黃原膠降解菌生長條件的優(yōu)化.doc

1、湖 北 大 學(xué)本科畢業(yè)論文（設(shè)計）題 目 黃原膠降解菌生長條件的優(yōu)化 姓 名 曾 偉 學(xué) 號 014609200117 專業(yè)年級 2009級生物工程（繼續(xù)教育學(xué)院） 指導(dǎo)教師 杜 鵬 職 稱 副教授 2012 年12月 28 日湖北大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院（高等教育自學(xué)考試全日制助學(xué)班）目 錄前 言51. 黃原膠結(jié)構(gòu)與性能51.1 分子結(jié)構(gòu)51.2 基本性能61。2.1 注入性能61.2.2 增粘性能61。2.3 溫度敏感性71。2.4 剪切安定性71.2。5 理化性質(zhì)穩(wěn)定71.2.6 具有良好的兼容性72。 黃原膠降解菌83。 黃原膠的降解和黃原膠降解菌81。 實驗材料91.1材料91.1。1供試菌

2、：黃原膠降解菌混合菌樣品91.1。3 試劑與儀器102. 實驗方法102.1 菌種的篩選分離102。2 菌種的活化102.3 菌種的選擇性培養(yǎng)112.4 黃原膠降解菌的生長曲線112.5. 影響黃原膠降解菌生長的因素112.5。1 溫度對黃原膠降解菌的影響.112。5。2 碳源對發(fā)酵的影響：122.5。3 pH 值對菌體生長及發(fā)酵產(chǎn)酶的影響122。5。4 氮源對菌體生長的影響133。 結(jié)論13參考文獻(xiàn)14致謝15 黃原膠降解菌生長條件的優(yōu)化摘 要黃原膠降解菌是從土壤和水中分離出來的，它是以黃原膠為碳源進(jìn)行生物降解的一類微生物。對黃原膠降解菌具有較強降解能力的為桿狀菌和球狀菌，桿狀菌菌體大小為（

3、0.21。0um)×（0.83.2um)，球菌大小為0。20。4um，革蘭氏染色陰性。通過對黃原膠降解菌的生長規(guī)律及影響因素研究,繪制出了黃原膠降解菌的生長曲線,確定出了其最適合生長條件:礦化度為5×103mg/L,PH值為7.5，溫度為35,搖床轉(zhuǎn)速為120r/min,接種量為5較適宜，黃原膠降解菌在黃原膠濃度為15g/L范圍內(nèi)生長較快?！娟P(guān)鍵詞】 黃原膠降解菌；生長規(guī)律；影響因素；環(huán)境保護(hù) Xanthandegrading bacteria Optimization of growth conditionsAbstract Xanthandegrading bacter

4、ia was isolated from soil and water， and it is based on xanthan gum as a carbon source for biological degradation of a class of microorganisms. On xanthan gum-degrading bacteria have a strong ability for degradation of rod-shaped bacteria and the spherical bacteria, rodshaped bacteria biomass size (

5、0。21.0m） × (0。83.2m)， cocci size of 0。20。4m， leather Lan's stain-negative。 Degradation of xanthan gum by the growth pattern of bacteria and its influencing factors, drawing out the xanthan gumdegrading bacteria growth curve, identify its most suitable growth conditions: salinity of 5 ×

6、 103mg/L, pH value of 7.5 ， the temperature is 35, shaking speed of 120r/min, inoculum size 5% is more appropriate， xanthan gum degrading bacteria in xanthan gum concentration of 15g/L grow faster within the scope.個人收集整理，勿做商業(yè)用途文檔為個人收集整理,來源于網(wǎng)絡(luò)【Key words】 xanthan gum-degrading bacteria；growth pattern

7、of environmental factors 前 言1. 黃原膠結(jié)構(gòu)與性能黃原膠（Xanthan Gum)是由甘藍(lán)黑腐黃單胞菌或野油菜黃單胞菌以碳水化合物為主要原料，經(jīng)好氧發(fā)酵生物工程技術(shù)產(chǎn)生的一種高粘度水溶性微生物胞外多糖,是一種新型高分子多糖聚合物，可作為食品工業(yè)中的穩(wěn)定劑、乳化劑、增稠劑而廣泛應(yīng)用于食品加工業(yè)中，其獨特的分子結(jié)構(gòu)使其具有許多優(yōu)異的理化性能.近年來，由于該產(chǎn)品與一般的水解聚丙烯酰胺相比，其物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、加工工藝簡單、驅(qū)油效果好、制造成本低，又由于其具有良好的抗剪切降解能力，在地層中能選擇性流動，具有更好的驅(qū)油效果，已逐漸作為提高油田采收率的驅(qū)替劑或改善開采效果的化學(xué)

