盾葉薯蕷中甾體皂苷及其體外血小板活性研究

1、盾葉薯蕷中留體皂苷及其體外血小板活性研宄摘要利用大孔吸附樹脂柱色譜、硅膠柱色譜、 ods柱色譜及制備液相等方法，從盾葉薯蕷dioscorea zingiberensis 70%乙醇提取物中分離得到10個化合物， 并通過核磁和質譜等波譜學方法分別鑒定它們的結構 為胡蘆巴皂苷xllla (1)、小花盾葉薯蕷皂苷(2)、胡 蘆巴皂苷iva (3)、三角薯蕷皂苷(4)、protobioside (5)、lilioglycoside k (6)、盾葉新苷(7)、三角葉皂 苷(8)、薯蕷次苷a (9)、延齡草皂苷(10)。其中， 化合物1，3, 5, 6均為首次從該植物中分離得到?；?合物110的體外血小

2、板活性篩選表明，化合物7和 8能夠誘導血小板聚集，而化合物9具有顯著抑制血 小板聚集的作用。關鍵詞盾葉薯蕷；留體皂苷；分離鑒定；血小 板聚集盾葉薯蕷 dioscorea zingiberensis c.h. wright，又稱黃姜，為薯蕷科薯蕷屬多年生草本攀援植物，廣泛 分布在河南、四川、湖北和陜西南部。盾葉薯蕷為我 國特有薯蕷屬植物，資源豐富，是生產激素類藥物合 成前體皂素(薯蕷皂苷元)的主要生產原料之一。盾 葉薯蕷作為中藥，具有清肺止咳、利尿通淋、通經止 痛、解毒消腫等功效1，也被用于中藥新藥的研究開 發(fā)。目前，上市藥物盾葉冠心寧片就是由盾葉薯蕷根 莖提取物生產而成的中成藥，可用于治療高血

3、脂、心 絞痛和冠心病等癥。留體皂苷是盾葉薯蕷中的主要化 學成分，前人已經從盾葉薯蕷中分離得到一系列的甾 體皂苷類成分2-5。早期的研究多集中在皂苷元，近 年報道的成分包括螺留皂苷及呋留皂苷，但研宄的系 統性不足，特別是對其中微量成分的分離鑒定研宄較 少。本文以盾葉薯蕷為研究對象，利用多種分離手段 從其70%乙醇提取物中共分離得到10個單體化合物， 并鑒定它們的結構分別為胡蘆巴皂苷xllla (1， trigoneoside xllla)、小花盾葉薯賴皂昔(2, parvifloside)、 胡蘆巴皂苷iva (3，trigoneoside iva)、三角薯蕷皂苷 (4, deltoside)、

4、protobioside(5)> lilioglycoside k(6)、盾葉新苷(7，zingiberensis newsaponin l)> 三角葉皂 苷(8，deltonin)、薯蕷次苷 a (9, prosapogenin a of dioscin)、延齡草皂苷(10, thllin)。其中化合物1，3，5, 6為首次從該植物中分離得到?；诙苋~冠心寧片 的臨床應用和已報道的盾葉薯蕷留體皂苷的心血管活 性，對得到的各單體化合物進行了體外血小板聚集活 性的篩選，初步探討其構效關系。1材料waters synapt 質譜儀（waters，美國）；varian unity i n

5、ova 600超導核磁共振譜儀（palo alto,美國） 和jnm-eca-400超導核磁共振譜儀（日本電子，日本）; waters 2695型高效液相色譜儀，venusil xbp c18色譜 （4.6 mmx250 mm, 5 u m,艾杰爾，天津），pl-els 2100型蒸發(fā)光檢測器（漂移管溫度70°c，霧化溫度 50 °c，氣流量 1.6 l?min-1，polymer，英國）;primeline solvent delivery module （asb美國）制備型高效液相 色譜儀，shodex rid 102型示差檢測器（showa denko, 日本），ve

