T細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)

1、1會(huì)計(jì)學(xué)T細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)細(xì)胞檢測(cè)技術(shù) 淋巴細(xì)胞DNA合成 分化 母細(xì)胞刺激物細(xì)胞變大細(xì)胞漿擴(kuò)大空泡核仁明顯核染色質(zhì)疏松第2頁(yè)/共18頁(yè)2、檢測(cè)方法%100胞數(shù)轉(zhuǎn)化和未轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞數(shù)轉(zhuǎn)化率第3頁(yè)/共18頁(yè)第4頁(yè)/共18頁(yè)值值)均A對(duì)照孔cpm()均A試驗(yàn)孔cpm(490nm490nmSI 優(yōu)點(diǎn)：3H-TdR摻入法敏感性高，客觀性強(qiáng)，重復(fù)性好。缺點(diǎn)：但需一定設(shè)備條件，同時(shí)還存在放射性核素污染問題。第5頁(yè)/共18頁(yè)第6頁(yè)/共18頁(yè)第7頁(yè)/共18頁(yè)第8頁(yè)/共18頁(yè)第9頁(yè)/共18頁(yè)第10頁(yè)/共18頁(yè)第11頁(yè)/共18頁(yè)第12頁(yè)/共18頁(yè)1、51Cr釋放實(shí)驗(yàn)第13頁(yè)/共18頁(yè)2、IC Assay

2、（In vivo cytotoxicity Assay） 表達(dá)特定抗原的腫瘤細(xì)胞系經(jīng)CFSE標(biāo)記后，皮下注射入小鼠，被小鼠體內(nèi)抗原特異性CTL作用24小時(shí)后，取出腫瘤細(xì)胞，檢測(cè)其CFSE含量。方法學(xué)評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)：反應(yīng)體內(nèi)殺傷效果；缺點(diǎn)：影響因素多；第14頁(yè)/共18頁(yè)第15頁(yè)/共18頁(yè)1、Tetramer技術(shù) 模擬T細(xì)胞活化的第一信號(hào)，構(gòu)建熒光標(biāo)記的MHC-肽復(fù)合物，被特異性T細(xì)胞識(shí)別。通過檢測(cè)標(biāo)記的熒光，反應(yīng)活化的特異性T細(xì)胞。方法學(xué)評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，快速，敏感缺點(diǎn)：成本高，受HLA型別的限制第16頁(yè)/共18頁(yè)2、表面標(biāo)志CD107a/b的檢測(cè) CD107a/b表達(dá)于T細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)膜上，隨著脫顆粒作用，一過性表達(dá)于細(xì)胞表面；T細(xì)胞表面CD107a/b的檢測(cè)可反應(yīng)T細(xì)胞的溶解靶細(xì)胞效應(yīng)。方法學(xué)評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便，快速，敏感，不受HLA型別的限制缺點(diǎn)：脫顆粒作用的非特異性第1