2016年廣東自主招生生物模擬試題：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段

1、2000份高職單招試題，全部免費提供！育龍單招網(wǎng)，單招也能上大學(xué)2016年廣東自主招生生物模擬試題:多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段【試題內(nèi)容來自于相關(guān)網(wǎng)站和學(xué)校提供】1：下列有關(guān)pcr的描述，不正確的是(    )a、pcr技術(shù)的原理是dna復(fù)制b、用pcr技術(shù)擴(kuò)增dna是一個酶促反應(yīng)，需耐高溫的解旋酶和dna聚合酶c、一個dna片段經(jīng)pcr擴(kuò)增，可形成2n個dna片段(n代表循環(huán)次數(shù))d、 pcr利用了dna的熱變性來控制dna的解旋與結(jié)合2：taqdna聚合酶的特點是（  ）a、耐高溫b、耐鹽酸c、耐強堿d、不耐熱3：下列關(guān)于dna擴(kuò)增(pc

2、r技術(shù))的說法，不正確的是                 a、pcr儀能夠自動調(diào)控溫度b、pcr反應(yīng)需要適宜的ph條件，并需要在一定的緩沖液中進(jìn)行c、pcr反應(yīng)需要的酶與人體內(nèi)dna復(fù)制所需要的酶一樣d、pcr技術(shù)利用了dna分子的熱變性原理4：pcr利用了dna熱變性的原理，pcr儀實際上也是一種能自動調(diào)控溫度的儀器，對pcr過程中“溫度的控制”的說法錯誤的是(    )a、酶促反應(yīng)需要高的溫

3、度，是為了確保模板是單鏈b、延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度，而小于變性溫度c、dna聚合酶具有耐高溫的能力d、dna解旋酶具有耐高溫的能力5：以下關(guān)于pcr技術(shù)的說法不正確的是                            a、pcr是體外復(fù)制dna的技術(shù)b、pcr過程需要模板、四種脫氧核苷酸、引物、taq酶c、p

4、cr過程中只需要兩個引物分子d、pcr技術(shù)中可以根據(jù)已知的核苷酸序列合成引物6：在進(jìn)行dna親子鑒定時，需大量的dna。pcr技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）可以使樣品dna擴(kuò)增，獲得大量dna克隆分子。該技術(shù)的原理是利用dna的半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行dna的人工復(fù)制（如圖，圖中黑色長方形是引物）。在很短的時間內(nèi)將dna擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實驗室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(1)圖中的變性、延伸分別是指_、_、_。(2)某樣品dna分子中共含3 000個堿基對，堿基數(shù)量滿足：(a+t)(g+c)=12，若經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入_個腺嘌呤脫氧核苷酸。（不考慮引物所對應(yīng)的片段）(

5、3)若下圖為第一輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)pcr擴(kuò)增的產(chǎn)物。7：（2014河北石家莊月考）pcr是一種體外快速擴(kuò)增dna的方法，用于擴(kuò)增特定的dna片段，數(shù)小時內(nèi)可使目的基因片段擴(kuò)增到數(shù)百萬個拷貝。請回答相關(guān)問題：(1) dna分子的兩條鏈在堿基關(guān)系上表現(xiàn)為_，dna的兩條鏈在方向上表現(xiàn)為_；通常將_的末端稱為5端；當(dāng)引物與dna母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后，dna聚合酶就能從引物的_開始延伸dna鏈，故dna子鏈復(fù)制的方向是_。(2) pcr與體內(nèi)dna復(fù)制的不同之處主要表現(xiàn)在溫度上，在pcr中先用95高溫處理的目的是_；而這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過_實現(xiàn)的。(3) pcr需要模

6、板dna、引物、_和_等條件，其中的引物實質(zhì)上是一種_8：請根據(jù)以下圖表回答問題。(1)在采用常規(guī)pcr方法擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的dna聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的dna聚合酶，其最主要的特點是 _。(2) pcr過程中復(fù)性溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。如表為根據(jù)模板設(shè)計的兩對引物序列，如圖為引物對與模板結(jié)合示意圖。請判斷哪一對引物可忍耐較高的復(fù)性溫度 _。9：pcr技術(shù)是把dna片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地擴(kuò)增任何要求的目的基因或dna分子片段，它的基本過程如下圖所示：注：圖中短線表示每次擴(kuò)增過程中需要的引物。每個引物約含20個脫氧