6、nusil xbp c18 色譜柱（10.0 mm x 250 mm, 5 um,艾杰爾，天津）。sp825型大孔吸附樹脂（三 菱，日本）；ods-a （120，50 um； ymc,日本）; 柱色譜硅膠用硅膠h （青島海洋化工廠），薄層色譜硅 膠板（青島海洋化工廠）。monobloc ab104-s型1/1萬 天平（mettle-toledo,美國）；re-2000型旋轉蒸發(fā)儀（亞榮，上海）;shz-iii型循環(huán)水真空泵（亞榮，上海） christ alpha 1-2ld 型冷凍干燥機（marin christ，德 國）；560ca型血小板聚集儀（chronolog,美國）， centra

7、mp4r型離心機（iec,美國），15 ml硅化離心 管（金麥克，中國）；mek-2-7226血細胞計數儀（chronolog,美國）。分析純試劑甲醇、乙醇、乙腈、氯仿等有機溶劑（北京化學試劑廠）；所用色譜純試劑 甲醇（安徽時聯特種溶劑股份有限公司）、乙腈（美國 fisher公司）;肝素鈉（merck,德國）；戊巴比妥鈉 （merck,德國）。wistar雄性大鼠200 g （軍事醫(yī)學科 學院動物中心）。盾葉薯蕷根莖采購自陜西安康，由天津中醫(yī)藥大 學張麗娟教授鑒定為盾葉薯蕷d. zingiberensis,標本 （hj1004）保存于北京軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī) 學研究所生物技術研究室中藥化

8、學組。2提取與分離盾葉薯蕷藥材5.5 kg，切片，70%乙醇回流提?。? 次，每次lh），過濾，合并濾液，減壓濃縮至無醇味， 離心。上清液經sp825型大孔吸附樹脂柱色譜，依次 用10%，50%, 95%乙醇梯度洗脫。收集50%，95%乙 醇洗脫部分，濃縮后冷凍干燥分別得fr. a （90 g）和 fr. b （45 g）。fr. a進行加壓硅膠柱色譜，氯仿-甲醇- 水（65 : 20 : 365 : 35 : 10）梯度洗脫，得到4個 組分（fr. a1a4）。fr. a2進行開放c18柱色譜，25% 乙腈洗脫，分份收集，其中1058流分進行半制備液 相制備（28%乙腈-水為流動相，流速4.

9、5 ml?min-l）得 化合物6 （12.4 mg, tr28.2 min）, 6062份進行半 制備液相制備（28%乙腈-水為流動相，流速4.5ml?min-l)得化合物 5 (130.4 mg, tr 32.5 min)0將fr. a3進行半制備液相制備分離，27%乙腈為流動相(流速 4.0 ml?min-l)，得化合物 4 (160 mg，tr 25.4min), 3 (3.3 mg, tr 24.2 min)。將 fr. a4 進行開放c18柱色譜，22%乙腈洗脫，分份收集，合并5065 流分得到化合物2 (309 mg), 7484份再經制備液相 (27%乙腈-水為流動相，流速4.

10、5ml?min-l)制備 得化合物1 (10.2 mg，tr 18.8 min)。fr. b進行加壓 硅膠柱色譜，氯仿-甲醇-水梯度(9:1: 065 : 35 : 10下層)洗脫，分份收集，1014流分重結晶得到 化合物10 (11.5 mg)，5259流分重結晶得到化合物 9 (103 mg), 78102流分重結晶得到化合物8 (740 mg), 126140流分重結晶得到化合物7 (1.5 g)。3結構鑒定化合物1白色無定形粉末。esi-ms m/z 1 225.6m-h-。1h-nmr (c5d5n，600 mhz) 5： 0.88(3h，s，h-18)，1.05 (3h，s，h-1

