免疫組化聯(lián)合抗體在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中的應用

1、       免疫組化聯(lián)合抗體在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中的應用                     【摘要】目的：分析在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中免疫組化聯(lián)合抗體的應用效果。方法：取70例本院（2018年1月-2019年5月）收治的行胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測患者作為研究對象，所有研究對象均開展免疫組化聯(lián)合抗體檢測，對比免疫組化聯(lián)合抗體檢測在胸腹水沉渣石蠟包

2、埋病理檢測中的價值。結果：胸腹水液基層薄層制片陽性檢出率較高。在石蠟包埋病理檢測技術中，可提主同細胞成分收集率，觀察組織結構，同時聯(lián)合免疫組化檢測，可在清晰的背影下，準確定位陽性顆粒，提高檢出率的同時明確腫瘤組織來源。結論：免疫組化聯(lián)合抗體檢測用于胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中，可提高胸腹水檢出率，提高疾病診斷符合率，為臨床提供有效的參考依據(jù)，值得推廣。【關鍵詞】胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測；免疫組化；抗體；應用效果目前，隨著人們生活與飲食習慣不斷變化，使得惡性疾病發(fā)病率直線上升。特別是對于胸腹水患者來講，有效的良惡性病情判斷，對提高疾病的診斷結果、制定有效的治療措施具有積極作用1。胸腹水是腫瘤患

3、者最常見的一種并發(fā)癥，在其的臨床診斷中，多以體液細胞檢查為主，但此檢查方法檢出率較低。隨著醫(yī)療技術的進步，體液細胞檢測可通過鏡下清晰地觀察結構及形態(tài)，提高診斷符合率。且在石蠟包埋病理檢測中，免疫組化聯(lián)合抗體檢測中，可以盡早診斷患者病情，提高診治效果2。本次針對在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中免疫組化聯(lián)合抗體的應用效果進行分析，報告如下。1.資料與方法1.1一般資料取70例莆田學院附屬醫(yī)院（2019年1月-2019年5月）收治的行胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測患者作為研究對象。70例患者中男性、女性分別44例、26例，年齡38-70歲之間，平均年齡（64.39±10.29）歲；病程：1-3年

4、，平均病程(2.08±0.29)年。本次研究經(jīng)本院倫理會同意。且所有樣本均由莆田學院附屬醫(yī)院病理科副主任醫(yī)師確診為惡性。1.2方法70例患者，均抽取新鮮的胸腹水，送往檢測。胸腹水抽取后放置時間不可超過2h，置于50ml離心試管內，每管50ml，加入乙醇（95%），離心處理15min（2000r/min），將上清液棄之，吸出沉淀物，將其制成1張液基細胞涂片，剩余的沉淀物，用濾紙包埋，置入脫水盒中，對其進行編號，之后在脫水機中同時放于組織標本，做固定、脫水、透明、浸蠟流程，最后將其制成石蠟組塊，并將其切成3-4um切片。1.3分析指標對比免疫組化聯(lián)合抗體檢測在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中

5、的價值。免疫組化染色與結果判斷：應用elivision法開展檢測，所用的抗體有癌胚抗原、ck-h、calretin、cklow、ca125、d2-40、ki-67、ttf-1、tg等。所有試劑由福州邁新生物技術開發(fā)有限公司提供。將切片常規(guī)脫蠟至水，采用pbs洗液，加入h2o2(3%)，放于室溫下放置10min，以此來消除內源性過氧化物酶的活性。抗原修復根據(jù)說明書進行，加入一抗，讓其在4的冰箱過夜，加入二抗，dab顯色，復染采用蘇木素，分化用鹽酸乙醇，行切片脫水與封片。結果：部分腫瘤細胞胞質（d2-40、tg、cea等）著色為陽性，ck-h、calretin、cklow、ca125等腫瘤細胞胞質

6、著色為陽性；ki-67、ttf-1腫瘤細胞核著色為陽性3。2. 結果2.1檢出率比較70例患者中，經(jīng)液基細胞涂片染色，在形態(tài)特點下檢出癌細胞40例。陽性率57.1%。且以上檢出患者，經(jīng)沉渣包埋也可檢出癌細胞。經(jīng)液基細胞涂片檢查，發(fā)現(xiàn)可疑癌細胞20例，在沉渣石蠟包埋、免疫組化技術檢測后，檢出18例癌細胞。在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中免疫組化聯(lián)合抗體檢測檢出總例數(shù)58例，差異有意義，p<0.05，見表1。表1檢出率比較2.2免疫組化結果分析58例患者經(jīng)過沉渣包埋、切片、免疫組化，檢出癌細胞包括間皮瘤5例、卵巢癌6例、胃腺癌12例、鱗癌10例、肺腺癌25例。即在腺癌中：ck-h（-）、cal

7、retin（-）、cklow（+）、ca125（+）、ttf-1（+）；鱗癌：ck-h（+）、calretin（-）、cklow（-）、ca125（-）、ttf-1（-）。2. 討論在胸腹水檢測中，脫落的細胞學檢查具有易行、簡單、準確、快速等特點，且還可以減輕患者痛苦，臨床應用較為廣泛，且胸腹水脫落細胞還是確定良惡性胸腹炎的主要方法。常規(guī)的離心法，陽性檢出率較低。近年來，隨著液基細胞檢測技術、沉渣石蠟包埋法的進步，在胸腹水檢測中被廣泛應用。沉渣石蠟包埋制出的切片細胞結構完整，且數(shù)量多，圖像清晰，可以極大地提高陽性檢出率方法例數(shù)可疑陽性率陽性率液基細胞檢查702050沉渣石蠟包埋聯(lián)合免疫組化70

8、12584。此外，在石蠟切片時，開展免疫組織染色，聯(lián)合抗體檢測，對腫瘤進行分類。胸腹水脫落細胞學檢測中，對于癌細胞與間皮細胞的鑒別較難，特別是對于退變的間皮細胞，因不典型易被誤診，且在沉渣石蠟包埋時，病灶細胞形態(tài)清晰、有規(guī)律性排列，異型性較為明確。因此，在一些不能明確病情的病例中，免疫組化聯(lián)合抗體檢查，可以對癌細胞與細胞分類為臨床提供一定的指導作用。同時，在實踐中，單個抗體在不同癌細胞中具有不同的敏感性與特異性，取多種抗體聯(lián)合檢測，并在石蠟包埋切片中檢測中，具有積極作用5。因此，在胸腹水沉渣石蠟包埋病理檢測中，免疫組化聯(lián)合抗體檢測，可有效提高不同腫瘤診斷符合率，為臨床提供診治指導，值得臨床推廣。參考文獻：1李瀟,田保玲,劉娟娟,等.胸腹水細胞沉渣石蠟包埋免疫組化檢測法指導晚期卵巢癌新輔助化療研究j.中國實用婦科與產(chǎn)科雜志,2016,32(09):890-895.2魏霖,程焰紅,李顏,等.胸腹水沉渣包埋結合免疫組化染色在細胞病理診斷中的應用j.診斷病理學雜志,2015,22(12):825.3朱林琳,羅明惠,孟亞飛,等.免疫組化抗體聯(lián)合應用在胸腹水沉渣包埋病理診斷中的意義j.中國農(nóng)村衛(wèi)生,20