7、核苷酸，并分別與兩條單鏈dna結(jié)合，其作用是引導(dǎo)合成dna子鏈。(1) pcr技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)_的過程。(2) pcr擴(kuò)增過程中需要對dna片段進(jìn)行高溫處理，其目的是_，此過程在生物體內(nèi)為_，需_酶的參與。(3)假如引物都用3h標(biāo)記，從理論上計算，所得dna分子中含有3h標(biāo)記的占_。(4)假定dna片段含200對脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計算需要_個游離脫氧核苷酸。10：（2015湖北襄陽第一次調(diào)研）生活飲用水已經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時，仍然會含相當(dāng)量的微生物甚至含致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用

8、水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。我國生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)( cb5749 - 85)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個/ml，總大腸菌群不得大于3個/l。(1)檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱力_。(2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設(shè)置對照組？為什么？_  _。(3)如分別取0.1 ml已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿

9、菌數(shù)為_。(4)純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用法滅菌， _（可不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染。(5)如果要測定水中的病毒種類，可以用_技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用_技術(shù)進(jìn)行鑒定。11：生物選修1生物技術(shù)實踐（15分）請回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐的問題：（1）利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是高性能纖維素酶的獲取?？茖W(xué)家利用培養(yǎng)基能從地壤中選擇出能分解纖維素的細(xì)菌。這類細(xì)菌經(jīng)過大量培養(yǎng)后可以從中提取纖維素酶。土壤中富含各種微生物，將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可得到能分解纖維素的細(xì)菌，實驗室中獲取純凈菌的常用方法有      

10、60;        和                   。使用纖維素酶和化學(xué)方法均能分解纖維素，說出使用酶解法處理的優(yōu)點：             。（2）酵母菌是一種真菌，可用于制作果酒。果汁

11、發(fā)酵后是否產(chǎn)生酒精，可以用            來檢驗，在酸性條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈           色。酵母菌細(xì)胞固定化可大大提高生產(chǎn)效率。固定酵母菌細(xì)胞時首先需要將干酵母放入     中活化；若制得的凝膠珠著色過淺，可能是       

12、                   。（3）突變菌往往帶有一些特殊的基因，在獲得這些基因的過程中，pcr技術(shù)相當(dāng)重要。pcr擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物作用是              ，加入dna聚合酶的作用是     

13、60;       。（4）加酶洗衣粉中有的加有香精，高檔洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前從植物中提取芳香油的方法有                  等。（5）雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、           &

14、#160;              。12：利用玉米秸稈生產(chǎn)乙醇,其技術(shù)流程為：(1) 玉米秸桿經(jīng)預(yù)處理后，應(yīng)該選用纖維素酶進(jìn)行水解，使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。 纖維素酶可以從能分解纖維素的細(xì)菌培養(yǎng)液中提取。某同學(xué)設(shè)計了如下分離土壤中 纖維素分解菌的實驗流程:土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋鑒別培養(yǎng)。從土壤中分離出分解纖維素細(xì)菌的培養(yǎng)基配方如下：纖維素粉5g, nano3 1g、 na2hpo4 7hz0 1.2g、kh2po4 0.9 g,mgs04

15、3;7h20  0.5g、k cl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸餾水定容到iooomu9該培養(yǎng)基能初步選擇出分解纖維素細(xì)菌的原因是_為了鑒別纖維素分解菌和進(jìn)一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基上加入_染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用涂布平板法方法接種到鑒別培養(yǎng)基上，然后挑選產(chǎn)生_的菌落作為菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。從分解纖維素細(xì)菌中提取出的纖維素酶首先要檢測_，以便更好地將酶用于生產(chǎn)實踐。為了使分離出的纖維素酶能夠反復(fù)使用，最好采用_或_方法將酶固定化。(2) 發(fā)酵階段需要的菌種是酵母菌，在產(chǎn)生酒精時要控制的必要條件是_。(3) 發(fā)酵時乙醇濃度升高會對酵母菌產(chǎn)生毒性,從而影響進(jìn)一步

16、的發(fā)酵?？茖W(xué)家利用基 因工程方法創(chuàng)造出一種對乙醇濃度有高耐受力的酵母菌新菌種，該過程需采用pcr 技術(shù)擴(kuò)增目的基因。在pcr反應(yīng)體系中，除了要加入模板、原料外，還需要加入_和_等13：在遺傳病及刑偵破案中常需要對樣品dna進(jìn)行分析，pcr技術(shù)能快速擴(kuò)增dna片段，在幾個小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的dna拷貝，有效地解決了因為樣品中dna含量太低而難以對樣品進(jìn)行分析研究的問題。下圖為某一次循環(huán)的產(chǎn)物，請據(jù)圖回答問題。（1）dna的羥基(oh)末端稱為        ，圖中所示的羥基端為   &