11、9)，1.31 (3h，d，j=6.6hz, h-21)，1.02 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，4.91(1h, j=7.2, glcl-h-1)，6.22 (1h，brs，rha-h-1)，5.07 (1h，d，j=7.8 hz, glc2-h-1)，5.28 (1h，d, j=7.8hz, glc3-h-1)，4.81 (1h，d，j=7.8 hz, glc4-h-1)， 4.06 (1h，m，h-26a)，3.48 (1h，dd，j:9.0, 6.0 hz，h-26b)； 13c-nmr(c5d5n, 150 mhz) 5 : 37.5(01),30.2 (c-2)，78

12、3 (c-3)，39.0 (c-4)，140.9 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll), 40.0 (012)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14), 32.5 (c-15)，81.1 (c-16)，63.8 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.7 (c-20)，16.5 (c-21)， 110.7(022)，37.2 (c-23)，28.3(024)，34.5(025 )，75.6 (c-26)，17.4 (c-27)，100.0 (glc

13、l-c-1)，77.3(glcl-c-2), 76.2 (glcl-c-3)，81.5 (glcl-c-4)，77.6 (glcl-c-5)，61.8 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.4 (rha-c-2), 72.8 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)，104.6 (glc2-c-1)，73.7 (glc2-c-2)，88.3 (glc2-c-3)，69.5 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c-5), 61.8 (glc2-c-6), 106.0 (glc3-c-1), 75.4

14、 (glc3-c-2)，78.2 (glc3-c-3)，71.7 (glc3-c-4)，78.6 (glc3-c-5)，62.6 (glc3-c-6)，105.2 (glc4-c-1)，75.3 (glc4-c-2)，78.7 (glc4-c-3)，71.6 (glc4-c-4)，78.5 (glc4-c-5), 62.9 (glc4-c-6)。以上數據與文獻6報道的trigoneoside xllla的數據一致，故鑒定化合物1 結構為 trigoneoside xllla (胡蘆巴皂苷 xllla)?；衔?白色無定形粉末。esi-ms m/z 1225.6m-h-。1h-nmr (c5d5

15、n, 600 mhz) 8： 0.90(3h，s，h-18)，1.04 (3h，s，h-19)，1.33 (3h，d，j=6.6 hz, h-21)，0.98 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，4.90(1h，d，7.2，glcl-h-1)，6.22 (1h，s，rha-h-1)，5.08 (1h，d，j=7.8 hz, glc2-h-1)，5.28 (1h，d，j=7.8hz, glc3-h-1)，4.81 (1h，d，j=7.8 hz，glc4-h-1),3.93 (1h，m，h-26a)，3.61 (1h，dd，j=9.0, 6.0hz，h-26b)0 13c-nmr (c5d

16、5n，150 mhz) 5 : 37.5 (c-l),30.2 (c-2)，78.2 (c-3), 39.0 (c-4)，140.8 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10), 21.1 (c-ll)，40.0 (c-12)，40.5 (c-13)，56.6 (c-14), 32.4 (c-15)，81.5 (c-16)，63.9 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.8 (c-20)，16.3 (c-21)， 110.7(022)，37.2(023)，28.4(024)，34.3

17、(025)，75.2 (c-26), 17.5 (c-27)，100.0 (glcl-c-1)，77.3 (glcl-c-2)，76.3 (glcl-c-3)，81.3 (glcl-c-4), 77.7 (glcl-c-5)，61.5 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.5 (rha-c-2), 72.8 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，693 (rha-c-5), 18.7 (rha-c-6), 104.6 (glc2-c-1)，73.7 (glc2-c-2), 88.4 (glc2-c-3)，69.3 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c

18、-5)，61.8 (glc2-c-6)，105.9 (glc3-c-1)，75.6 (glc3-c-2)，78.3 (glc3-c-3)，71.6 (glc3-c-4)，78.7 (glc3-c-5), 62.5 (glc3-c-6)，105.0 (glc4-c-1)，75.2(glc4-c-2)，78.5 (glc4-c-3)，71.6 (glc4-c-4)，78.5(glc4-c-5), 62.9 (glc4-c-6)。以上數據與文獻7-8報道的parvifloside的數據一致，故鑒定化合物2結構 為parvifloside (小花盾葉薯蕷苷)?；衔?白色無定形粉末。esi-ms m/

