特征分析后，發(fā)現(xiàn)以下現(xiàn)象：菌株HCS-1和TCS-1無法利用醋酸鹽，其它菌株那么可以；菌株HXCS、NRC可以利用果糖，其它菌株那么不可以；在利用淀粉的情況上，唯有QC-1不能利用。同時(shí)，在潰瘍病原菌的生化特征分析上，以上菌株在經(jīng)過不同試劑的測定，發(fā)現(xiàn)其在過氧化氫酶、硝酸鹽復(fù)原、明膠水解、卵磷脂酶下呈陽性，其它情況下位陰

8、性。此外，菌株NRC、HCS可以利用蛋白胨來分解色氨酸，TCS-1和HJC兩種菌株可以利用石蕊牛奶，其它菌株那么不可以。 3 柑橘潰瘍病流行測報(bào)及其化學(xué)防治 3.1 柑橘潰瘍病流行的預(yù)測預(yù)報(bào) 3.1.1材料與方法 選取3年生的紐荷爾臍橙作為樣本品種，實(shí)驗(yàn)基地選擇為廣西農(nóng)墾源頭農(nóng)場。首先是對該區(qū)域紐荷爾臍橙品種的病情指數(shù)進(jìn)行調(diào)查及計(jì)算。該試驗(yàn)田沒有應(yīng)用任何防病害措施，隨機(jī)選取150株，每15田調(diào)查一次，記錄葉片每級個(gè)數(shù)和總個(gè)數(shù)。病情指數(shù)的計(jì)算公式為： 同時(shí)，采用自回歸模型來分析以上數(shù)據(jù)，并且應(yīng)用AR模型來進(jìn)行觀測數(shù)據(jù)的噪聲檢驗(yàn)。為了提高模型準(zhǔn)確率，需要使用該模型至少對4次調(diào)查數(shù)據(jù)實(shí)行檢驗(yàn)，依據(jù)計(jì)

9、算模型的相對誤差和絕對誤差，對模型的準(zhǔn)確度進(jìn)行評估。 3.1.2 結(jié)果 該試驗(yàn)地屬于亞熱帶海洋性季風(fēng)氣候，每年日照總時(shí)數(shù)接近2000h，年平均氣溫為19.9攝氏度，年平均降水量為1636mm，相對濕度為70%85%。結(jié)合柑橘潰瘍病AR模型的建立，獲得了比擬精準(zhǔn)的中長期的預(yù)報(bào)模型，并且給廣西農(nóng)墾源頭農(nóng)場大面積柑橘的潰瘍病防治與管理提供了參考。 3.2 柑橘潰瘍病的防治及病原菌抗藥性研究 在對室內(nèi)20種藥劑進(jìn)行平板帥選后，我們得到5種抑菌能力強(qiáng)的藥劑，分別為福美雙、潰枯寧、殺毒鞏、龍克菌和可殺得。在柑橘潰瘍病的田間防治過程中，以上5種菌種中，防治效果最好的為潰枯寧和可殺得。同時(shí)，在通過對藥劑處理的

10、不同區(qū)域中，進(jìn)行了別離潰瘍菌的抗藥性試驗(yàn)。并且發(fā)現(xiàn)不同處理區(qū)域內(nèi)的菌株都存在顯著的抗藥性。此外，在對菌株進(jìn)行繼代培養(yǎng)后，菌株的抗藥性也會變得較為復(fù)雜。比方在硫酸銅的抗性上，雖然第一代菌株的抗藥性要比前面4次穩(wěn)定，但是繼代培養(yǎng)后就會變得復(fù)雜化。這也說明了，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)實(shí)行的抗藥性試驗(yàn)會和實(shí)際情況存在一定的差異。 4 結(jié)束語 綜上所述，本文初步探索了廣西柑橘潰瘍病原分析與流行情況，在對病菌實(shí)行分化后發(fā)現(xiàn)，今后應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)分子技術(shù)的應(yīng)用。針對廣西柑橘潰瘍病的發(fā)生的嚴(yán)重危害性，本文建議應(yīng)當(dāng)在精確預(yù)報(bào)的根底上實(shí)施合理的防治措施。首先就是嚴(yán)格的檢疫制度，其次便是及時(shí)去除病原菌，比方燒毀枯枝和病枝等，最后就是科學(xué)合理的施肥，提高植株的抗病能力。總而言之，有關(guān)柑橘潰瘍病原分析與流行