8、調(diào)剖劑應(yīng)用到油田開采中。目前，黃原膠作為油田驅(qū)替劑還處于礦場先導(dǎo)試驗階段。其主要相關(guān)性質(zhì)簡要如下：1。1 分子結(jié)構(gòu) 黃原膠是由D-葡萄糖、D甘露糖、葡萄糖醛酸、乙酸和丙酮酸組成的“五糖重復(fù)單元"結(jié)構(gòu)聚合體，分子量在2×l062×l07之間，其分子是由主鏈和多支側(cè)鏈形成的網(wǎng)狀鏈?zhǔn)浇Y(jié)構(gòu)，在每組第二個葡萄糖環(huán)上有兩個不同側(cè)鏈的纖維素鏈,側(cè)鏈也有象基本單元一樣的糖環(huán)。每個側(cè)鏈由三個單糖組成,第一個側(cè)鏈末端開始的是一個甘露糖，第二個側(cè)鏈與第一個類似,只是在末端甘露糖上有丙酮酸鹽單元。分子側(cè)鏈末端丙酮酸基因的多少對黃原膠性能產(chǎn)生較大影響，但丙酮酸鹽在分子中的分布還有待更進(jìn)一步

9、研究,丙酮酸鹽基團(tuán)和兩個葡萄糖酸使分子具有陰離子的特征，盡管這個分子與聚丙烯酰胺類似,在其側(cè)鏈上也帶有電荷，但在高含鹽度水中的行為完全不同，黃原膠溶液能和許多鹽溶液混溶，其粘度不受影響，這種現(xiàn)象是由于側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的影響,其分子的剛性比聚丙烯酰胺強，這也可能是它具有良好剪切安定性的原因,但如果丙酮酸鹽含量太高,吸咐量也可能增加。黃原膠的高級結(jié)構(gòu)是側(cè)鏈和主鏈之間通過氫鍵維系形成螺旋和多重螺旋。黃原膠的二級結(jié)構(gòu)是側(cè)鏈繞主鏈骨架反方向纏繞，通過氫鍵維系形成棒狀雙螺旋結(jié)構(gòu).黃原膠的三級結(jié)構(gòu)是棒狀雙螺旋結(jié)構(gòu)間靠微弱的非極性共價鍵結(jié)合形成的螺旋符合物.這種有趣的結(jié)構(gòu)一方面使主鏈有免遭酸堿,生物酶等其他分子的破壞

10、作用,保持黃原膠溶液的粘度不容易受酸，堿影響,另外一方面,該結(jié)構(gòu)狀態(tài)又使其一定的濃度的水溶液呈現(xiàn)溶質(zhì)液晶的現(xiàn)象。圖1 黃原膠的聚集態(tài)結(jié)構(gòu)1。2 基本性能 在采油工業(yè)中的應(yīng)用與目前采油使用的羧甲基纖維素、聚丙烯酰胺、變性淀粉及瓜爾膠相比，黃原膠具有以下性能及優(yōu)點:1.2.1 注入性能 聚合物溶液對油藏巖石有良好的注入能力是聚合物驅(qū)成功的最重要的條件之一，良好的注入能力反應(yīng)在兩個方面。第一，與注水相比，在向油藏注入聚合物時的壓力增加不應(yīng)高于因粘度增高而應(yīng)有的壓力增加；第二，在注入過程中，壓差應(yīng)能夠達(dá)到一個穩(wěn)定值，孔晾空間不應(yīng)被聚合物不可逆的堵塞。1.2.2 增粘性能 通常狀態(tài)下,天然的黃原膠分子的