19、z 1 063.5m-h-。1h-nmr (c5d5n，600 mhz) 5： 0.88(3h, s, h-18)，1.04 (3h, s，h-19), 1.30 (3h，d，j=6.6hz, h-21)，1.01 (3h，d, j=6.6 hz, h-27), 4.93(1h, j=7.2, glcl-h-1)，6.24 (1h，brs，rha-h-1)，5.12 (1h，d，j=7.2 hz, glc2-h-1)，4.81 (1h，d, j=7.8hz, glc3-h-1)，4.07 (1h，m，h-26a)，3.47 (1h， dd,j=9.0,6.0 hz,h-26b)ol3c-nmr

20、(c5d5n, 150 mhz)5 : 37.5 (c-l), 30.2 (c-2)，78.3 (c-3), 39.0 (c-4)，140.9 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll)，40.0 (012)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (c-15)，81.1 (c-16)，63.8 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.7 (c-20)， 16.5(021), 110.7(022)，37.2 (c-23)，28.4(024)，

21、34.5(025)，75.4(026)，17.5(027)，loo.o(glcl-c-l)，77.3 (glcl-c-2)，76.2 (glcl-c-3)，82.1 (glcl-c-4),77.8 (glcl-c-5)，62.1 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.5 (rha-c-2)，72.8 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，69.5(rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)，105.3 (glc2-c-1)，75.0 (glc2-c-2)，78.4 (glc2-c-3)，71.2 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c-5)，61.

22、8 (glc2-c-6)，105.2 (glc3-c-1)，75.2 (glc3-c-2)，78.6 (glc3-c-3)，71.7 (glc3-c-4)，78.5 (glc3-c-5)，62.9 (glc3-c-6)。以上數據與文獻9報道的trigoneoside iva的數據一致，故鑒定化合物3結 構為trigoneoside iva (胡蘆巴皂苷iva)。 化合物 4 白色無定形粉末。esi-ms m/z 1 063.5m-h-olh-nmr(c5d5n，600 mhz) 5： 0.88 (3h，s，h-18)，1.04 (3h，s, h-19)，1.30 (3h, d, j=6.6 h

23、z，h-21)，1.01 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，4.93 (1h，j=7.2, glcl-h-1),6.24 (1h，brs，rha-h-1)，5.12 (1h，d, j二7.2 hz， glc2-h-1)，4.81 (1h，d, j=7.8 hz, glc2-h-1)，3.96(1h，m，h-26a), 3.6o(1h，dd，j=9.0, 6.0 hz，h-26b)。 13c-nmr (c5d5n, 150 mhz) 8： 37.5 (c-l)，30.2(c-2)，78.2 (c-3)，39.0 (04)，140.8 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-

24、7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10), 21.1 (c-ll)，40.0 (c-12)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (c-15)，81.1 (c-16)，63.9 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.7 (c-20)，16.5 (c-21)， 110.7(022)，37.2(023)，28.3(024)，34.4(025)，75.4 (c-26)，17.5 (c-27), 100.1 (glcl-c-1), 77.3(glcl-c-2)，76.2 (glcl-c-3)，82.1 (glcl-c-4

25、)，77.8(glcl-c-5), 62.1 (glcl-c-6), 101.8 (rha-c-1)，72.5(rha-c-2)，72.7 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，69.5(rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)，105.3 (glc2-c-1)，75.0(glc2-c-2)，78.4 (glc2-c-3)，71.2 (glc2-c-4)，78.3(glc2-c-5)，61.8 (glc2-c-6)，105.2 (glc3-c-1)，75.2(glc3-c-2)，78.6 (glc3-c-3)，71.7 (glc3-c-4)，78.5(glc3-c-5), 6