17、#160;          。(填字母)（2）以引物為標(biāo)記，可判斷出此產(chǎn)物最早為第        次循環(huán)的產(chǎn)物。一次循環(huán)包括的三個環(huán)節(jié)是                       

18、60;          。（3）請根據(jù)右圖,在橫線處寫出引物。(4) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32p標(biāo)記，循環(huán)n次后生成的dna分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為       。某樣品dna分子中共含3000個堿基對，堿基數(shù)量滿足：（a+t）/（g+c）1/2，若經(jīng)5次循環(huán)，獲得32個與樣品相同的dna分子，至少需要向試管中加入個腺嘌呤脫氧核苷酸。（不考慮引物所對應(yīng)的片段）（5）“pcr”與人體內(nèi)dna復(fù)制相比，有

19、何特殊之處？（答出2項）                                                

20、                    。14：（每空1分，共9分）資料顯示，近10年來，pcr技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)）成為分子生物學(xué)實驗的一種常規(guī)手段，其原理是利用dna分子半保留復(fù)制的特性，在試管中進(jìn)行dna的人工復(fù)制（如下圖），在很短的時間內(nèi)，將dna擴(kuò)增幾百萬倍甚至于幾十億倍，使分子生物實驗所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。據(jù)圖回答下列問題：（1）加熱至94的目的使dna分子的樣品中鍵

21、斷裂，這一過程在生物體細(xì)胞內(nèi)是通過的作用完成的。（2）當(dāng)溫度降低時，引物與模板鏈結(jié)合，在酶的作用下，引物引導(dǎo)子鏈延伸，最終1個dna分子復(fù)制成2個dna分子。此過程中的原料是。（3）通過生化分析得出新合成的dna分子中，at、gc這個事實說明dna分子的合成遵循。（4）新合成的dna分子與模板dna分子完全相同的原因是。（5）通過pcr技術(shù)使dna分子復(fù)制時，若將一個兩條均被15n標(biāo)記的dna分子放入試管中做模板，以14n標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，復(fù)制產(chǎn)生兩個dna分子，經(jīng)分析得知：每個dna分子中的一條鏈含14n，一條鏈含15n，則說明。（6）pcr技術(shù)的必需要條件，除了模板、原料、atp和酶

22、外，至少還需要三個條件，即液體環(huán)境，適宜的和。15：（8分） pcr技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一項在生物體外復(fù)制特定的dna片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過程，請據(jù)圖分析回答：（1） c過程要用到的酶是。pcr反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有：，。（2） 人類利用pcr技術(shù)合成的dna進(jìn)行新子鑒定，其原理是：首先獲取被測試者的dna，并進(jìn)行pcr擴(kuò)增，放進(jìn)凝膠內(nèi)，用電泳推動dna小片段分離，再使用特別的“探針”去尋找基因。相同的基因會凝聚在一起，然后利用特別的染料在x光下，便會顯示由dna探針凝聚于一起的黑色條碼。每個人的條碼一半與其母親的條碼吻合，另一半與其父親條碼吻合。下圖為某小孩和

23、其母親以及待測定的四位男性的dna指紋圖譜示意圖，請推測該小孩真正生物學(xué)上的父親是，為什么？。如果四位男性中有該小孩的同母異父的兄弟，請推測該小孩的同母異父的兄弟有 。答案部分1、bpcr是一種體外迅速擴(kuò)增dna片段的技術(shù)，它以極少量的dna為模板，以四種脫氧核苷酸為原料，在引物作用下使dna聚合酶從引物的3'端連接脫氧核苷酸，短時間內(nèi)迅速復(fù)制上百萬份的dna拷貝。pcr利用dna在不同溫度下變性解聚或復(fù)性的特性來解旋并結(jié)合引物，不用解旋酶解旋。2、a略3、cpcr反應(yīng)需要的酶是耐高溫的dna聚合酶，人體內(nèi)dna復(fù)制所需要的酶是不耐高溫，所以c選項錯誤。4、dpcr是體外dna擴(kuò)增，d

24、na雙鏈的解開不需要解旋酶，靠高溫使其變性，雙鏈螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開，在復(fù)性前，在耐高溫的dna聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補配對原則合成新的dna，因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度小于變性溫度。5、cpcr過程中需要的是一對正反向引物分子,但是分子數(shù)并不是各一個。因為pcr不是一次性反應(yīng)，它是多循環(huán)的過程，所以pcr過程需要大量引物分子。所以c不正確。6、(1)模板dna雙鏈解旋形成單鏈在dna聚合酶的作用下，原料脫氧核苷酸聚合形成新的dna鏈(2) 31 000(3)如圖    (1)變性的實質(zhì)是dna雙鏈解旋；延伸是以dna單鏈為模板，按堿基互補配對原則合成子鏈的