11、帶電荷側(cè)鏈反向纏繞主鏈，在有序狀態(tài)時，靠氫鍵的維系呈現(xiàn)一般或雙螺的螺旋結(jié)構(gòu)，這些螺旋結(jié)構(gòu)靠微弱的共價鍵結(jié)合，還可排列成整齊的螺旋共聚體，與另一種高分子聚合物聚丙烯酰胺相比,分子有強的剛性,在水溶液中，分子十分舒展,因此增粘性良好。但高溫易引起黃原膠的水解、熱氧降解及螺旋結(jié)構(gòu)的改變等不利影響，從而導(dǎo)致粘度下降。 黃原膠屬高分子生物聚合物，其水溶液驅(qū)油時有兩個主要功能：一是調(diào)整吸水剖面;二是提高驅(qū)替相的粘度,降低油與驅(qū)替相的流度比，從而擴(kuò)大波及體積，提高原油采收率。因此增粘性能就成為聚合物驅(qū)中最重要的產(chǎn)品性能指標(biāo)之一，良好的增粘性可以使用少量的聚合物達(dá)到所需的流度比，可降低成本達(dá)到較好的經(jīng)濟(jì)效益。

12、1。2。3 溫度敏感性 黃原膠分子側(cè)鏈上的乙?；捅岣ㄟ^氫鍵的作用，使側(cè)鏈反向纏繞主鏈 形成單股或雙股的螺旋結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)對溫度較為敏感，隨溫度的升高，分子結(jié)構(gòu)出現(xiàn)有序向無序的轉(zhuǎn)變，從而影響黃原膠水溶液的粘度變化。長期熱穩(wěn)定性是黃原膠產(chǎn)品的重要指標(biāo)之一，它表明黃原膠分子在長時間的熱老化過程中溶液粘度的保留率.通常認(rèn)為黃原膠在高溫下不穩(wěn)定，可能產(chǎn)生以下三種降解：一是溫度升高時,黃原膠分子的螺旋結(jié)構(gòu)被破壞，即從有序向無序轉(zhuǎn)變；二是熱氧降解，只要有50×10的溶解氧就會顯著降低溶液的粘度；三是水解,黃原膠的葡萄糖主鏈以及丙酮酸、乙?；鶊F(tuán)等在溫度升高時會被水解斷裂。 1.2。4 剪切安

13、定性 聚合物驅(qū)油過程中，在混配、經(jīng)泵和閘門輸送時都可能出現(xiàn)高的剪切特別是聚合物流經(jīng)炮眼進(jìn)入地層的瞬間速度相當(dāng)快。聚合物分子在高剪切速率下會發(fā)生斷裂，從而導(dǎo)致粘度下降。聚丙烯酰胺分子呈蠕狀，在高速剪切下易斷裂,因此現(xiàn)場的攪拌速度與注入速率都要加以控制。相對而言,黃原膠分子更具剛性，抗機械降解能力較強。1。2。5 理化性質(zhì)穩(wěn)定 在高濃度NaCI存在下,粘度略有增加，Ca濃度達(dá)2 500 mg/kg時,粘度影響很小，在pH 211的條件下，粘度基本不變.能耐l10的高溫.同時黃原膠通過多點吸附與泥頁巖表現(xiàn)形成吸附膜減少慢水進(jìn)入泥頁巖的速度.防止水敏性泥頁巖水化膨脹，具有明顯的防塌能力。1.2.6 具

14、有良好的兼容性 黃原膠可與瓜爾膠、羧甲基纖維素、聚丙烯酰胺、變性淀粉互溶，與變性淀粉、瓜爾膠等混合后，粘度顯著增加，可降低用量,從而降低采油成本。黃原膠所具備的上述性質(zhì)使在在石油開采中具有顯著的優(yōu)勢。在石油開發(fā)中已經(jīng)開始應(yīng)用于鉆井、調(diào)剖堵水及二次采油,被形象地喻為“油井的優(yōu)質(zhì)催產(chǎn)素”.2。 黃原膠降解菌黃原膠降解菌是以黃原膠作碳源進(jìn)行生物降解的一類微生物總稱。從土壤和水中分離出來的黃原膠降解菌有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌等,篩選結(jié)果表明 ,細(xì)菌的降解能力最強。在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)菌呈桿狀、球狀,其中以桿狀菌居多，其次是球菌。桿狀菌菌體大小為（0.21.0 )m ×（0.83.2）m