26、2.9 (glc3-c-6)。以上數據與文獻7-8 報道的deltoside 一致，故確定化合物4的結構為 deltoside (三角薯蕷皂苷)?；衔?白色無定形粉末。esi-ms m/z 901.5 m-h-。1h-nmr (c5d5n, 400 mhz) 8： 0.89 (3h， s，h-18)，1.05 (3h，s，h-19)，1.30 (3h，d，j=6.6 hz, h-21)，1.01 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，5.02 (1h， j=7.4hz, glcl-h-1)，6.38 (1h, brs，rha-h-1)，4.81(1h，d，j=7.8 hz, glc2-

27、h-1)，3.93 (1h, m，h-26a)， 3.62(1h，dd，j=9.0, 6.0 hz，h-26b)。13c-nmr(c5d5n, 100 mhz) 5： 37.6 (c-l)，30.2 (c-2)，78.3 (c-3)， 39.0 (c-4)，140.9 (05)，121.9 (c-6), 32.4 (c-7)，31.7 (c-8), 50.4 (c-9), 37.2 (c-10)，21.1 (c-ll)， 40.0 (c-12)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (c-15)， 81.1(016) , 63.9(017)，16.5(018)，19.4(0

28、19)， 40.7(020)，16.5(021)，110.7(022)，37.1(023)，28.4 (c-24), 34.5 (c-25), 75.3 (026)，17.5 (c-27)，100.4 (glcl-c-1)，79.7 (glcl-c-2)，78.0 (glcl-c-3)，71.9 (glcl-c-4)，78.5 (glcl-c-5)，62.9 (glcl-c-6),102.1 (rha-c-1)，72.6 (rha-c-2), 72.9 (rha-c-3)， 74.2 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5), 18.7 (rha-c-6)，105.0(glc2-c-1

29、)，75.2 (glc2-c-2)，78.6 (glc2-c-3)，71.7(glc2-c-4)，77.8 (glc2-c-5)，62.7 (glc2-c-6)。以上 數據與文獻7中的protobioside 一致，確定化合物5 的結構為 protobioside?；衔?白色無定形粉末。esi-ms m/z 755.4 m-h-。1h-nmr (c5d5n, 600 mhz) 8： 0.88 (3h， s，h-18)，1.04 (3h，s，h-19)，1.30 (3h，d，j=6.6 hz, h-21)和 1.01 (3h, d, j=6.6 hz, h-27)，4.93(1h，d，j=7.

30、2hz，h-17 )，4.81 (1h，d，j=7.8 hz, h-l7 z )，3.96(1h，m，h-26a)，3.6o(1h，dd，j=9.0, 6.0 hz，h-26b)o 13c-nmr (c5d5n, 150mhz) 6 :37.5 (c-l)，30.3 (c-2)，78.2 (c-3)，39.0 (c-4)，140.9(c-5)，121.8 (c-6), 32.3 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4(c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll), 40.0 (c-12), 40.8(c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (015)，81.1 (c-16

31、)，62.9 (c-17), 16.5 (c-18), 19.4 (019)，40.7 (c-20)， 16.5(021)，110.9(022), 37.2 (023)，28.3(024)， 34.3(025)，75.4(026)，17.5(027)，102.6(glcl-c-l),75.3 (glcl-c-2)，78.2 (glcl-c-3)，71.8 (glcl-c-4)，78.2 (glcl-c-5)，62.9 (glcl-c-6), 105.0 (glc2-c-1)，75.2 (glc2-c-2)，78.6 (glc2-c-3)，71.8 (glc2-c-4),78.5 (glc2-c

32、-5)，62.9 (glc2-c-6)。以上數據與文獻7 中的lilioglycoside k 一致，確定化合物6的結構為 lilioglycoside k。 化合物7白色無定形粉末。 esi-ms m/z 1 045.5 m-h-。13c-nmr(c5d5n，100 hz)8 : 37.5 (c-l)，30.6 (c-2)，78.5 (c-3)，38.9 (c-4)，140.7 (c-5)，121.8 (c-6)，32.2 (c-7)，31.8 (c-8)，50.2 (c-9), 37.1 (c-10), 21.1 (c-ll), 39.8 (c-12),40.4 (c-13)，56.6 (