25、過程。(2)由(a+t)( g+c)= 1/2可知a:t:g:c=1:1:2:2，所以a的比例為1/6，在一個dna分子中的數(shù)量為3 000x2x(l/6)=1 000(個)，5次循環(huán)形成的dna數(shù)為32個，所以需要利用原料合成的dna數(shù)相當(dāng)于32-1= 31（個），至少需腺嘌呤脫氧核苷酸為31x1000= 31000（個）。(3)畫圖的關(guān)鍵是注意引物a、b的位置和所對應(yīng)的模板鏈。7、(1)互補配對  反向平行  磷酸基團(tuán)  3端  5 端到3端(2)使兩條鏈之間的氫鍵斷裂  解旋酶(3)四種脫氧核苷酸  耐熱的dna聚合酶 

26、; 單鏈dna分子或rna分子dna的兩條鏈在堿基關(guān)系上表現(xiàn)為互補配對，在方向上表現(xiàn)為反向平行。通常將dna含有磷酸基團(tuán)的一端稱為5端，dna聚合酶只能從引物的3端連接脫氧核苷酸，故子鏈復(fù)制的方向是5端到3 端。在pcr技術(shù)中，95高溫處理的目的是使兩條鏈之間的氫鍵斷裂，這一過程在細(xì)胞內(nèi)通過解旋酶來實現(xiàn)。pcr技術(shù)中除需要模板dna、引物、四種脫氧核苷酸外，還需要耐熱的dna聚合酶等條件，其中的引物是一種單鏈dna分子或rna分子。 8、(1)耐高溫(2)引物對b本題考查運用pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因的有關(guān)知識以及對圖表的識別能力。(1) pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的dna聚合

27、酶具有耐高溫的特性。(2)引物對b中含c-c堿基對較多，可忍耐較高的復(fù)性溫度。 9、(1)dna復(fù)制(2)使dna兩條鏈彼此分開  解旋  解旋( 3)100%(4)2 800由圖可知，高溫變性的過程就是dna在高溫條件下解旋的過程，在生物體內(nèi)則需要解旋酶的催化才能進(jìn)行。低溫復(fù)性時兩個dna分子都需要引物。每次低溫復(fù)性時，引物都與兩條單鏈dna結(jié)合，進(jìn)而形成雙鏈dna，所以所得dna中均含3h。擴(kuò)增3次一共形成了8個子代dna片段，需游離的脫氧核苷酸數(shù)為(8-1)×400=2 800個。 10、(1)稀釋涂布平板法(2)需要，因為需要判斷培養(yǎng)基

28、是否被污染(3) 1.61x(4)高壓蒸汽滅菌不可(5)pcr dna分子雜交(1)檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為稀釋涂布平板法。(2)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設(shè)置對照組，通過設(shè)置對照組來判斷培養(yǎng)基是否被污染。(3)如分別取0.1 ml已稀釋倍的水樣分別涂布到四個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，由題意可知，每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為( 161+155+158+170)×÷( 4x0.

29、1x10-3)=l.61x。(4)培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染，因為大腸桿菌對抗生素敏感。(5)遺傳物質(zhì)擴(kuò)增常用pcr技術(shù)，可用dna分子雜交技術(shù)鑒定水中病毒的種類。 11、（1）平板劃線法（1分）稀釋涂布平板法（1分）不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、高效、專一（1分）（2）重鉻酸鉀 （1分）     灰綠 （1分） 蒸餾水 （1分）   海藻酸鈉濃度過低（1分）（3）使dna聚合酶能夠從引物的3/端開始連接脫氧核苷酸（2分） 

30、60;催化dna分子鏈的合成（2分）（4）萃取法、蒸餾法、壓榨法（任選兩種）（2分）（5）碳源、氮源和無機鹽（2分）考查有關(guān)生物技術(shù)實踐相關(guān)知識。（1）要求識記。（2）干酵母吸水后，開始恢復(fù)生命活力，代謝加強；海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量，如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少?？梢酝ㄟ^觀察凝膠珠的顏色和形狀來判斷：如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高。（3）要求理解pcr過程原理，并注意記憶相關(guān)知識。（4）植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，要求識記。（5）雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，注意記憶。12、（1）纖維素是培養(yǎng)基主要碳源    剛果紅 透明圈   酶的活性（活力） 化學(xué)結(jié)合  物理吸附（2）無氧（密閉、密封）（3）兩種引物   耐熱的dna