15、，球菌大小為 0.20。4m ，革蘭氏染色陰性。黃原膠作為一種生物發(fā)酵制造的微生物雜多糖,由于其獨特的分子結(jié)構(gòu)，其水溶液具有良好的假塑性和穩(wěn)定性，已經(jīng)在食品、石油等行業(yè)中得到了廣泛的應(yīng)用,使黃原膠成為一種引人關(guān)注的，使用安全的生物材料.同時，近年來從各種途徑獲取的寡糖產(chǎn)品，由于其具有獨特的生物活性，得到了研究者的高度重視.已有研究者嘗試用化學(xué)或生物方法對黃原膠進(jìn)行降解以獲取寡糖。隨著寡糖研究的升溫，這項工作在不斷的深入。用黃原膠降解獲取的寡糖的生物活性引起了人們的廣泛關(guān)注。已有研究者從土壤中分離到可用于降解黃原膠的菌種，但其降解產(chǎn)物中含有纖維素成分，效果不夠理想。研究表明，自然界中存在微生物能

16、降解黃原膠。1981年Cripps等發(fā)現(xiàn)了一株能以黃原膠為唯一碳源生長的土壤棒狀桿菌,命名為NCIB11535。1982年Cadmus M C等發(fā)現(xiàn)一種耐鹽的黃原膠降解菌，此菌可在NaC1濃度為410%、48時仍保持一定活性。1983年Bragg J R等在地表土壤發(fā)現(xiàn)的黃原膠降解菌主要為酵母菌和霉菌。2005年黃成棟等在國內(nèi)首次報道了一株黃原膠降解菌，但主要研究的是黃原膠降解菌株分類及降解酶的性質(zhì)，以及用生物降解法生產(chǎn)黃原膠寡糖.因此對從土壤中分離出高效黃原膠降解菌(XDB）的生長規(guī)律進(jìn)行了研究。黃原膠降解菌及生長規(guī)律的研究，對解決石油鉆采中由于黃原膠降解菌的存在而引起的黃原膠失效而導(dǎo)致鉆井

17、液、壓裂液失效等問題,以及用黃原膠降解菌對鉆井液、壓裂液破膠都具有一定的理論指導(dǎo)意義.3。 黃原膠的降解和黃原膠降解菌 目前人們主要嘗試著利用注入黃原膠來封堵石油出口然后利用一些方法降解黃原膠從而開采石油。在石油開采過程中使用黃原膠可提高注入水的黏度,從而提高原油的開采率，但也增加了原油的粘度，使后續(xù)工藝如油料運輸及產(chǎn)品純化的成本增高,因此需要尋找能方便降解黃原膠的方法。目前降解黃原膠的常用方法有物理法、化學(xué)法和酶解法，其中酶解法以其降解過程容易控制、反應(yīng)條件溫和以及對環(huán)境無污染等優(yōu)點而成為黃原膠降解的首選方法 .近年來，國內(nèi)外均有關(guān)于酶解法降解黃原膠的報道.Rinaudo等在1980年第一次

18、報道了用纖維素酶可以降解不規(guī)則構(gòu)象的黃原膠主鏈,但卻幾乎完全不降解具有規(guī)則的螺旋構(gòu)象的黃原膠。為了能有效降解黃原膠，Cripps等人于1981年從土壤中分離到一種能以黃原膠為唯一碳源進(jìn)行生長的棒狀桿菌，隨后陸續(xù)又有研究者又發(fā)現(xiàn)了黃原膠的降解菌株.目前國內(nèi)有研究者分離到了一株能夠使黃原膠粘度迅速下降的Cellulom onas菌，該菌能以黃原膠為唯一碳源進(jìn)行生長，并發(fā)現(xiàn)該菌具有胞外黃原膠降解酶活性.因此，尋找合適的黃原膠降解菌株成為人們探索的新熱點。目前國內(nèi)外對于利用黃原膠降解菌來降解黃原膠已經(jīng)有部分研究。研究者希望通過對已經(jīng)分離出的具有黃原膠降解活性的菌株進(jìn)行分類鑒定，從而確定其菌屬，為篩選出

19、優(yōu)良黃原膠降解菌奠定基礎(chǔ)。而在細(xì)菌的系統(tǒng)分類學(xué)研究中最有用的和最常用的分子鐘是rRNA，其種類少、含量大（約占細(xì)菌RNA含量的80),分子大小適中,存在于所有的生物中，特別是其進(jìn)化具有良好的時鐘性質(zhì)，在結(jié)構(gòu)與功能上具有高度的保守性，素有“細(xì)菌化石”之稱 。rRNA結(jié)構(gòu)既具保守性又具高變性.保守性反映生物物種的親緣關(guān)系，高變性則揭示生物物種的特征核酸序列，是屬種鑒定的分子基礎(chǔ)。16S rRNA 基因大小適中，約1.5Kb左右,含有高度保守的基因片段，同時在不同的菌株間也含有變異的核酸片段，因其既能體現(xiàn)不同菌屬之間的差異。又能利用測序技術(shù)快速得到核酸序列，已成為理想的基因鑒定靶序列。通過對其序列的