33、c-14)，32.3 (c-15), 81.1 (c-16)，62.8 (c-17)，16.3 (c-18), 19.4 (c-19), 41.9 (c-20), 15.0(021)，109.2(022)，31.6(023)，29.3(024)， 30.6(025)，66.8(026)，17.3(027)，99.9(glcl-c-l),77.2 (glcl-c-2), 76.3 (glcl-c-3), 81.5 (glcl-c-4),77.6 (glcl-c-5)，61.4 (glcl-c-6), 101.8 (rha-c-1)，72.5 (rha-c-2)，72.8 (rha-c-3)，74

34、.1 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5)，18.7 (rha-c-6), 104.6 (glc2-c-1), 73.7 (glc2-c-2)，88.3 (glc2-c-3)，69.3 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c-5), 61.7 (glc2-c-6)，105.9 (glc3-c-1)，75.6(glc3-c-2)，78.0 (glc3-c-3)，71.5 (glc3-c-4)，78.7(glc3-c-5), 62.5 (glc3-c-6)。以上數據與文獻10 中的zingiberensis saponin i 一致，故確定化合物7結 構為 zingiberen

35、sis saponin i (盾葉親斤苷)?；衔?白色無定形粉末。esi-ms m/z 883.5 m-h-。13c-nmr(c5d5n，100 mhz) 8 : 37.4(01)，30.1 (c-2)，78.5 (c-3)，38.9 (c-4)，140.7 (c-5)，121.8 (c-6)，32.2 (c-7)，31.8 (c-8)，50.2 (c-9)，37.1 (c-10)，21.1 (c-ll), 39.8 (012)，40.4 (c-13)，56.6 (c-14)，32.3 (c-15)，81.1 (c-16)，62.8 (c-17)， 16.3(018)，19.4(019)，4

36、1.9(020)，15.0(021)， 109.2(022)，31.6 (c-23)，29.2(024)，30.6(025)，66.8 (c-26)，17.3 (c-27)，99.9 (glcl-c-1)，77.2(glcl-c-2), 76.2 (glcl-c-3)，82.0 (glcl-c-4)，77.7(glcl-c-5)，62.0 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.5(rha-c-2), 72.8 (rha-c-3)，74.1 (rha-c-4)，69.5(rha-c-5)，18.7 (rha-c-6), 105.3 (glc2-c-1)，74.9(glc2-

37、c-2)，71.2 (glc2-c-3)，78.3 (glc2-c-4)，78.0(glc2-c-5), 61.9 (glc2-c-6)o 以上數據與文獻7中 的deltonin 一致，故確定化合物8結構為deltonin (三角葉皂苷)?；衔?9 白色粉末。esi-ms m/z 721.4 m-h-。13c-nmr (c5d5n，150 mhz) 5： 37.5 (c-l)，30.2 (c-2)，78.3 (c-3)，39.0 (c-4)，140.9 (c-5)，121.8 (c-6)，32.2 (c-7)，31.7 (c-8)，50.3 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c

38、-ll), 39.9 (c-12)，40.5 (c-13)，56.7 (c-14)，32.3 (c-15)，81.1 (c-16)，62.9 (c-17)， 16.3(018)，19.4(019)，42.0(020)，15.0(021)， 109.3(022)，31.8 (c-23)，29.3(024)，30.6(025)， 66.9(026)，17.3(027)，100.4(glc-c-1)，79.7(glc-c-2),77.9 (glc-c-3)，71.8 (glc-c-4)，78.0 (glc-c-5)，62.7 (glc-c-6), 102.1 (rha-c-1), 72.6 (rha

39、-c-2)，72.9 (rha-c-3), 74.2 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)。以上數據與文獻7中的 prosapogenin a of dioscin 一致，故確定化合物9結構為prosapogenin a of dioscin (薯蕷次苷 a)。化合物 10 白色粉末。esi-ms m/z 575.4m-h-o13c-nmr (c5d5n，150 mhz) 5： 37.5 (c-l)，30.4 (c-2)，78.2 (c-3)，39.0 (c-4)，140.8 (c-5)，121.8 (c-6)，32.3 (c-7)，31.7 (c-8

