泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀和存在問題_0

1、泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀和存在問題 關(guān)鍵詞 支原體 衣原體檢測(cè)健康訊 :摘 要對(duì)泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，著重分析目前支原體和衣原體檢測(cè)中存在的亟待解決的問題。 解脲脲原體（ UU）、人型支原體（ MH）、生殖支原體（ MG）和沙眼衣原體（ CT）都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎（ NGU）的最主要病因 (90%以上 ) ，且已成為發(fā)病率最高的性傳播疾病， 已越來越受到重視。但由于技術(shù)局限， 目前對(duì)其檢測(cè)仍存在不少問題亟待解決。 筆者結(jié)合自己的工作經(jīng)驗(yàn)，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀和存在問題，

2、以裨于試劑的改進(jìn)和臨床檢測(cè)方法的提高。檢測(cè)現(xiàn)狀培養(yǎng)法 支原體可用人工合成培養(yǎng)基培養(yǎng)， 由于不具有甾醇合成能力， 培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)添加含甾醇等長(zhǎng)鏈不飽和脂肪醇豐富的物質(zhì)，一般采用 培養(yǎng)基加馬血清。 MG生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分復(fù)雜，生長(zhǎng)極緩慢，一般需 2 周 3 月。CT必須采用細(xì)胞培養(yǎng)，一般用McCoy細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)，但細(xì)胞培養(yǎng)需專業(yè)化技術(shù)、試劑和設(shè)備，要求較高，周期也較長(zhǎng)，目前臨床一般不采用， 僅在科研單位進(jìn)行科研活動(dòng)， 或作為新診斷試劑方法學(xué)評(píng)價(jià)的金標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)法不能快速檢測(cè)支原體感染，一般 UU和 MH需 2 3 天才能出結(jié)果。不過隨著實(shí)驗(yàn)水平提高，市面上已出現(xiàn)一些 24 h 可出結(jié)果的試劑。但 MG

3、尚未實(shí)現(xiàn) 24 h 培養(yǎng)出結(jié)果，因此臨床上不采用培養(yǎng)法檢測(cè) MG，僅用于科研活動(dòng)。 目前臨床培養(yǎng)法檢測(cè) UU和 MH多采用液體培養(yǎng)基， 加樣培養(yǎng)變色判斷結(jié)果。 理論上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發(fā)生，因此要求變色后過濾除菌， 再接種到固體培養(yǎng)基上觀察菌落。若培養(yǎng)基選用適當(dāng)抗生素， 有效地抑制雜菌生長(zhǎng)， 單純液體培養(yǎng)基結(jié)果就有相當(dāng)高的臨床可信度。即使有個(gè)別變色是雜菌所致，標(biāo)本病人也有細(xì)菌性炎癥，采用抗生素也不為過。免疫法 采用此法檢測(cè)的試劑目前臨床較常用。一般為間接法（ELISA法或金標(biāo)法）檢測(cè)抗體，比較而言金標(biāo)法檢測(cè)抗體的試劑用得更多；而用于檢測(cè)支原體抗原的試劑目前尚未商品化。 此類試劑

4、一般采用夾心法檢測(cè)CT特異性脂多糖抗原 (LPS) ，影響較大的有金標(biāo)試劑和免疫熒光試劑。 由于免疫反應(yīng)的特異性和酶催化底物反應(yīng)的高效性或熒光信號(hào)的高敏性，故此類試劑理論上靈敏度和特異性都較高。PCR法 此類衣原體試劑有定性和定量（多是 PCR酶免試劑）兩類，而支原體試劑只有定性一類。 PCR反應(yīng)有較高的靈敏度，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件、試劑以及操作人員的要求都較高，操作不當(dāng)易造成錯(cuò)誤判斷， 并且 PCR定性試劑一般沒有藥品批準(zhǔn)文號(hào)，臨床上使用應(yīng)慎重。 定量試劑有藥品批準(zhǔn)文號(hào)， 但面市不久，尚處于推廣中?？蒲袉挝皇褂?PCR試劑一般用于鑒定血清型， 而醫(yī)療單位使用 PCR定量試劑多用于臨床療效觀察。 快速生

5、化法 由于支原體生化酶反應(yīng)速度和特異性都存在問題，目前尚無檢測(cè)支原體快速生化法試劑， 但衣原體已有此方法學(xué)試劑。 國(guó)內(nèi)開發(fā)的生殖道 CT生化檢測(cè)試劑即為此類， 它是根據(jù) CT侵染上皮細(xì)胞后產(chǎn)生的獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)， 配以生化酶試劑與之反應(yīng)， 觀察變色與否判斷結(jié)果。 臨床觀察資料表明，以細(xì)胞培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，此試劑的靈敏度和特異性分別為 87%以上和 97% 以上，加之價(jià)格較低，具有良好的應(yīng)用前景。 2 存在問題 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根據(jù)一次抗體檢測(cè)結(jié)果，很難判斷標(biāo)本病人是既往感染還是現(xiàn)癥感染， 再次測(cè)定支原體抗體滴度增加時(shí)方可判為支原體陽性。 為此要求檢測(cè)支原

6、體抗體的應(yīng)為定量試劑， 而目前國(guó)內(nèi)間接法檢測(cè)支原體抗體的試劑都是定性試劑， 且有一定的市場(chǎng)占有率， 這就說明了為什么許多病人檢測(cè)抗體為陽性而培養(yǎng)則為陰性 1，也在一定程度上影響了病情的確診。國(guó)內(nèi)有些科研單位正研制間接法檢測(cè)支原體抗原的試劑 2，直接檢測(cè)病原體抗原，因此比檢測(cè)抗體試劑有更高的特異性和準(zhǔn)確性。 基于支原體抗體定性檢測(cè)試劑的可靠性存在問題， 在檢測(cè)支原體抗體定量試劑和支原體抗原試劑商品化之前，宜采用液體培養(yǎng)法。MG診斷問題以往資料顯示 MG感染率不超過 5%，鑒于培養(yǎng)周期長(zhǎng)，有關(guān)研究又不多，臨床一般不檢測(cè) MG。但有資料表明MG的陽性率并不低（ %）3，以前資料的低感染率可能是試劑的靈敏度偏低所致。因此進(jìn)一步開展 MG的研究，開發(fā)臨床適用的試劑， 應(yīng)是當(dāng)前工作重點(diǎn)之一。支原體計(jì)數(shù)的可靠性問題 目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上銷售的支原體藥敏試劑，一般都帶支原體計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)的前提必須是標(biāo)本采集量的標(biāo)準(zhǔn)化， 若標(biāo)本采集量不標(biāo)準(zhǔn)， 計(jì)數(shù)就是空談。血清標(biāo)本比較容