20、分析，可以判定不同菌屬、菌種問遺傳關(guān)系的遠(yuǎn)近 。細(xì)菌的16S rRNA可變區(qū)位點結(jié)構(gòu)如下：可變區(qū)序列因不同細(xì)菌而異，恒定區(qū)序列基本保守，所以可以利用恒定區(qū)序列設(shè)計引物將16S rRNA片段擴(kuò)增出來，利用可變區(qū)序列的差異來對不同菌屬、菌種的細(xì)菌進(jìn)行分類鑒定。但較其它方法而言，16S rRNA序列測定分析更適用于確定屬及屬以上分類單位的親緣關(guān)系。因此,本文在對已篩選出的黃原膠降解菌菌株進(jìn)行微生物學(xué)分析的基礎(chǔ)上,結(jié)合其16S rRNA系列分析及比對結(jié)果,從而確定其菌屬。個人收集整理，勿做商業(yè)用途個人收集整理,勿做商業(yè)用途1. 實驗材料1.1材料1。1.1供試菌:黃原膠降解菌混合菌樣品 1。1。2 培

21、養(yǎng)基 黃原膠選擇性培養(yǎng)基: 黃原膠: 2。5, （ 4 ) 2 4 ：0。5, 2 4 ：3.0， 2 4 ：3.0, 4··.7 2：0.2, 3 · 6 2：16。7， 2 · 2 2：0.66, · 2： · 2： 0 。75 · ：3 4 · 62：0。2, 3 3 :0.1， 3： 2。0， 2 4·。· 2 2：置于容量瓶中，用蒸餾水定容至 1L。 1.1。3 試劑與儀器 對羥基苯甲酸酰肼（PAHBAH）購自Sigma，USA；其他試劑為國產(chǎn)分析純試劑；4330型pH計，英國，JEN

22、WAY公司；GL21M 高速冷凍離心機，湘儀離心機廠；QHZ98A全溫度振蕩培養(yǎng)箱，太倉市華美生化儀器廠;BIOSTAT發(fā)酵罐，德國，Heidolph 公司2. 實驗方法2.1 菌種的篩選分離 從野外采集土壤樣和水樣 ,將土樣用無菌水按比例稀釋后 ,接種到黃原膠液體培養(yǎng)基中，水樣接種到液體培養(yǎng)基中,在 35下培養(yǎng)，黃原膠黏度的降低表明了黃原膠被降解，溶液中含有黃原膠降解菌,當(dāng)培養(yǎng)基黏度顯著下降，說明黃原膠降解菌已大量繁殖,可以進(jìn)行下一步的平板劃線分離,分離后取樣鏡檢。并挑取單一菌落再次培養(yǎng)，以黏度下降最快的培養(yǎng)基中的菌種作為后續(xù)試驗菌種。黃原膠液體培養(yǎng)基組成：3g黃原膠,5g NaCl,1gN

23、H4Cl,1g K2HPO4, 0.2g MgSO4·7H2O， 0.5g FeSO4·7H2O， 2g NaNO3， 0。02gZnSO4·7H2O， 0。03g CuSO4·5H2O ， 0.1g CaCL2·6H2O,定容至1L，pH值為7。黃原膠液體培養(yǎng)基組成：3g黃原膠，5g NaCl ，1g NH4Cl ,1g K2HPO4， 0.2g MgSO4·7H2O, 0.5g FeSO4·7H2O，2g NaNO3, 0.02g ZnSO4 ·7H2O，0。03g CuSO4·5H2O , 0。1g

24、 CaCl2·6H2O,定容至1L ,pH值為7.黃原膠平板培養(yǎng)基組成：2。5g 黃原膠，15g 瓊脂，10g NaCl, 0。5g KH2PO4 ，1g NH4Cl,1g CaCl2·6H2O， 2g MgCl2·7 H2O , 0.5g FeSO4 ·7H2O ,定容至1L ,pH 值為7.2。2 菌種的活化 將混合菌液稀釋100倍，以1%的接種量接種于100mL的黃原膠液體培養(yǎng)基，在30，轉(zhuǎn)速200r/min條件下進(jìn)行搖床培養(yǎng)24-48h,使菌種活化。2.3 菌種的選擇性培養(yǎng) 活化后的菌種接種于黃原膠選擇性培養(yǎng)基，在30，轉(zhuǎn)速200r/min 條件