40、)，50.3 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll), 39.9 (c-12)，40.5 (c-13)，56.7 (c-14)，32.2 (c-15)，81.1 (c-16)，62.9 (c-17)， 16.3(018)，19.4(019)，42.0(020)，15.0(021)， 109.3(022)，30.6 (c-23)，29.3(024)，30.6(025 )，66.9cc-26), 17.3(c-27), 102.5(glc-c-l), 75.5(glc-c-2)，78.2 (glc-c-3), 71.8 (glc-c-4), 78.2 (glc-c-5), 62

41、.7 (glc-c-6)。以上數據與文獻11-12中的trillin 一致， 確定化合物10的結構為trillin (延齡草皂苷)。4體外血小板活性的篩選wistar雄性大鼠以戊巴比妥鈉(4060 mg?kg-l)腹腔注射麻醉，預先用肝素潤濕的注射器心臟取血， 200u?ml-l肝素抗凝混勻裝入15 ml硅化離心管。抗 凝血在室溫下以800 r?min-l離心約1 min，取富血小 板血漿(prp)，其余部分室溫以3 000r?min-l繼續(xù)離 心lomin，取貧血小板血漿(ppp)o用血細胞計數儀 以ppp調prp濃度為3.0x1011?l-l。以ppp做空白對 照，調節(jié)透光率到100%。取

42、495 ulprp于37 °(2預 溫3min，放入檢測儀后分別加入單體化合物，37 °c 孵育3 min,檢測無誘導活性后加入5 u l u46619 (終 ?農度0.5 u mol?l-l)誘導血小板聚集，記錄5 min內 的圖形變化，讀取相應數值，實驗結果見表1。由實 驗結果可知在終濃度為100 umol?l-l時化合物7，8 具有誘導血小板聚集的作用，誘導率分別為70%，64%； 化合物9有較強抑制血小板聚集的作用，抑制率為 100%。5結果與討論盾葉薯蕷是我國特有的薯蕷屬植物，留體皂苷是 其中的主要活性成分。從作者分離鑒定化合物的結構 可知其留體皂苷主要包括含有2

43、個糖鏈的水溶性呋甾 皂苷（化合物16）和含有1個糖鏈的螺留皂苷（化 合物710），他們對應的皂苷元主要為薯蕷皂苷元 （diosgenin）,另有少量的其c-25 s構型的異構體，即 約莫皂苷元（yamogenin）。體外血小板聚集實驗結果 顯示，呋留皂苷均不具有直接誘導或抑制血小板聚集 的活性，而對應的螺留皂苷則顯示一定的誘導或抑制 血小板聚集活性。在100 umol?l-l濃度時，含有3 個和4個糖基的化合物7, 8顯示誘導血小板聚集的活 性，而相同皂苷元、僅含2個糖基的化合物9則顯示 抑制血小板聚集活性，可見其糖基不僅影響活性的強 弱，還決定活性的性質。張楠、呂浩等報道了盾葉冠心寧片治療高

44、脂血癥、 心絞痛及冠心病的臨床研宄12-15，黃文等16-17進 行了盾葉薯蕷總皂苷及其單體化合物的體內外抗血栓 作用研宄。留體皂苷口服或灌胃后，往往被腸道菌群 或體內酶代謝，生成一系列次生苷及苷元（主要為糖 基水解產物），要想真正闡明其體內藥效物質基礎（吸 收進入體內發(fā)揮藥理作用的分子結構）及作用機制， 是一項十分復雜而艱難的工作。本文分離鑒定了盾葉薯蕷中一系列留體皂苷單體化合物，并對其體外血小 板活性進行了篩選，為日后闡明盾葉薯蕷治療心血管 疾病的藥效物質基礎及作用機制靶點、開發(fā)新的藥物 奠定了基礎。參考文獻1 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編.上 冊m.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996

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