25、下進(jìn)行搖床培養(yǎng),培養(yǎng)時間為48h。將培養(yǎng)48h后的菌液用常規(guī)的方法涂布于黃原膠平板培養(yǎng)基，于30培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h并觀察其生長情況。挑取帶有水解圈的菌株進(jìn)行平板劃線稀釋培養(yǎng)并進(jìn)行甘油保菌. 2.4 黃原膠降解菌的生長曲線 以黃原膠為唯一碳源，添加氮磷等無機鹽制成黃原膠液體培養(yǎng)基,滅菌后,接種篩選出黃原膠降解菌， 測初始菌濃度，調(diào)節(jié)pH值為7，放置搖床在35下恒溫培養(yǎng),搖床轉(zhuǎn)速為120 r/ min,每隔24h測一次菌數(shù)。2。5。 影響黃原膠降解菌生長的因素2。5。1 溫度對黃原膠降解菌的影響。分別配制100mL (礦化度為5×103mg/L)相同條件下的培養(yǎng)基，接種5%黃原膠降解菌，

26、在初始pH值為7時,放置轉(zhuǎn)速為120r/min 恒溫?fù)u床中振蕩培養(yǎng) 培養(yǎng)溫度分別為25、30、35，72h后分別測定培養(yǎng)基中黃原膠降解菌的數(shù)量,見圖1 ,以確定該菌生長的最適溫度。 2.5。2 碳源對發(fā)酵的影響： 向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入1的硝酸銨及1%不同種類的碳源，培養(yǎng)72h后，測菌體生物量及酶活，見表1。 表1 碳源對菌體生長的影響碳源生物量（OD 620nm)葡萄糖0。558蔗糖0。327山梨醇0.356乳糖0。469麥芽0.2872.5.3 pH 值對菌體生長及發(fā)酵產(chǎn)酶的影響 用 HCl 和 NaOH 調(diào)節(jié)發(fā)酵培養(yǎng)基的 pH,滅菌后用同一制備的菌懸液接種,考察了上述優(yōu)化確定發(fā)酵培養(yǎng)基初始

27、pH 值分別為 6、6.5、7、7。5 和 8時發(fā)酵液的黃原膠酶活性及菌體密度，結(jié)果顯示（圖2） 圖2 pH對菌體的影響 2。5。4 氮源對菌體生長的影響 首先考察了氮源物質(zhì)對發(fā)酵產(chǎn)酶的影響，向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入 1的5種不同種類的氮源，培養(yǎng) 72 h后，測定菌體生物量及酶活(見表2）。表2 氮源對菌體生長的影響氮源生物量（OD 620nm）蛋白胨0.330尿素0。322硝酸銨0。470硝酸鈉0.340氯化按0.335 3. 結(jié)論分別考察了25、30、35培養(yǎng)溫度下發(fā)酵液菌體密度隨時間的變化規(guī)律，其他發(fā)酵條件為：搖瓶裝量為30mL，初始pH為7.0，接種量為1，搖速為200 r/min.結(jié)果可知

28、（圖1）在發(fā)酵溫度為30時可獲得最大菌體量。 分別對葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖和麥芽糖對菌體生長的影響的測量見表2 表明，葡萄糖效果最好. pH 值分別為 6、6.5、7、7.5 和 8時發(fā)酵液的黃原膠酶活性及菌體密度，結(jié)果顯示（圖2)。得出初始 pH 7.0 時發(fā)酵液產(chǎn)生的黃原膠酶活性最高，菌體密度也達(dá)到最大，因此發(fā)酵過程應(yīng)該在中性條件進(jìn)行。向培養(yǎng)基中加入蛋白胨、尿素、硝酸銨、硝酸鈉、氯化按五種不同的氮源培養(yǎng)72h后從表2中得出硝酸銨發(fā)酵水平較高,而且來源容易,因此選其作為發(fā)酵培養(yǎng)基的氮源物質(zhì)。參考文獻(xiàn)1 Cripps R E， Sommerville H J , Holt M S. Xan

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